181458. lajstromszámú szabadalom • Eljárás parazita ellenes C-076 vk 13-halogén- és 13-dezoxi-származékainak előállítására
15 181458 16 A maradékhoz 5 ml metanolt adunk, majd az így kapott oldatot szobahőmérsékleten állni hagyjuk és ezután jeges fürdőben lehűtjük, amikor kristályosodás megy végbe. A fölülúszó fázist eltávolítjuk, a maradékot pedig 1-1 ml hideg metanollal kétszer mossuk. A szilárd kristályokat ezután egy éjszakán át levegőn, majd vákuumban 35 °C-on szárítjuk, 1,0 g mennyiségben fehér színű kristályokat kapva. További kristálymennyiséget kapunk úgy, hogy az anyalúgot két ml térfogatra betöményítjük, majd szobahőmérsékleten egy éjszakán át állni hagyjuk. Ezután 2 ml metanolt adunk hozzá, majd jeges fürdőben állni hagyjuk, 140 mg mennyiségben sárga csapadékot kapva. A kétféle csapadékot egyesítjük, majd forrásban lévő metanolban oldjuk. Az oldáshoz mintegy 30 ml metanolra van szükség. Az így kapott oldatot még forrón szüljük, majd vákuumban közel 20 ml térfogatra bepároljuk, amikor kristályosodás kezdődik. Még forrón szűrést végzünk, majd a kiszűrt csapadékot metanollal mossuk, 340 mg mennyiségben fehér csapadékot kapva. Az öszszeöntött szűrletek térfogatát mintegy 8ml-re beállítjuk, majd félretesszük abból a célból, hogy szobahőmérsékleten kristályosodás menjen végbe. így további 433 mg fehér csapadékot kapunk. Tömegspektrometriás elemzés tanúsága szerinti a kétféle frakció azonos anyag, mégpedig a cím szerinti vegyület. 4. referenciapélda C-076-Bla-aglükon előállítása 100 mg C-076-Bla vegyületet feloldunk 2,5 ml dioxánban, majd az így kapott oldatot hozzáadjuk 0,5 ml víz, 0,5 ml tömény kénsav és 9,0 ml dioxán elegyéhez. Az így kapott reakcióelegyet ezután szobahőmérsékleten 17 órán át keveijük, majd 50 ml dietil-étert és 25 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot adunk hozzá. Ezt követően a fázisokat elválasztjuk egymástól, majd a szerves fázist vízzel mossuk, míg a vizes fázist dietil-éterrel extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat nátrium-szulfát fölött szárítjuk, majd szárazra pároljuk. A maradékhoz benzolt adunk, majd az így kapott oldatot ismét bepároljuk, 60 mg sárga olajat kapva. Ezt azután szilikagél lemezen preparatív vékonyrétegkromatografálásnak vetjük alá, futtatószerként kloroform és tetrahidrofurán 9 : 1 térfogatarányú elegyét használva. Mintegy 0,35 Rf értékkel 16 mg termék különíthető el, amely 300 MHz-es NMR-vízsgálat tanúsága szerint a cím szerinti vegyület. 5. referenciapélda 22.23- Dihidro-C-076-A1 a előállítása 51,0 mg C-076-Ala és 14,4 mg trisz-(trifenil-foszfin)-ródium(I)-kloríd 3,5 ml benzollal készült oldatát szobahőmérsékleten és atmoszferikus nyomáson 20 órán át hidrogénezzük, majd a nyers reakcióelegyet preparatív vékonyrétegkromatográfiás lemezen kromatografálásnak vetjük alá, 10% tetrahidrofuránt tartalmazó kloroformmal kétszeri futtatást végezve. A terméket a lemezből etil-acetáttal távolítjuk el, majd az így kapott oldatot szárazra pároljuk. A kapott maradék tömegspektrometriás és 300 MHz-es NMR-vizsgálat tanúsága szerint a cím szerinti vegyület. 6. referenciapélda 22.23- Dihidro-C-076-A 1 a-aglükon előállítása Szobahőmérsékleten 10,1 mg 22,23-dihidro-C-076-Ala és 1.1 ml 1%-os metanolos kénsavoldat keverékét 20 órán át keveijük, majd a reakcióelegyet a 6. referenciapéldában ismertetett módon feldolgozzuk, olajat kapva. Ezt azután szilikagélen végzett preparatív vékonyrétegkromatografálással tisztítjuk, futtatószerként 5% tetrahidrofuránt tartalmazó kloroformot használva. A terméket a kromatográfiás lemezről eltávolítjuk, majd benzolból Iiofilizáljuk. így 4.2 mg mennyiségben fehér port kapunk, amely tömegspektrometriás és 300 MHz-es NMR-vizsgálat tanúsága szerint a cím szerinti vegyület. 8. példa 5-(O-terc-Butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-B 1 a-aglükon és 5-(0-terc-Butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-Blb-aglükon előállítása Szobahőmérsékleten keverés közben 600 mg imidazol 11,0 ml dimetil-formamiddal készült oldatához hozzáadunk 500 mg olyan elegyet, amely 86% 22,23-dihidro-C-076-Bla-aglükonból és 9% 22,23-dihidro-C-076-Blb-aglükonból áll. Az így kapott oldathoz ezután 750 mg terc-butil-dimetilszilil-kloridot adunk, majd a reakcióelegyet 16 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet 150 ml dietil-éterrel hígítjuk, majd 20 ml vízzel átöblítjük. A fázisokat elválasztjuk, majd a vizes fázist 50 ml dietil-éterrel extraháljuk. Az egyesített dietil-éteres fázisokat összeöntjük, majd 50—50 ml vízzel ötször mossuk és az egyesített vizes mosófolyadékot 50 ml dietil-éterrel visszaextraháljuk. Végül az egyesített szerves fázisokat 50 ml vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és vákuumban bepároljuk, 1,056 g olajat kapva. Ezt azután 19 ml metilén-kloridban felöljük, majd a kapott oldatot egyenletesen felvisszük húsz darab 20 cm x 20 cm méretű, 1000 p vastag szilikagélből készült preparatív vékonyrétegkromatográfiás lemezre. A lemezeken kétszer metilén-kloríddal futtatást végzünk, aminek eredményeképpen részleges szétválás következik be az 5-(0- -terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-B 1 a-aglükon (R = 0,15—0,35) és az 5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23- -dihidro-C-076-Blb-aglükon (Rf=0,ll—0,15) között. A lassabban mozgó sáv középső részét (Rf = 0,12—0,14) óvatosan lekaparjuk a két lemezről, majd 15—15 ml etilacetáttal ötször eluáljuk. Az eluátum szárazra párolásakor 2,2 mg mennyiségben színtelen üveges anyagként 5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-C-076-Blb-aglükont kapunk. IR-spektrum (tiszta film): 3600—3200 (m, OH), 1710 (s, C = O), cm T UV-spektrum (2,7 x 10 5 M, CH3OH): k max: 237 nm (e = 26 000) 244 nm (e = 27000) 252 nm (váll, e = 25 000) Nagynyomású folyadékkromatográfiás elemzés eredményei: Vegyület A keverékben a %-os menynyiség Retcnciós idő (perc) ismeretlenek 4 1,4, 2,3 5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23- -dihidro-C-076-B 1 b-aglükon 95 2,9, 3,4, 5,0, 5,5, 6,3, 6,7 8,1 5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23--dihidro-C-076-Bla-aglükon 1 11,4 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
