182462. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nukleinsavak keverékeinek affinitáskromatográfiás szétválasztására
15 182462 16 Kitermelés: 0,665 g kromatográfiásan tiszta színezék. 5. példa. A 9-(akriloil-amino-etil-amino)-3-klór-7-me- 5 toxi-akridin előállítása. 854 mg 3,9-diklr-7-metoxi-akridint 1 ml etilén-diaminnal és 7,7 g fenollal 30 percen át olajfürdőn 60 °C-on melegítjük. Az ömledéket felvesszük 200 ml kloroformmal és 150 ml vízzel, 10 az oldat pH-ját ecetsavval 4-re állítjuk be és azt stabilizáljuk. A szerves fázist 3—4-szer még 0,1 mólos nátrium-acetát pufferoldattal extraháljuk, majd elöntjük. A vizes kivonatokat szódaoldattal pH=9,5-re 15 állítjuk be, 20:1 arányú kloroform-n-butil-alkohol oldószereleggyel extraháljuk, a szerves fázist szilikonpapíron szűrjük és vákuumban bepároljuk. A maradékot 0,1 mólos nátrium-acetát pufferoldatban oldjuk, a dimerizált termék 20 maradékait szűréssel eltávolítjuk és az oldat pH-ját 10-re állítjuk be. A rendszert most szobahőmérsékleten 1 órán át állni hagyjuk, a kivált csapadékot szűrjük, kevés híg ammóniaoldattal 4 °C-on mossuk, majd szárítjuk. A ho- 25 zam az elméletileg számított érték 50—80%-a. A kapott aminovegyületből 206 mg-ot melegen feloldunk 25 ml kloroformban, majd lehűlés után az oldathoz 0,3 ml akril-kloridot adunk. Az oldat azonnal sötétebbre színeződik. Néhány perc múltán kiválik az akriloilszármazék. Leszívatás és kloroformos mosás után 122 mg ,{az elméleti hozam 50%-a), kromatográfiásan tiszta 9-(akriloil-amino-etil-amino)-3-klór-7-metoxi-akridint kapunk. SZABADALMI IGÉNYPONT Eljárás nukleinsavak keverékeinek szétválasztására, azzal jellemezve, hogy a szétválasztandó keveréket kromatografáló oszlopra visszük, amelyben olyan poli-[bisz(akril-amid)] a hordozóanyag, amelyhez nukleinsavak számára komplexképző — éspedig akril-malachitzöld, akril-fenil-neutrálvörös vagy 3-klór-7-metoxiakridin — kapcsolódik közvetlenül vagy térbeli távolságot létesítő csoporton keresztül, majd a megkötött nukleinsavakat eluálószerrel — így vizes só- vagy pufferoldattal — eluáljuk. 9 db rajz p A kiadásért felel a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó Igazgatója. 86. 43 6M Petőfi Nyomda, Kecskemét — Felelős vezető: Ablaka István Igazgató 9
