181013. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új enkefalin analógok előállítására
21 181013 14. példa L-Tirozil-D-metionil-glicil-L-fenilalanil-D-alfa- amino-pentán-foszfonsav előállítása 1,13 g (2,4 mmól) terc-butiloxikarbonil-L-tirozil-D-metionil-glicinből (5. példa, 2. lépés) és 0,63 g (2 mmól) L-fenilalanil-D-alfa-amino-pentán-foszfonsavból (1. példa, 3. lépés) kiindulva és az 1. példa 7. lépésében leírt módon eljárva 0,9 g (70%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 262-265 °C; [a]20 = +59,2° (c = 1, 1 n nátrium-hidroxidban); R| 0,35 -0,40. 15. példa L-Tirozil-D-norleucil-glicil-L-fenilalanil--D-alfa-amino-gamma-metil-bután-szulfonsav előállítása 1,08 g (2,4 mmól) terc-butiloxikarbonil-L-tirozil-D-norlcucil-glicin-ből (7. példa, 3. lépés) és 0,64 g (2 mmól) L-fenilalanil-D-alfa-amino-gamma- metil-bután-szulfonsavból (9. példa, 3. lépés) kiindulva és a 10. példa 5. lépésében leírt módon eljárva 0,95 g (84%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 187-190°C; [a]20 = +58,9° (c = 1, 1 n nátrium-hidroxidban). 16. példa L-Tirozil-D-fenilalanil-glicil-L-fenilalanil-L-alfa-amino-pentán-szulfonsav előállítása 1. lépés: terc-butiloxikarbonil-D-fenilalanil-glicin-benzilészter 13,3 g (50 mmól) terc-butiloxikarbonil-D-fenilalanint és 5,6 ml (50 mmól) N-metil-morfolint 50 ml dimetilformamidban oldunk. Az oldatot -10°C-ra hűtjük, és keverés közben hozzáadunk 6,6 ml (50 mmól) klórhangyasav-izobutilésztert. Tíz perc után a reakcióelegyet -20 °C-ra hűtjük, majd hozzáadjuk 18,6 g (55 mmól) glicin-benzilészter-p-toluol-szulfonát és 6,1 ml (55 mmól) N-metil-morfolin 80 ml dimetilformamidban készített és —20 °C-ra lehűtött oldatát. A reakcióelegy keverését 10 percig—10°C-on, 1 órán át 0°C-on és éjszakán át szobahőmérsékleten folytatjuk. Ezt követően a reakcióelegyet szüljük, és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 300 ml etilacetátban és 100 ml vízben oldjuk. Az etilacetátos fázist rendre kétszer 60 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonáttal, kétszer 60 ml vízzel, kétszer 60 ml — jeges vízzel lehűtött — 1 n sósavval és kétszer 60 ml vízzel mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfáton történő szárítás és csontszenes derítés után csökkentett nyomáson bepároljuk. A kristályos maradékot dietiléter-n-hexán 1 : 1 arányú elegyében szuszpendáljuk, szűrjük, a fenti eleggyel mossuk, és vákuum-exszikkátorban szárítjuk. 18,95 g (91,9%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 133-134 °C; R»4 0,28-0,38; [a]20 = +8° (c = 1, dimetilformamidban). 2. lépés: terc-b utiloxikarbonil-L- tirozil-D-fenilalanil-glicin-benzilészter 18,55 g (45 mmól) védett dipeptid-észtert (1. lépés) feloldunk 60 ml 11-15% sósavat tartalmazó etilacetátban. Fél óra után az oldatot bepároljuk, és a maradékot vákuum-ekszikkátorban szárítjuk kálium-hidroxid mellett. A kapott terméket (R| 0,4-0,5) 40 ml dimetilformamidban oldjuk, majd hozzáadunk 5,0 ml (45 mmól) N-metil-morfolint és 26,2 g (49,5 mmól) terc-butiloxikarbonil-L-tirozin -pentaklórfenilésztert. A reakcióelegyet 16-20 órán át keveijük, az első két órában 5,5 ml (49,5 mmól) N-metil-morfolint adunk hozzá öt részletben. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, a párlási maradékot 300 ml etilacetátban és 50 ml vízben oldjuk. Az etilacetátos fázist kétszer 50 ml — jeges vízzel hűtött — 1 n sósavval és kétszer 50 ml vízzel mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, csontszénnel derítjük, és végül csökkentett nyomáson bepároljuk. A kristályos maradékot diizopropiléterben szuszpendáljuk, szűrjük, diizopropiléterrel mossuk és vákuum-exszikkátorban szárítjuk. 23,5 g (90,8%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 169 °C; Rí0 0,45-0,55; [a]^° = +16,3° (c = 1, dimetilformamidban). 3. lépés: terc-butiloxikarbonil-L-tirozil-D-fenilalanil-glicin 23,0 g (40 mmól) védett tripeptid-észtert 400 ml metanolban oldunk, és csontszenes palládium katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. A reakció végén a katalizátort kiszűrjük, és metanollal mossuk. A metanolos oldatokat egyesítjük és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot dietiléterrel eldörzsöljük, szűrjük, dietiléterrel mossuk és vákuum-exszikkátorban szárítjuk. 17,45 g (89,8%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 105-110 °C; Rf13 0,2-0,3. 4. lépés: terc-butiloxikarbonil-L-tirozil-D-fenilalanilglicin-pentaklórfenilészter 7.3 g (15 mmól) védett tripeptidből (3. lépés) aktív észtert készítünk a 2. példa 5. lépésében leírt módon. 9,68 g (87,9%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 209 -210 °C; Rf12 0,6-0,7; [a]20 = +15,4° (c = 1, dimetilformamidban). 5. lépés: terc-butiloxikarbonil-L-tirozil-D-fenilalanil-glieil-L-fenilalanil-L-alfa-amino-pentán■szulfonsav-N-metil-morfolin-só 2.3 g (3,15 mmól) védett trípeptid aktív észterből (4. lépés) és 0,95 g (3 mmól) dipeptidből (2. példa, 22 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 11
