182075. lajstromszámú szabadalom • Eljárás monacolin K előállítására
182.075 folyamán a Monacolln K termelést is figyelemmel kísérni. In vivo teszt nyulakkal Ennél a tesztnél azt mérjük, hogy a Monacolln K milyen mértékben csökkenti a vér koleszterinszintjét nyálaknál. A méréshez használt nyulak súlya 2,5 és 3,0 kg között kell hogy legyen. A mérés kezdetekor vért veszünk minden nyúl füli vénájából, és egy ismert módszerrel megmérjük a vér koleszterinszintjét. Előre meghatározott mennyiségű Monacolin K-t vagy Monacolin K-tartalmu tápközeget adunk be szájon át folyamatosan 1—5 naçon át, és a vérszérum koleszterinszintjét mérjük a beadás után szakaszosan. A Monacolin K illetve a Monacolin K-tartalmu tápközeg hatása mennyiségileg meghatározható a vér koleszterinszintjének értékeiből az alkalmazás előtt és után. In vitro teszt patkánymájjal Patkánymájat alkalmazunk koleszterin-szintetizáló enzimforrásként. A nyers májat radioaktiv ecetsavval reagáltatjuk 37 °G-on 60 percig. Az igy bioszintetizált rádióaktiv koleszterint azután elszapjpanositjuk és digitoninnal kicsapatjuk. Mérjük a rádioaktivitast a termelt koleszterin mennyiségének meghatározására. Az eljárást megismételjük, azzal a különbséggel, hogy a reakció kezdetekor Monacolin K-t illetve Monacolin K- tartalmu tápközeget adunk a reakcióelegyhez, és ismét mérjük a bioszintetizált koleszterin mennyiségét, igy a Monacolin K gátló hatásának mennyiségi mértékét tudjuk megadni. /Brickér és ' társai, The Journal of Biological Chemistry^ 247, 5-914 /1972/. Ez a teszt a gyakorlatban jól használható módszer a Monacolin K-képződés ellenőrzésére és figyelemmel kisérésére a találmány szerinti tenyésztés folyamán. A Monacolin K vér-koleszterinszint csökkentő hatását mi különböző in vivo tesztekkel is kimutattuk. A vér és a máj koleszterinszintjének csökkentése patkányokban. Az alkalmazott állatok a Wistar Imamichi törzsbe tartozó patkányok voltak, valamennyi mintegy 300 g-os testsulyu.;A tesztet patkánycsoportokon végeztük, minden csoport 5 állatból állt. Minden állatnak intravénásán beadtunk 400 mg/kg Triton WR-1339- et /egy ismert anyag kereskedelmi neve, amely a vér koleszterintartalmát emeli/, mialatt párhuzamosan 10 mg/kg Monacolin K-t adunk vagy orálisan vagy intraperitoneálisan. 20 órával az orális, vagy 14 órával az intraperitoneális adagolás után az állatokat kivéreztettük, és vérüket, valamint májukat összegyűjtöttük, és szokásos módszerrel mértük koleszterinszintjüket. Megállapítottuk, hogy koleszterinszintjük csökkent, a kontroll állatcsoporthoz képest, ahol csak Triton WR-1339~et adagoltunk. A csökkenés orális adagolás esetén 22,4 % és intraper itoneális adagolás esetén 23*9 % volt. A máj koleszterinszintje 16,7 %kai csökkent azoknál az állatoknál, amelyeknek orálisan adagoltuk a Monacolin K-t. A vér koleszterinszintjének csökkentése nyulaknál A tesztállatok 2,7 és 2,9 kg közötti testsulyu nyulak voltak. 5 napon keresztül naponta kétszer /reggel és este/ 1 mg/kg Monacolin K-t adtunk orálisan minden állatnak. Az adagolást megelőzően, majd 3 és 5 nappal az adagolás után vért vettünk a 5
