183480. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új indol és indolin származékok előállítására
I 183 480 A simaizom sejteket kihelyeztük 10% borjúmagzat szérumot és antibiotikumot tartalmazó 2 ml DME táptalajjal töltött 35 x 10 mm-cs Falcon-táiba 100000 — 200000 sejt mennyiségben. A sejteknek a tálakba helyezése után 24 órával a közeget 1% borjúmagzat szérumot és antibiotikumot tartalmazó 2 ml DME táptalajjal cseréltük ki. A tenyészeteket további 3 napig inkubáltuk, amíg a sejtek nyugalomba kerültek, azaz a sejtosztódás megszűnt. Ezután a közeget 2 ml kontrollal vagy vizsgálati közeggel cseréltük ki. A vizsgálati közeg 10% borjúmagzat szérumot és antibiotikumot tartalmazó DME közegből és 56ug/ml koncentrációjú vizsgálandó vegyületből állt. A vegyületeket acetonban előre feloldottuk, így az acetonnak a közegben 0,2 tf.% koncentrációja volt. A kontroll közeg 10% borjúmagzat szérumot és antibiotikumot tartalmazó DME közegből és 0,2 tf.% koncentrációjú acetonból állt. A vizsgálandó vagy kontroll közeg 3 napos inkubálása után a közeget kicseréltük friss vizsgálandó vagy kontroll közeggel és a sejteket további 3—4 napig inkubáltuk. Hat vagy hét napos inkubálási idő után a sejtek számát meghatároztuk a sejtek tripszines kezelésével, majd a sejtszuszpenziónak Coulter-féle készülékkel való mérésével. A kővetkező II. táblázatban megadott eredmények 4 tálban meghatározott sejtek átlagát jelentik. A szaporodás %-os gátlását a következő képlettel számítottuk ki: Szaporodás %-os gátlása — 100— x íooj 5 — edényenkénti sejtek száma a kísérlet kezdetekor (a kontroll vagy vizsgálandó közeg hozzáadása után); T — tálankénti sejtek száma a vizsgálandó vegyületet tartalmazó közegben a kísérlet befejezése után; C — a tálankénti sejtek száma a kontroli közegben a kísérlet befejezése után. II. táblázat Vegyüld Gátlás, % G 51, 36 AJJ 45, 30 YY 78, 76 46 T 30, 35 C 69, 45 TT 61, 64 NN ÁSS 76, 36 78 A vegyületek hasznosságát növeli az a tény, hogy rendkívül csekély mértékben toxikusak, amint az a következő vizsgálatból kitűnt. Perorális toxicitás egéren Egércsoportoknak perorálisan a vizsgálandó vegyüld fokozatos adagjait adtuk (0,5 s/tf.% os vizes tragant nyák szuszpenzióban), majd 3 napig azokat megfigyelés alatt tartottuk. Az egyes adagoktól a vizsgálati idő alatt elpusztult állatok %-os arányából görbéi szerkesztettünk, amelynek segítségével kiszámítottuk az LD 50 értékét, azaz azt az adagol, amelytől az egerek 50%-a elpusztult (ing/kg testsúlyban). A találmány szerinti vegyületeket megvizsgálva mindegyik vegyüld LD 50 értéke nagyobb volt, mint 1000 mg/kg testsúly. A találmány szerinti előnyös vegyületek a T, C, G, F, D, VV, YY, ACC és AFF azonosítási jelű vegyületek. Az I általános képletű vegyületeket az indol- és indolin-származékok előállítására ismert módszerek alkalmazásával vagy felhasználásával állíthatjuk elő; a találmány szerint a következő módszerekkel. a) Azok az I általános képletű vegyületek, amelyek képletében —'—---- a szénatomok közötti kettős kötést jelent, R2 a fenti jelentésű, R1 és R3 hidrogénatomot jelent, egy VII általános képletű vegyüld — ebben a képletben R2 a fent megadott — ciklizálásával állíthatók elő például kálium-terc-butoxiddal vagy nátrium-metoxiddal vagy nátrium-amiddal (a) magasabb hőmérsékleten, például 240 és 350 °C között, azaz 290 és 305 °C között oldószer nélkül vagy előnyösen (b) magasabb hőmérsékleten, például 180 és 240 °C között, azaz a reakcióelegy visszafolyatási hőmérsékletén iners szerves oldószer, például dietilanilin jelenlétében. b) Azokat az I általános képletű indol-vegyületeket, amelyek képletében------------a szénatomok közötti kettős kötést képvisel, R1 a korábban meghatározott, adott esetben hidroxilcsoporttal szubsztituált 1—6 szénatomos alkilcsoportot jelenti, R2 és R3 a korábban megadott jelentésű, úgy állíthatjuk elő, hogy egy VIII általános képletű 3-alkiltio-származékot — ebben a képletben R2 és R3 a fent megadott jelentésű, R1' az R1 jelentésére megadott, adott esetben hidroxilcsoporttal szubsztituált 1—6 szénatomos alkilcsoportot képviseli, és R4 egyenes vagy elágazó szénláncú, 1—6 szénatomos alkilcsoportot jelent — Raneynikkellel iners szerves oldószer, például dioxán jelenlétében reagáltatunk. c) Olyan I általános képletű indol-vegylileteket, amelyek képletében------------a szénatomok közötti kettős kötést jelöl, R1 és R2 a fent megadott jelentésű és R3 hidrogénatomot jelent, egy X általános képletű vegyüld — ebben a képletben X“ aniont, előnyösen klorid-, bromid- vagy jodidiont, Z adott esetben szubsztituált fenilcsoportot jelent, R1 és R2 a fent megadott jelentésű — ciklizálásával állítunk elő iners szerves oldószer, például toluol és bázis., például alkálifém-alkoxid jelenlétében, előnyösen magasabb hőmérsékleten, például 80 és 150 °C között. d) Olyan I általános képletű indol-vegyületeket, amelyek képletében ...............a szénatomok közötti kettős kötést képvisel, R‘ és R2 a fent megadott jelentésű, és R3 hidrogénatomot jelent, egy XI általános képletű vegyüld — ebben a képletben R1 és R2 a fent megadott jelentésű — kémiai vagy katalitikus hidrogénezéssel való redukálásával, majd a kapott közbülső vegyüld ciklizálásával állítunk elő. A kémiai redukálást vasporral iners szerves oldószerben, szerves sav jelenlétében, például etanol és ecetsav elegyében végezhetjük. A katalitikus hidrogénezést például palládium-szén katalizátorral, adott esetben jégecet jelenlétében szerves oldószerben vagy szerves oldószerelegyben hajtjuk végre. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 66 6
