182537. lajstromszámú szabadalom • Eljárás specifikus vér koaguláló faktor elkülönítésére polieleaktrolitokkal
27 182537 28 A visszanyerést bizonyító méréseket a 14. példában ismertetetett 14. és 18. lépések során nyert felülúszókból, az aktivációs méréseket pedig a 18. lépésben nyert felülúszókból végezzük. Az összes felülúszót imidazol-pufferral úgy hígítjuk, hogy a nátriumklorid végkoncentráció 0,08 mól alatt legyen. 16. példa Az AHF kitermelése és az előző példákban ismertetett módon előállított termékek aktiválódása a 14. példa szerinti módon előállított 10 ml plazma frakcionálásakor Az 1—13. példákban ismertetett módon előállított polielektrolitokkal elvégezzük a VIII faktor frakcionálását, és meghatározzuk aktiválódásukat a 14. példában ismertetett módszerrel, a paramétereket a 15. példába ismertetett mérésekkel méljük. Az alábbiakban megadott eredményeket 10 ml plazma használatával, illetve 0,1 g és 0,8 g közötti mennyiségű polielektrolit/10 ml plazma adagolásával kaptuk. Az aminként előállított polielektrolit előzetes pH-beállítása (lásd a 14. példa 7. lépése) in situ 5 sóképzést jelent a frakcionálási eljárás során, az előzetes pH-állítást vagy hidrogénkloriddal vagy citromsavval végeztük, ahogy azt az előzőekben ismertettük. Ahogy azt a 14. példában megadtuk, a plazma 10 protein tartalma sarasonként és ősztől-nyárig változott. Hasonlóképpen a plazma különböző egységcsomagjainak AHF (VIII faktor) tartalma 0,8 egység és 1,3 egység/ml között változott, ahogy azt a 15. példában ismertetett 1. módszerrel meghatároztuk. 15 \ plazma alvadási ideje a 15. példában ismertetett 2. mérés szerint 185 másodperc és 240 másodperc között változott. Az eredményeket az alábbi, 8. táblázatban ismer- 20 tétjük. A táblázatban szereplő rövidítések az alábbi jelentésűek: SZA: szabad amin; HC1: hidrogénklorid só. 8. táblázat A példa szerinti g polielektrolit Kinyert AHF aktivitás polielektrolit készítmény A használt alak per 10 ml plazma Előzetes pH beállítás AHF (VIII) egység per ml alvadási idő mp aktiválódás 1. SZA 0,6 citromsav 0,72 299 nem 1. SZA 0,4 HC1 0,56 270 nem 1. SZA 0,4 nem* 0,62 273 nem 2. HC1 0,8 nem 0,49 259 nem 2 HC1 0,5 nem 0,42 272 nem 2. 2. kísérlet HC1 0,4 nem 0,43 104 igen 2. 2. kísérlet HC1 0,5 nem 0,66 113 igen 2. 2. kísérlet HC1 0,4 nem 0,53 98 igen 4. 1. kísérlet SZA nincs megmérve-2. kísérlet SZA 0,5 HQ 0,56 269 nem 3. kísérlet SZA 0,5 citromsav 0,67 283 nem 4. kísérlet SZA 0,5 citromsav 0,57 305 nem 5. kísérlet SZA 0,5 citromsav 0,72 303 nem 6. kísérlet SZA 0,5 citromsav 0,61 315 nem 7. kísérlet SZA 0,5 HQ 0,49 296 nem 8. kísérlet SZA 0,5 citromsav 0,57 277 nem 9. kísérlet SZA 0,5 citromsav 0,64 314 nem 5. 1. kísérlet HC1 0,5 nem 0,76 258 nem 2. kísérlet HC1 0,5 nem 0,72 254 nem 3. kísérlet HC1 0,5 nem 0,80 261 nem 4. kísérlet HC1 0,5 nem 0,80 338 nem 7. 2. kísérlet HC1 0,5 nem 0,62 111 igen 6. 1. kísérlet SZA 0,5 citromsav 0,61 252 nem 2. kísérlet HC1 0,5 nem 0,58 240 nem 15
