181926. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kicsapott fehérjék elkülönítésére albumintartalmú szuszpenziókból
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS • 181926 Nemzetközi osztályozás: ¥ Bejelentés napja: 1976. XII. 16. (PA—1271) Elsőbbsége: 1975. XII. 17. (P 25 56 733.3) Német Szövetségi Köztársaság NSZO3 C 07 G 7/00 ORSZÁGOS Közzététel napja: 1982. XII. 28. Sq<* í . Szsbadaírsi Tár. ' TALÁLMÁNYI ^’^JtíLAJDON.^ HIVATAL Megjelent: (45) 1986. IV. 30. Feltalálók: Dr, Schneider Waldemar fizikus, Hagen, Dr, Wolter Dietrich vegyész, Hagen, Fröhlich Christian fizikus, Dortmund, Német Szövetségi Köztársaság Szabadalmas: Armour Pharmaceutical Company, Scottsdale, Arizona, Amerikai Egyesült Államok Eljárás kicsapott fehérjék elkülönítésére albumintartalmú szuszpenziókból 1 2 A találmány tárgya javított eljárás kicsapott fehéijék elkülönítésére albuminnak vérplazmából kapott albumintartalmú szuszpenziókból való kinyerésénél. Ismeretes, hogy 1946-ban, Cohn és munkatársai eljárást dolgoztak ki az emberi vérplazma frakcionálására. Az eljárásban öt változó, az etil-alkohol-koncentráció, a pH, a hőmérséklet, az ionerősség és a fehérjekoncentráció megfelelő variálásával öt fő- és több alfrakciót állítanak elő. Az eljárás azért volt nagy jelentőségű, mert az ily módon 10 elkülönített plazmaalkotók terápiás felhasználása gazdaságosabb és azokkal specifikus terápia végezhető a teljes vérplazma felesleges felhasználása nélkül. Ez egyben a plazma jobb kihasználását is jelenti, hiszen az nem áll korlátlan mennyiségben rendelkezésre. A Cohn-féle alkoholos frakcionálás azonban igen munka- és energia-, valamint berendezésigényes eljárás, amelyben egy adag feldolgozása 8 napot vesz igénybe. A műveletek többsége hűtőszobát illetve hűtőberendezést, nagyszámú munkaerőt igényel és a munkakörülmények a nagy hőmérséklet-különbségek és a zajos centrifugák miatt igen kényelmetlenek. A Cohn-féle eljárásban kapott fő frakciók: a fibrinogén (I. frakció), a gamma-globulin (II. és III. frakció), az alfa- és béta-globulinok (IV. frakció), végül pedig a szupernatánsból kicsapott albumin (V. frakció), amely utóbbiból dúsítással (liofilizálás, oldás, szűrés, stabilizálás, pH- és koncentrá» cióbeállítás) állítják elő a gyógyászati célokra alkalmas 5 —15 ill. 20%-os albumint. A gyakorlatban a Cohn-féle eljárás fenti termékei közül 30 csak az albumint, a fibrinogént és a gamma-globulint alkalmazták a gyógyászatban. A gyakorlatban később kiderült, hogy a nagy plazmapoolokból előállított fibrinogénnél igen nagy a hepatitis- 5 átvitel kockázata, ezért helyette inkább a kis mennyiségű vérből előállított krioprecipitátumot alkalmazzák. A gyakorlat azt is megmutatta, hogy a specifikus hiperimmun-globulinoktól eltekintve, a II. frakcióban kapott gamma-globulin iránti igény is kicsi. Ezért a gyakorlatban az 5 frakció közül tulajdonképpen csak az albumin az igazán értékes tennék, amire vonatkoztatva viszont az egyébként is költséges eljárás még inkább azzá válik. Mindezen hátrányok ellenére, a legelteijedtebben ma is a 15 Cohn-féle eljárást alkalmazzák az egész világon a plazma frakcionálására. Emellett azonban régóta folynak kutatások az eljárás olcsóbbítására, hiszen egyrészt a vérellátás és a vérkészítmények zömmel profitmentes szolgáltatások, másrészt a növek- 20 vő igényeket csak korlátozott mennyiségű plazmabázis szolgálja ki. A költségek csökkentésére és a munkakörülmények javítására irányuló első javaslatot 1962-ben Kistler és Nitschmann tették, akik javasolták, hogy az I—III. frakciókat együttesen 25 és automatikusan válasszák el és azokat öntsék el. Az így elérhető megtakarítás azonban igen csekélynek bizonyult, minthogy a költségek zömét a hűtőrendszerek és a centrifugálások hordozzák, amely műveletek viszont így nem küszöbölhetők ki. Ajánlották az oszlopon való elválasztást is, ez a módszer 181926
