182144. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hipikoleszrterémiás hatású vegyületek előállítására fermentációs úton
181144 mindig a legutolsó lépésben kapott tenyészet egy részét használjuk fel a tulajdonképpeni termelő fermentáláshoz oltóanyagként. Az oltótenyészeteket tartalmazó lombikokat állandó hőmérsékleten néhány napon át rázatjuk és az inkubációs periódus végén a lombikok tartalmát szűrésnek vagy centrifugáljanak vetjük alá.' Nagyüzemi méretekben végrehajtott fermentálás esetén előnyösen e célra kiképzett, keverővei és levegőztetővei felszerelt fermentorokban dolgozunk. Ilyenkor a tápközeget a fermentorban készítjük el és sterilizáljuk legfeljebb 120°C-on végzett hevítés utján. Lehűtése után a tápközeget beoltjuk az előkészített oltótenyészettel, majd a fermentációt végbemenni hagyjuk, például 3-5 naçon át végzett keverés és/vagy levegőztetés utján, illetve a hőmérséklet 28°C körül való tartásával. Ez a fermentálás! módszer különösen nagy mennyiségű uj találmány szerinti vegyület előállítására alkalmas. A termékként képződő uj vegyületek egyszerűen elkülöníthetők a fermentléből az I és II képletü laktonok formájában. Alternativ módon ezek a III és a TV képletü vegyületek sóiként különíthetők el. Az I és a II képletü vegyületek hidrolizálhatók bázisokkal, például nátrium-hidroxiddal, a III és a IV képletü vegyületek sóit, például nátriumsóit adva. Más gyógyászati lag elfogadható kationt tartalmazó bázis használata az ilyen kation sójának képződését eredményezi. Az igy kapott sók óvatos savanyításával állíthatók elő a III és IV képletü hidroxi-savak. A III és IV képletü hidroxi-savak savas pH-kor az I és a II képletü vegyületekké alakíthatók. Az I képletü vegyület metanollal, etanollal, propanollal vagy butánóllal, savas vagy bázikus katalizis melletti kezelése eredményeképpen a III képletü vegyület megfelelő alkilészterei állíthatók elő. A III és a IV képletü vegyület, de különösen a III képletü vegyület könnyen, krómatográfáiás nélkül elkülöníthetők. illetve elkülöníthető ammóniumsó formájában. Ez az elkülönítés egyszerű és sokkal inkább alkalmas nagyipari méretű végrehajtásra, mint a ^ kr ómat o gráf álás. Továbbá a III és a IV képletü vegyületek sói Jóval aktívabbak az I és a'II képletü vegyületeknél a koleszterin bioszintézisének in vitro gátlásában, illetve gombaölő szerként. Kétségkívül a hidroxi-savak /és sóik/ bizonyulnak az aktiv formának. Ezért ezeket a sókat különösen előnyösen hasznosíthatjuk. Az ammóniumsókon túlmenően az előnyös sók közé tartoznak a tetrametil-aipmóniumaók, továbbá az etilén-diaminnal, nátriummal, káliummal, kalciummal, N-metil-glükaminnal, lizinnel, argininnel és ornitinnel képzett sók. Az I képletü vegyület /MSD-803/ fiziko-kémiai Jellemzői a következők: 1. Olvadáspont: 170 - 171°C 2. Molekulasúly /tömegspektrum alapján/: 404 3- összegképlet: C24®36^5 /számított molekulasúly: 404,2563 tömegspektrometriásan talált: 404,2555/ 4. UV-spektrum /acetonitrilben felvéve/: maximumok 230.5 nm /E% - 505,7/ 237.5 nm /W> = 576,6/ 246 nm /E% =395,2/ 5
