181087. lajstromszámú szabadalom • Eljárás merkapto-acil-dipeptidek előállítására
3 181087 4 egy Illa általános képletű merkapto-alkanoil-aminosawá, majd az „A2 ” aminosav vagy alkil-észterének acilezése a Illa általános képletű merkapto-alkanoil-amino-sawal. Az acilezés az aminosavak kapcsolására jól ismert módszerek valamelyikével végezhető. Ezekre a módszerekre vonatkozólag lásd: Bodanszky and Ondetti, Peptide Synthesis (Interscience Publishers, 1966). Az olyan I általános képletű vegyületek, ahol Rí jelentése hidrogénatom, ammonolízissel vagy lúgos hidrolízissel nyerhetők az előbb leírt eljárások szerint előállított olyan I általános képletű vegyületekből, ahol R) jelentése 2—4 szénatomos alkanoilcsoport. Ha egy A! -A2 vagy A2 pepiid vagy aminosav észterét használjuk a fenti szintézisek valamelyikében, akkor a megfelelő szabad sav az észterből savas vagy lúgos hidrolízissel kapható. A III általános képletű merkapto-alkánsavak és a Illa általános képletű merkapto-alkanoil-aminosavak és az előállításukra szolgáló módszerek az irodalomból ismertek. (Lásd például a 4 046 889, 4 105 776 és 4 053 651 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokat). Az I általános képletű vegyületek és alkilésztereik magas vérnyomást csökkentő hatású szerekként használhatók. Gátolják az angiotenzin I dekapeptid angiotenzin Il-vé való átalakulását, és ennélfogva az angiotenzin okozta magas vérnyomás csökkentésére és megszüntetésére használhatók. A renin enzim hatására angiotenzinogénből, a vérplazmában lévő pszeudoglobulinból keletkezik angiotenzin I. Az angiotenzin I-et az angiotenzin konvertáló enzim (ACE) alakítja át angiotenzin Il-vé. Az utóbbi hatásos presszor-anyag, amely különböző emlős fajokban, például patkányokban és kutyákban, a hipertenzió különböző formáinak okozójaként tekinthető. A találmány szerinti vegyületek beavatkoznak az angiotenzinogén -*■ (renin) -* angiotenzin I -*■ (ACE) -*■ angiotenzin II átalakulási sorban az angiotenzin konvertáló enzim gátlásával, és csökkentik vagy megszüntetik az angiotenzin II presszor anyag képződését. így egy I általános képletű vegyületet önmagában vagy kombinációban tartalmazó gyógyszerkészítmény adagolásával csökkenthető vagy megszüntethető az angiotenzin okozta hipertenzió az ettől szenvedő emlős fajokban. Egyszeri dózisban vagy előnyösen kettő—négy megosztott napi dózisban körülbelül 0,1-100 mg/testsúlykilogramm/nap, előnyösen körülbelül 1-50 mg/testsúlykilogramm- Inap alkalmas a vérnyomás csökkentésére. Az anyagot előnyösen szájon át adjuk be, de parenterális úton, például bőr alá, izomba, intravénásán vagy intraperitoneálisan is alkalmazható. Az I általános képletű vegyületek vérnyomáscsökkentő használatra például tablettaként, kapszulaként vagy elixírként formázhatok szájon át való beadásra, vagy steril oldatként vagy szuszpenzióként parenterális beadásra. Körülbelül 10-500 mg I általános képletű vegyületet vagy ilyenek keverékét keverjük valamilyen fiziológiásán elfogadható töltőanyaggal, hordozóval, segédanyaggal, kötőanyaggal, konzerválószerrel, stabilizálószerrel, ízesítőszerrel, stb., és az elfogadott gyógyszerészeti gyakorlat szerint egységdózis formává elkészítjük. Az ilyen készítményekben lévő hatóanyag mennyisége annyi, hogy a fent megadott alkalmas dózistartományba esik. A következő példák a találmány megvalósítását szemléltetik. 1. példa l-[N-(Acetiltio-acetil)-glicil]-L-prolin 1,72 g glicil-L-prolint oldunk keverés közben jeges fürdőben 10 ml 1 n nátrium-hidroxid oldatban. Ehhez 5 ml 2 n nátrium-hidroxid oldatot adunk, majd 1,13 g klór-acetil-kloridot, és a fürdőt eltávolítjuk. Szobahőmérsékleten 3 órát keverjük, utána 0,836 g tioecet-S-savat és 0,96 g kálium-karbonát 10 ml vízzel készült oldatát adjuk hozzá, és a reakdóelegyet körülbelül 16 órát keverjük szobahőmérsékleten. Utána a reakcióelegyet szulfonált polisztirol kationcserélő gyantával megsavanyítjuk, a gyantát vízzel eluáljuk, és az oldatot vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot ecetsavval oldjuk, és az oldatlan anyagot (olvadáspont 320 °C felett) kiszűrjük. A szűrletet vákuumban szárazra pároljuk, és kloroform) ecetsav (7 : 3) elegyet adunk hozzá. A terméket centrifugáljuk, és a felülúszót 60 g szilikagéllel töltött oszlopra töltjük, és kloroform/ecetsav (7 :3) eleggyel eluáljuk. így 1,0 g címvegyületet kapunk. 2. példa l-[N-(Merkapto-acetil)-glicil]-L-prolin 1,0 g l-[N-(Acetiltio-acetil)-glicil]-L-prolint 30 percig keverhetünk argongáz alatt 6 ml víz és 6 ml tömény nátrium-hidroxid oldat elegyével. Az oldatot vákuumban bepároljuk, szulfonált polisztirol gyantával megsavanyítjuk az előbbihez hasonló oszlopon, és vízzel eluáljuk. A 800 mg innen kapott anyagot (valamint 200 mg-ot egy előbbi előállításból) 30 g szilikagéllel töltött oszlopon kloroform : ecetsav (7 : 3) eleggyel kromatografáljuk. A kapott 740 mg terméket egy dietil-amino-etil-dextrán anioncserélő gyantával töltött 85 ml-es oszlopon 750—750 ml 0,005 mólos ammónium-hidrogén-karbonát oldattal és 0,5 mólos ammónium-hidrogén-karbonát oldattal gradiens módszerrel eluáljuk. A terméket szulfonált polisztirol kationcserélő gyantán a szabad savvá alakítjuk, és utána argongáz alatt 6 órán át keveqük 7 ml ecetsavban 350 mg cinkporral. A szuszpenziót centrifugáljuk, és a felülúszót vákuumban szárazra pároljuk, vízben oldjuk, és liofilizáljuk. A maradékot az előbbihez hasonló oszlopon szulfonált polisztirol gyantával megsavanyítjuk, és vízzel eluálva 365 mg címvegyületet kapunk. Rf = 0,52 (szilikagélen, etil-acetáttal). Az analízis eredményei a C9H14N204S • 3H20 összegképlet alapján: számított: C =42,95%, H = 5,68%, N =11,13%, S =12,72%, mért: C =42,92%, H = 5,78%, N =10,94%, S =12,68%. SH: számított: 1,00, mért: 0,98 mól. 5 10 15 20 25 10 35 40 45 50 55 60 65 2
