181999. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új daganatgátló antraciklin-antibiotikumok előállítására
17 181999 18 értékeit a következő táblázat mutatja: az MA144—Glben, —G2-ben, —L-ben, —Y-ban és —Nl-ben három és az MA 144—Sl-ben, —S2-ben, —Ul-ben és —U2- ben két cukorféleség található. MA144 komponensek cukorrészének Rf-értékei Vegyulet Rf-értékek 0,16 0,20 0,60 0,72 0,83 0,78 MA 144—G1 , + + + MA 144—G2 4-—-,|. — 4-— MA144—L — _i_ 4-— ä-H — MA 144—NI ~r — + 4-— — MA 144—SÍ 4-— + __ — — MA 144—S2 + — 4-— — — MA 144—U1 + — 4-— — — MA144—U2 + — 4-— — MA 144—Y 4«-4-— _i_ 1 Az autentikus cukorminták Rf-értékével, különböző színreakcióval és optikai forgatóképességével való összehasonlítás alapján a 0,16 Rf-értékű cukorrészt L-rodozaminként, a 0,60 Rf-értékűt 2-dezoxi-L-fukózként, a 0,72 Rf-értékűt L-rodinózként és a 0,83 Rf-értékűt L- cinerulózként azonosítottuk, de a 0,20 és 0,78 Rf-értékű cukrokat nem tudtuk azonosítani. Az MA144 komponensek 0,01n sósavat tartalmazó metanolban, szobahőmérsékleten történő részleges metanolízisénél az MA144—Gl, —NI, —SÍ, —U1 és —Y 1-dezoxi-pyrromycint kaptunk (L-rodozaminil-aklavinon, J. Antibiotics 28, 830—834, 1975), melyeket fizikokémiai tulajdonságai, mint szilikagélrétegkromatográfiás Rf-értékek, olvadáspont, infravörös, ultraibolya és látható fényű abszorpciós színképek és magmágneses rezonancia alapján azonosítottuk ; a megfelelő metilált szacharidok, az MA144—G2, —S2 és —U2 pyrromycint adtak (Chem. Bér. 92, 1880—1903, 1959) és a megfelelő metilált szacharidok és az MA144—L egy ismeretlen antraciklin-glükozidot és megfelelő metilál diszacharidot adott. Az MA144—Gl, azaz D-cinerulozil-2-dezoxi-L-fukozil-L-rodozaminil-aklavinon és az MA144—G2, azaz D-cinerulozil-2-dezoxi-L-fukozil-L-rodozaminil-e-pyrromycinon általános képletét a vegyületek és a megfelelő metilált diszacharidjaik NMR, L1C-NMR és IR apektrumai alapján határoztuk meg. Az MA144—L aklavinonból és három cukorrészből áll: egy ismeretlen, 0,20 Rf-értékű amino-cukorból, 2- -dezoxi-L-fukózból és L-cinerulózból. Az aklavinonglükozid és az MA 144—L-ből metanolízissel kapott metilált diszacharid NMR és l3C-NMR spektrumának elemzése azt mutatta, hogy azok N-monodemetil-L-rodozaminil-aklavinonnak, illetve metiI-cinerulozil-2-dezoxi-L-fukozidnak felelnek meg. így az MA144—L kémiai szerkezetét a mellékelt képletnek megfelelően határoztuk meg. Az MA 144—SÍ és —S2 kétféle cukorrészt tartalmaz, L-rodozamint és 2-dezoxi-L-fukózt. Metanolízissel metil-2-dezoxi-L-fukozid és 1-dezoxi-pyrromycin vagy pyrromycin képződik, és így MA144—Sl-re és —S2-re 2--dezoxi-L-fukozil-L-rodozaminil-aklavinon vagy -s-pyrromycinon szerkezetet állapítottuk meg. Az MA 144—NI aklavinonból és háromféle cukorrészből: L-rodozaminból, 2-dezoxi-L-fukózból és L- rodinózból áll. A cukor-sorrend megállapítása céljából enyhe hidrolízist végeztünk 0,5%-os sósavval 10 percig szobahőmérsékleten, Biedermann és munkatársai (Pharmazie 27, 782—789, 1972) módszerével; L-rodinóz szabadult fel és egyidejűleg MA144—SÍ képződött. így az MA144—NI kémiai szerkezetét a mellékelt képlet szerint állapítottuk meg. Az MA144—U1 és —U2 kétféle cukorrészt tartalmaz: L-rodozamint és 2-dezoxi-L-fukózt. Metanolíziskor metil-2-dezoxi-L-fukozil-2-dezoxi-L-fukozid — melyet NMR és 13C-NMR spektrum alapján határoztunk meg — és 1-dezoxi-pyrromycin képződik, és így a mellékelt kémiai szerkezetre következtettünk. Az MA144—Y aklavinonból és háromféle cukorrészből : L-rodozaminból, 2-dezoxi-L-fukózból és egy ismeretlen cukorból áll. Ezenfelül MA144—Y-ból metanolízissel 1-dezoxi-pyrromycint és egy ismeretlen metilált diszacharidot kaptunk. A fenti metilált diszacharidot éterrel extraháltuk és szilikagél és Sephadex LH—20 oszlopkromatográfiával tisztítottuk, majd benzolból kristályosítottuk fehér tűkristályok alakjában. E metilált diszacharid fizikokémiai jellemzői a következők : Elemi analízis C,3H20O6-ra: számított : C : 57,34% ; H : 7,40% : talált: C: 57,77%; H:7,31%. Molekulasúly: 272. Olvadáspont: 109—110 °C. Fajlagos forgatóképesség: [a]p= —65° (c=l,0, CHClj). UV és látható fényű abszorpciós színkép metanolban : 28. ábra, X^°H nm (s)=209 (6726) TR abszorpciós spektrum KBr-ban : 29. ábra. NMR spektrum CDCl3-ban: 30. ábra (100 MHz). A 28. és 29. ábrán látható, hogy az MA144—Y metil-diszacharidjának 1680 cm-1-nél van abszorpciós sávja és ^IVmSH nm (e)=209 (6726), ami a szerkezetben a, ß-telitetlen ketocsoport jelenlétére utal. A 30. ábra PMR spektrumában a 3H dublett 8 1,26- nál (J=6,8 Hz), 2H 8 1,9-néI, 1H dublett 8 3,74-nél (J=l és 3 Hz), 1H kvartett 8 3,94-nél (J=6,8 Hz), 1H 8 4,07-nél és 1H 8 4,8-nál 2-dezoxi-L-fukózból származó 9 protonnak tulajdonítható, és az éteres oxigénatommal átfedett 3H dublett 8 1,4-nél (J=6,8 Hz) és 1H szimmetrikus kvartett 8 4,73-nál (J=6,8 Hz) egymáshoz kapcsolódik és a C-6' metil-protonoknak, illetve C-5' protonnak tulajdonítható. Spinlecsatolási vizsgálatokkal egy dublett 8 6,86-nál (J=3,5 és 10,0 Hz) és két dublett 8 6,11-nél (J=10,0 Hz) és 8 5,26-nál (J=3,5 Hz) az ABM rendszer vinil-protonjainak tulajdonítható, melyek a C-2', C-3', illetve C-l ' protonoknak felelnek meg. így a metil-diszacharidban a 2-dezoxi-L-fukóz mellett talált cukorrészt 2,3,6-tridezoxi-hex-2-enopiranoz-4- -ulózként azonosítottuk, amely a C-4 helyzetben kapcsolódik a 2-dezoxi-L-fukózhoz. A fentiekben elemzett eredmények alapján a metilált diszacharidot 1 képletű új cukorként határoztuk meg és akulózként jelöltük meg. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
