183223. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a friss Digitális Lanata növényből kapott nyers vizes glikozidok tisztítására
1 183 223 2 vetlen kisajtolás útján kapott préslével egyesítve — feldolgozzuk a találmány szerinti eljárással. A nyers vizes oldat 50-100 °C, előnyösen 70-80 °C hőmérsékleten történő hőkezelése során kapott csapadék kiszűrése után kapott tisztított vizes oldatot a találmány szerinti eljárás célszerű kiviteli módja esetében az említett hőkezeléssel azonos hőmérsékleten eredeti térfogatának 1/10—1/20 részére betöményítjük, majd vízzel nem elegyedő oldószerrel, célszerűen kloroformmal, diklór-metánnai, vagy etíl-acetáttal extraháljuk és a szerves oldószeres fázisból, az oldószer eltávolítása útján nyerjük ki a további feldolgozásra alkalmas nyers glikozídtartalmú terméket. A friss növény-részek kisajtolása és/vagy vizes kivonatolása útján kapott nyers vizes glikozidoldatot a találmány szerinti hőkezelés előtt célszerűen a kinyerni kívánt hatóanyag enzimes kialakítását és/vagy dúsítását illetőleg a nem kívánt enzimhatás elleni védelmét célzó kezelésnek vetjük alá. Ez a kezelés a szakmabeliek számára nyilvánvaló módon függ a kinyerni kívánt hatóanyagok természetétől. így olyan esetben, amikor a szekunder glikozidokat, mint digoxint és/vagy digitoxint kívánunk kinyerni, akkor a kezelést — önmagában ismert módon — úgy végezzük, hogy elősegítsük a natív glikozid glükózcsoportjának a növény természetes enzimje általi lehasítását, tehát például a friss préslevet 25 °C hőmérsékleten 8-10 óra hosszat állni hagyjuk, míg olyan esetekben, amikor a primer glikozidok, például C-lanatozid kinyerése a célunk, akkor a felaprított friss növény-részeket az enzimhatást gátló kezelésnek, például 1 atm. túlnyomású gőzzel történő rövid idejű átfúvatásnak vetjük alá. A találmány szerinti eljárás nemcsak azzal az előnynyel jár, hogy feleslegessé teszi a frissen learatott Digitalis lanata növény számottevő energiát és időt igénylő szárítását, ami nagy mértékben megnöveli a learatott növény nagyipari feldolgozási kapacitását is, hanem igen számottevően javítja a glikozidok kinyerési hatásfokát is. Míg az eddig ismert nagyüzemi eljárásokkal a friss növény eredeti glikozidtartalmának 30 % körüli mennyisége volt gazdaságos módon kinyerhető, addig a találmány szerinti eljárás 60 %-ot is elérő gazdaságos kinyerést tesz lehetővé. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módjait közelebbről az aláobi példák szemléltetik. 1. példa 10 kg frissen learatott Digitalis lanata földfeletti növény-részeket (szárazanyag-tartalom: 2,5 kg; a dezacetilezés és giükóz-lehasítás után réteg-kromatográfiával meghatározott glikozidtartalom szárazanyagra számítva: 0,5 % digoxin és 0,1 % digitoxin, ami a fenti mennyiségben 12,5 g digoxínnak és 2,5 g digitoxidnak felel meg) kalapácsos őrlőben 3—6 mm nagyságúra aprítunk és a felaprított növényt kisajtoljuk. 4,5 liter préslevet kapunk, ezt 25 °C hőmérsékleten 10 óra hosszat állni hagyjuk. Az 5,5 kg súlyú préskalácsot 20 liter 40 °C hőmérsékletű vízvezetéki vízzel 8 óra hosszat keverjük, majd az így kapott zagyot kisajtoljuk; így 20,5 liter további préslevet kapunk. A fenti két préslevet egyesítjük és áramoltatás közben 70 °C hőmérsékletre melegítjük. Az eközben képződött csapadékot erős keveréssel eloszlatjuk, majd kiszűrjük. Az üledékmentes szúrletet 70 °C hőmérsékleten vákuumban 1,5 literre besűrítjük, a koncentrátumot szobahőmérsékletre hűtjük és 1,5 liter, majd 1 liter kloroformmal extraháljuk, a kloroformos kivonattal egyesítjük, az oldószert légköri nyomáson le desztilláljuk és a maradékot vákuumba, 60 °C hőmérsékleten állandó súlyig szárítjuk. Ily módon 180 g nyers terméket kapunk, amely (a szokásos módon történő dezacetilezés után, rétegk omatográfiával meghatározva) 6,44% (11,6 g) digoxint és 1,33 % (2,39 g) digitoxint tartalmaz. 2. példa 10 kg frissen learatott Digitális lanata növényt az 1. példában leírt módon dolgozunk fel, de az egyesített préslevek besűrített szűrletét 1,5 liter, majd 1 liter diklór-metánnal extraháljuk. Az egyesített diklór-metános kivonatból az 1. példa szerinti módon hasonló menynyiségií és minőségű nyers terméket kapunk. 3. példa 10 kg frissen learatott Digitalis lanata földfeletti nővén} -részeket (szárazanyag-tartalom: 2,5 kg, réteg-kromatogi áfiával meghatározott C-lanatozid-tartalom szárazanyagra számítva 0,48 %, ami a fenti mennyiségű növényi lúindulási anyagra számítva 12 g C-lanatozid tartalomnak felel meg) kalapácsos őrlőben 3—6 mm nagyságúra aprítunk és a felaprított növényi részeket enzimgátlás céljából 1 atm. túlnyomású gőzzel átfúvatjuk, majd kisajtoljuk; 5 liter préslevet kapunk. A 5,5 kg súlyú préskalácsot 20 liter 40 °C hőmérsékletű vízvezetéki vízzel 4 óra hosszat keverjük, majd a zagyot kisajtoljuk, így további 20,5 liter préslevet kapun!:. A fi nti két préslevet egyesítjük és áramoltatás közben 70 °C hőmérsékletre melegítjük. A képződött csapadékot erős keveréssel eloszlatjuk, majd szűréssel eltávolítjuk. Az üledékmentes szűrletét 70 °C hőmérsékleten, csőkké rtett nyomáson 1,5 liter térfogatra lepároljuk, a koncentrátumot szobahőmérsékletre hűtjük és előbb 1,5 liter, majd 1 liter kloroformmal extraháljuk. Az egyesített Horoformos kivonatból az oldószert légköri nyomáson le desztilláljuk és a maradékot 60 °C hőmérsékleten állandó súlyig szárítjuk. Ily módon 150 g nyers terméket kapunk, amely (réteg-kromatográfiával meghatározva) 7,36% (11,04 g) C-lanatozidot tartalmaz. 4. példa A 3. példában leírt módon dolgozunk, de azzal az eltéréssé', hogy a leszűrt préslé koncentrátumát 1,5 liter, majd 1 liter etíl-acetáttal extraháljuk. Az egyesített kivona.ból az oldószer ledesztiliálása után 105 g nyers terméket kapunk, amely (réteg-kromatográfiával meghatározva) 10,51 % (11,04 g) C-lanatozidot tartalmaz. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás a friss Digitalis lanata növény földfeletti részeibe! kapott nyers vizes glikozidoldatok tisztítá5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
