182144. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hipikoleszrterémiás hatású vegyületek előállítására fermentációs úton
182.144 Az étkor kapott szuszpenziót felrétegezzük 305 mm . 1270 mm-es szilikagé1-oszlop tetejére, amely oazlopot az említett oldószerelegyet használva töltünk meg. Az eluáláat etil-acetát és metilén-klorid 40 : 60 térfogatarányu elegyével 800 ml/perc aebeaaéggel végezzük.. 38 literes előfrakciot, majd ezután 15,2 literes frakciókat szedünk. A 6 - 10. frakciókat vákuumban olajos maradékká pároljuk be, amelyet ezután forró etll-acetátban feloldunk, a kapott oldatot szintelenitő hatású aktiv szénnel kezeljük, még forrón szűrjük és lehűtjük. Ekkor az I képletü vegyület kivált kristályait kiszűrjük. mig az anyalugot olajjá bepároljuk további kromatografálás céljából. 4. Újbóli kromatografálás szilikagélen Az előző lépésben kapott olajhoz hozzáadjuk egy további 2300 literes tenyészet feldolgozása utján kapott anyalug-maradékot, a hozzáadást metilén-kloridban történő együttes feloldással végezve. Az ekkor kapott oldat felét használjuk szilikagélen végrehajtott további kromatografálás céljára. Egy kisebb aliquot összes szilárdanyagtartalma 325 g* Az oldatot 40 g szi'ntelenitő hatású aktiv szénnel kezeljük, majd szűrjük és a szürőlepényt metilén-kloriddal átöblitjük. A szürletet és a mosófolyadékot egyesitésük-után vákuumban olajos maradékká betöményitjük, majd az utóbbit etil-acetát és metllén-klorid 30 í 70. térfogatarányu ele^yéből 800 ml-ben ujraoldjuk. A kapott oldatot 225 g szilikagellel keverjük, majd az igy kapott szuszpenziót felvisszük egy 14 cm x 36 cm méretű, ugyanezzel az oldószereleggyel töltött szilikagél-oszlop tetejére. Az oszlop eluálását etil-acetát és metilén-klorid 40 ; 60 térfogatarányu elegyével végezzük, 3 literes előfrakciót teszünk felre, majd 800 ml-es frakciókat szedünk. 5- Fordított fázisú tölteten végzett kromatografálás Az előző lépésben ismertetett kromatografálás 12. frakciójából 40 ml-t 500 mg olajjá párolunk be, majd az olajat 5 ml acetonitrilben ujraoldjuk. Az igy kapott acetonitriles oldatot felvisszük egy 15^9 mm bel3Ő átmérőjű és 1,8 méter hoszszu, rozsdamentes acélból készült kromatográfiás oszlopra, amelyet előzetesen megtöltöttünk a Water Associates, Inc. milford-i Aíassachusets állam/ amerikai egyesült államokbeli cég által "Bondapak C18/PorasilB" márkanév alatt gyártott, preparativ fordított fázisú folyadékkromatográfiás oszlophoz használható töltőanyaggal. Az oszlopot ezután 55 térfogati acetonitrilből és 45 terfogat% 0,05 mólos 3-aa pH-ju ammónium-foszfát-oldatból álló eleggyel eluáljuk, az eluátum 1360 ml és 1700 ml közötti frakcióját a törésmutató meghatározása alapján kombinálva. Ebből az eluátumfrakcióból ezután a szerves oldószert vákuumban eltávolítjuk, majd a visszamaradó vizes oldatot etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumból a szerves oldószert vákuumban lehajtjuk, 120 mg mennyiségben az előállítani kivánt vegyületet kapv£, amelynek olvadáspontja tömény acetonitriles oldatból végzett kristályositás után 129 - 131°0* 16. példa A II és a IY képletü vegyületek elkülönítésére szólgáló alternativ módszer 20
