182185. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 5-szubsztituált-2,3-diaril-tiofén-származékok előállítására
182.185 és végül szűréssel sterilizálást végzünk. A találmány szerinti eljárással előállítható vegyületek, illetve összehasonlításképpen néhány jól ismert hatóanyag gyulladásgátló hatásának vizsgálata céljából olyan kísérleti módszert alkalmazunk, amely következtetni enged a hatásosságra embernél. Ez a kísérleti módszer a Federation Proceedings, 32. kötet, 2. szám /1973/ szakirodalmi helyen megjelent "Models used for the Study and Therapy of Rheumatôid Arthritis" c. szakcikkben ismertetett, adjuvánssal patkányokon kiváltott izületi gyulladás elleni hatáson alapul. Az eralitett szakcikkben megállapítják, hogy "a Mycobacterium tubercolosis ásványolajjal készült szuszi penziójával /vagyis az adjuvánssal/ intradermális injektálás utján patkányokon kiváltott poliarthritis-t széles körben alkal- , mázzák reumatoid jellegű izületi gyulladás esetleges kezelésére alkalmas gyógyhatású vegyületek kiválasztásában". A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek ennek a kísérleti módszernek a végrehajtása során kifejezetten hatásosnak bizonyultak izületi gyulladás kezelésében, aminek állapján a fentieket figyelembe veve az a következtetés vonható le, hogy az embergyógyászatban hasznosíthatók. A kísérletek végrehajtása 3orán úgy járunk el, hogy a Charles River Breeding Laboratories /Wilmington, Massachusetts szövetségi állam/ amerikai cég által szállított, 175 - 22o g súlyú him Lewls-törzsbeli /Wistar/ patkányoknak szubkután o,l ml adjuvánst injektálunk jobb hátsó mancsuk talpi részébe. Az adjuvánst a Difco amerikai cég által 0640 cikkszára alatt szállított Mycobacterium butyricum gyöngy-őrlése, hővel való elölése és liofilizálása, majd 5 mg/ml koncentrációban a Fischer Scientific Co. amerikai cég által o-119 cikkszára alatt szállított paraffinolajban /Saybolt-viszkozitása 125/135/ való szuszpendálása utján állítjuk elő. A paraffinolajjal 2o, izületi gyulladástól mentes kontrollállatot is injektálunk. Az állatok ezután ad libitum vizet és "Wayne Lab-Blox" márkanevű laboratóriumi tápot kapnak ugy,^ hogy naponta lo órán át megvilágitás alatt é3 14 órán át sötétségben tartjuk őket. A poliarthritis kifejlődése céljából 14 napon át tartjuk igy az állatokat, majd ezután "Ugo Basile Volume Differential Meter, Model 71ol" megnevezésű műszert használva mérjük minden egyes patkány esetében az injekciót nem kapott baloldali hátsó mancs térfogatát. Az izületi gyulladás jeleit nem mutató, de adjuvánssal kezelt patkányokat a további vizsgálatokból eltávolítjuk, és az izületi gyulladásban szenvedőket olyan tizes csoportokba osztjuk^ amely csoportoknak az átlagos mancstérfogata azonos, egyenlő standard eltéréssel. A csak olajjal injektált és igy izületi gyulladásban nem szenvedő kontrollállatokat két tizes csoportba osztjuk. A kísérleti vegyületek szuszpenzióit úgy készítjük el, hogy a kísérleti vegyületet hozzáadjuk olyan vizes oldathoz, amely 1 % polivinilalkoholt, 5 % gumiarábikumot és o,5 % 4-hidroxi-benzoesav-metilésztert tartalmaz, majd az igy kapott keveréket 4-5 órán át gyöngy-őrlésnek vetjük alá 4 mm-es üveggyöngyökkel gumival bélelt lombikokban. A kísérleti vegyületeket orálisan, gyomorszondán át naponta egyezer adjuk be 7 naçon át, vagyis a kísérletek. 14 - 2o napján. A csak olajjal injektált, izületi gyulladásban nem szenvedő kontrollcsoport ezen a 7 napon át csak a kísérleti vegyülő
