182171. lajstromszámú szabadalom • Eljárás aminoaciláz enzim elkülönítésére emlősök veséiből
182.171 1. példa 1 kg tisztított sertésvesét felapritottunk, majd 2 1 hideg /+4 c°-os/ desztillált vízzel homogenizáltuk. A homogenizátumoa 1 óra hosszat jeges vízfürdőben kevertettük, majd centrifugáltuk. A felüluszót 60 C -ra melegítettük fel, és 15 percig ezen a hőmérsékleten tartottuk, majd jeges vízfürdőben lehütöttük éa centrufugáltuk. A felüluszóhoz 280 g ammóniumszulfátot adtunk. Egy éjszakai állás után a szuszpenziót centrifugáltuk. A csapadekot kevés hideg /+4 C°-os/ desztillált vízben feloldottuk,es desztillált vízzel szemben sómentesre dializáltuk. Dialízis után az oldatot szűrtük, majd liofilizáltuk. Kitermelés: 4,2 g aminoaciláz. Aktivitás: 1000 yumél N-acetil-L-metionin hidroli-* zise/óra/mg fehérje. 2. példa 1 kg tisztított sertésvesét felapritottunk, majd 2 liter hideg /+4 0-os/ desztillált vízzel homogenizáltuk. A homogenizátumot 1 óra hosszat jeges vízfürdőben kevertettük, majd centrifugáltuk. A felüluszót 80 0°-ra melegítettük fel és 5 percig ezen a hőmérsékleten tartottuk, majd jeges vízfürdőben lehütöttük és'centrifugáltuk. A felüluszóhoz 359 g ammóniumszulfátot■ adtunk. Egy éjszakai állás után a szuszpenziót centrifugáltuk. A csapadékot kevés hideg /+4 C°-os/ desztillált vízben feloldottuk, és desztillált vizzel szemben sómentesre dializáltuk.Dialízis után az oldatot szűrtük, majd liofilizáltuk. Kitermelés:1.1 g aminoaciláz. Aktivitás: 800/umcl N-acetil-L-metionin hidrolizise/óra/mg fehérje. 3. példa 8 kg tisztított sertésvesét felapritottunk, majd 16 liter hideg /+4 C°-os/ desztillált vizzel homogenizáltuk. A homogénizátumot 1 óra hosszat jeges vízfürdőben kevertettük, majd centrifugáltuk. A felüluszót 70 C°-ra melegítettük fel? és 10 percig "ezen a hőmérsékleten tartottuk, majd jeges vízfürdőben lehütöttük, végül'centrifugáltuk. A felüluszóhoz 2554 g ammóniumszulfátot adtunk. Egy éjszakai állás után a szuszpenziót centrifugáltuk. A csapadékot kevés hideg /+4 C°-ós/ desztillált vízben feloldottuk, és desztillált vizzel szemben sómentesre dializáltuk. Dialízis után az oldatot szűrtük, majd liofilizáltuk. Kitermelés: 7,2 g aminoaciláz. Aktivitás: 2735 /umól N-acetil-L-metiotiin hidrolizise/óra/mg fehérje. 4. példa 3,6 kg tisztított marhavesét felapritottunk, majd 7,2 liter hideg /+4 C°-os/ desztillált vizzel homogenizáltuk. A homogenifcátumot 1 óra hosszat jeges vízfürdőben kevertettük. majd centrifugáltuk. A felüluszót 70 C°-ra melegítettük fel es 10 percig őzen a hőmérsékleten tartottuk, majd jeges vízfürdőben lehütöttük és centrifugáltuk. A felüluszóhoz 1234 g ammóniumszulfátot ódtunkr Egy éjszakai állás után a szuszpenziót centrifugáltuk." A csapadékot kevés hideg /+4 0°-cs/ desztillált vízben feloldottuk. és desztillált vizzel szemben sómentesre dializáltuk. Dialízis Után az oldatot szűrtük, majd liofilizáltuk. Kitermelés: p,4 g aminoaciláz. Aktivitás: 791 /umól N-acetil-L-metionin hid*folizise/óra/mg fehérje. 5« példa 2,5 kg tisztított lóvesét felapritottunk, majd 5 liter hideg /+4 C°-os/ diesztillált vizzel homogenizáltuk. A homogenizás