182144. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hipikoleszrterémiás hatású vegyületek előállítására fermentációs úton
182.144 A találmányt közelebbről a következő kiviteli példákkal kívánjuk megvilágítani. 1. példa Az I és a II képletü vegyület előállítása A. Fermentálás Liofilizált MF-4855-tenyészetet tartalmazó kémcsövet aszeptikus körülmények között felnyitunk, majd a kémcső tartalmát nem bordázott, 250 ml-es Erlenmeyer-lombikban /oltólombikban/ az alábbiakban ismertetett összetételű A. tápközegből közel 20 ml-ben szuszpendáljuk. A. tápközeg összetétele: kukoricalekvár paradicsompüré zabliszt glükóz 2. számú nyomelemkeverék desztillált viz pH 6,8-re beállítva nátrium-hidroxiddal 2. számú nyomelemkeverék összetétele: vaa/II/-szulfát-heptahidrát mangán/II/-szulfát-tetrahidrát réz/II/-klorid-dihidrát kalcium-klorid-dihidrát bórsav /NH4/6M0„0$4 . 4 H20 cink-azuífat-heptahidrát desztillált ionmentes viz 10 g 80 g 20 g 20 g 20 g 1000 ml 1000 mg 1000 mg 25 mg 100 mg 56 mg 19 mg 200 mg 1000 ml A beoltott lombikot 48 órán át 28°C-on inkubál^juk 220 fordulat/perc sebességgel mozgó rázógépen /50,8 mm-es fellöket/. Az igy nyert tenyészetből 10 - 10 ml-rel beoltunk ezután 500 - 500 ml B. tápközeget két nem bordázott 2 literes Erlenmeyerlombikban. 3. tápközeg összetétele: primer élesztő 10 g /melaszon fermentációs tápközeg alkotóelem céljára tenyésztett Saccharomyces cerevisiae/ paradicsompüré 20 g CPC-keményitő 20 g /kukoricakeményitő, a OPC International Inc., Englewood Cliffs, íTew Jersey 07652, terméke/ kobalt-klorld-hexahidrát 5 mg desztillált viz 1000 ml pH 2,7 - 7,4 értékre nátrium-hidroxiddal beállítva. Ezt a két beoltott lombikot ezután 96 órán át 28°C-on inkubáljuk, az egyiket rázatás nélkül, mig a másikat 150 fordulat/perc sebességgel működő rázógépen /50,8 mm-es féllöket/. 96 óra elteltével mindkét lombik tartalmát félretesszük a termék 3lkülönitésének céljára. B. Az I képletü vegyület elkülönítése A teljes tenyészetet 20 - 50 percen át tartó centrifugáásnak vetjük alá, a szilárd részt extrahálási célokra félretée. A 6 - 8 pH-ju felüluszó folyadékfázist 950 ml térfogatú pa-7
