181976. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 3'',4''-diacil-tilozin-származékok előállítására
13 181976 14 (7 : 1) eleggyel eluálva kromatografáljuk, és a megfelelő aktív frakciókat egyesítjük, és vákuumban szárazra párolva 0,2 g 4",4'/'-diacetil-3"-izovaleriI-tilozint (RfA=0,73) és 3,2 g 4"-acetil-3"-izova1eril-tilozint kapunk. Vékonyréteg-kromatográfiás adatok : RfA=0,57. Tömegspektrum: 1041 (M+). A magmágneses rezonanciaspektrum adatai (100 MHz, CDCI3) : 1,39 (3'' CH3), 1,77 (13 CH3), 2,11 (4" OAc), 2,51 [3'N(CH3)2], 3,44 (2'" OCH3), 3,56 (3'" OCH3), 9,56 (18 CHO) ppm. 10. példa 3,3"-Diacetil-4"-butiril-tilozin 8,5 ml ecetsavanhidridet adunk 10 g tilozin 50 ml vízmentes acetonnal készült oldatához, és 4 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet 200 ml vízbe öntjük, a pH-t vizes ammóniaoldattal 9,5-re állítjuk és kétszer extraháljuk 200 ml kloroformmal. Az extraktumot vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk és vákuumban szárazra párolva 10,2 g 2'-acetil-tilozint kapunk. Vékonyréteg-kromatográfiás adatok : RfB=0,12; Rfc=0,06. (Tilozin: RfA=0,20; RfB=0,01 ; Rfc=0,01.) 10 g fenti termék 50 ml vízmentes acetonnal készült oldatához 8,05 ml vízmentes piridint és 6,4 ml acetil-kloridot adunk, és 150 percig keverjük 45 °C-on. A reakcióelegyet 200 ml vízbe öntjük, a pH-t vizes ammóniaoldattal 9,5-re állítjuk és a csapadékot kiszűrve 8,44 g 3,2',4",4/,,-tetraacetil-tilozint kapunk. Vékonyréteg-kromatográfiás adatok : RfB=0,40; Rfc=0,22. 2 g fenti termék 10 ml vízmentes piridinnel készült oldatához 1 ml vajsavanhidridet adunk és 4 napig keverjük 100 °C-on. A reakcióelegyet 50 ml vízbe öntjük, a pH-t vizes ammóniaoldattal 9,5-re állítjuk és 50 ml kloroformmal extraháljuk. Az extraktumot kétszer mossuk 50 ml 0,1 n sósavoldattal és egyszer híg vizes ammóniaoldattal, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk és vákuumban szárazra párolva nyers 3,2',3",4"/-tetraacetiI-4"-butiril-tilozint kapunk. Vékonyréteg-kromatográfiás adatok : RfB=0,81; Rfc=0,66. A fenti nyerstermék metanolos oldatához 10 ml ammóniával telített metanolt adunk és 3 órát keverjük jeges hűtés közben. A reakcióelegyet 100 ml vízbe öntjük és 100 ml kloroformmal extraháljuk. Az extraktumot vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 50 ml metanolban oldjuk, 17 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk és vákuumban szárazra párolva nyers 3,3"-diacetiI-4"-butiril-tilozint kapunk. Ezt szilikagélen benzol: aceton (10: 1) eluálószerrel oszlopkromatografálva tisztítjuk, így 1,2 g tisztított terméket kapunk. Vékonyréteg-kromatográfiás adatok : RfA=0,73. 11. példa 3,3"-Diacetil-4"-izovaleril-tilozin A 10. példa szerinti reakcióban vajsavanhidrid helyett izovaleriánsavanhidridet használva 3,3"-diacetil-4"-izovaleril-tilozint kapunk. Vékonyréteg-kromatográfiás adatok : RfA=0,76. 12. példa 3"-Acetil-4"-izovaleril-tilozin 7 g kálium-karbonátot adunk 10 g tilozin 20 ml ecetsavanhidriddel készült oldatához, és 24 órát kevertetjük 60 °C-on. A reakcióelegyet 200 ml vízbe öntjük, a pH-t vizes ammóniaoldattal 9,5-re állítjuk és kétszer extraháljuk 100 ml kloroformmal. Az extraktumot vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk, és vákuumban szárazra párolva 10,2 g nyers 18,2',4",4"'-tetraaceti]-3,18-0- -ciklo-tilozint kapunk. [RfB=0,49; tömegspektrum: 1084 (M+).j A nyerstermék 50 ml vízmentes piridinnel készült oldatához 4 ml izovaleriánsavanhidridet adunk, és 110 órát kevertetjük 100 °C-on. A reakcióelegyet 400 ml vízbe öntjük, és kétszer extraháljuk 200 ml kloroformmal. Az extraktumot vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk, és vákuumban szárazra párolva nyers 18,2',3",4"'-tetraacetil-3,18-0-ciklo-4"-izovaleril-tilozint kapunk. [RrB 0,76; tömegspektrum: 1168 (M+).] A terméket ízilikagéllel töltött oszlopon benzol : aceton (15 : 1) eleggyel eluálva kromatografáljuk. A 0,76 Rfll-értékű anyagot tartalmazó frakciókat egyesítjük, és szárazra párolva 2,8 g tisztított terméket kapunk. A fenti termék 20 ml metanollal készült oldatához 20 ml ammóniával telített metanolt adunk, és 5 órát keverjük szobahőmérsékleten. A reakcióelegyhez 200 ml vizet adunk, és kétszer extraháljuk 100 ml kloroformmal. Az extraktumot vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 100 ml metanolban oldjuk és 12 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk. A reakcióelegyet vákuumban szárazra pároljuk, és a maradékot szilikagéllel töltött oszlopon benzol : aceton (9 : 1) eleggyel, majd benzol : aceron (7 : 1) eleggyel eluálva kromatografáljuk. Az előbbi eluátumot vákuumban szárazra párolva 320 mg 3",4''•diacetil-4"-izovaleril-tilozint [RfB=0,39; tömegspektrum: 1084 (M+)] kapunk. Az utóbbi eluátum vákuumban végzett szárazra párolásával 1,2 g kívánt 3"-acetil- 4"-izovaleril-tilozint kapunk. [RfB=0,23; tömegspekt■um: 1042 (M+).j 104,1 mg 3"-acetil-4"-izovaleril-tilozint és 6,4 mg vízmentes citromsavat 1,5 ml acetonban oldunk. A reakcióelegyet vákuumban szárazra párolva 3"-acetil-4"izovaleril-tilozin-citrátot kapunk. Olvadáspontja : 129— 135 °C. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az (I) általános képletű 3",4"-diacil-tilozinszármazékok és savaddíciós sóik előállítására — ebben a képletben 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
