181009. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az 1-helyzetben szarkozil-,hidroxiacetil- vagy L-alfa-aminooxi propinil csoportot és 8-helyzetben észtercsoportot tartalmazó antagonista hatású angiotenzin-II analógok előállítására
17 181009 18 vízzel kirázzuk. Szárítás és bepárlás után a védett oktapeptidésztert [Rj4) =0,48] száraz éteres kezeléssel izoláljuk. Termelés 1,6 g (87%); op.: 188-194 °C. 3. lépés A védőcsoportok eltávolítása 1,6 g (1,2 mmól) védett oktapeptidet (6. példa, 2. lépés) 5 ml dimetil-formamidban oldunk, 3,8 ml 2-merkapto-etanolt adunk hozzá, majd egy óra elteltével vízmentes éterrel leválasztjuk a dinitro-fenil-csoporttól mentes oktapeptidet, amelyet metanol-éteres átcsapással tisztítunk. Termelés: 1,3 g (94%); Rj4) = 0,35; R^s> = 0,72. Ezt oldjuk 50 ml 5:1:1 arányú metanol-ecetsav-víz elegyében, 0,6 g 10%-os palládiumos aktívszén-katalizátort adunk hozzá és intenzív keverés közben 17 óra hosszat hidrogéngázt buborékoltatunk át az oldaton. A reakció befejeztével a katalizátort kiszűrjük a fenti oldószereleggyel mossuk, majd a mosófolyadékkal egyesített szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot etanol-víz eleggyel többször bepároljuk és végül a maradékként kapott szabad oktapeptid-észtert éterrel eldolgozva szűrjük és mossuk. Termelés: 0,64 g (92%). 4. lépés A nyers szabad oktapeptid-észter tisztítását az általános részben leírt módon végezzük. RÍ7) = 0,22; r£8) = 0,73; r£9) = 0,56. Aminosav-analízis: Thr 0,92 (1); Pro 1,03 (1); Val 1,0 (1); lie 1,05 (1); Tyr 0,7 (1); His 1,0 (1); Arg 1,0 (1). 7. példa (Szarkozin1, alanin-metilészter8-angiotenzin-II előállítása 1. lépés Z-Sar-Arg(NOí )—Val—Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-Ala—OMe 0,7 g (5 mmól) Ala-OMe-hidrokloridot 20 ml kloroformban oldunk 0,7 ml trietilamint és 1,14 g (3 mmól) Boc-Pro-OPfp-t adunk hozzá. A pH-érték tartása mellett 30 perc múlva az oldatot 10%-os vizes citromsavoldattal, n-sósavoldattal, végül vízzel kirázzuk. A szárítás és bepárlás után a kapott védett dipeptidet [R^ =0,61] izolálás nélkül oldjuk 5 ml 8 n dioxános sósavoldatban, majd 10 perc múlva vízmentes éterrel hígítjuk és bepároljuk. A szabad dipeptid-hidrokloridot [Rp^ = 0,32] 20 ml kloroformban oldjuk, az oldat pH-értékét 8-ra állítjuk be és 2,7 g (4,5 mmól) Boc-His(Dnp)-OPfp-t adunk hozzá. Az oldat pH-értékének tartása mellett egy óra múlva hozzáadunk 0,33 ml dimetilamino-etil-amint, majd 15 perc múlva kirázzuk 10%-os vizes citromsavoldattal, n-sósavoldattal, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, végül vízzel. A szárítás és bepárlás után kapott védett tripeptidet [RP*=0,27] 10 ml 8 n dioxános sósavoldatban oldjuk, majd 15 perc múlva a szabad tripeptid-hidrokloridot [Rp^ = 0,48] vízmentes éterrel kicsapjuk, szűrjük és mossuk. A terméket azonnal oldjuk 30 ml 2:1 arányú kloroform-dimetilformamid elegyében, az oldat pH-értékét 8-ra állítjuk be és 2,4 g (6 mmól) Boc-Ile-OPfp-t adunk hozzá. Az oldat pH-értékének tartása mellett 30 perc múlva az oldószert elpárologtatjuk, a maradékot etilacetátban oldjuk és a szokásos módon kirázzuk. Szárítás és bepárlás után a védett tetrapeptidet [R^2) = 0,29] éter és n-hexán 1 :9 arányú elegyével eldolgozva izoláljuk, majd 10 ml 8 n dioxános sósavoldatban oldjuk. 10 perc múlva a szabad tetrapeptid-hidrokloridot [r£5* =0,67] vízmentes éterrel kicsapjuk, mossuk és azonnal oldjuk 30 ml 2:1 arányú kloroform-dimetilformamid elegyében. Az oldat pH-értékét 8-ra állítjuk be és 1,78 g (3,3 mmól) Boc-Tyr(Bzl)-OPfp-t adunk hozzá. Az oldat pH-értékének tartása mellett 15 perc múlva az oldószert elpárologtatjuk, a maradékot etilacetátban oldjuk és a szokásos módon kirázzuk. A védett pentapeptidet [Rf2) = 0,33] vízmentes éteres kezeléssel izoláljuk, majd 10 ml 8 n dioxános sósavoldatban oldjuk és a szabad pentapeptid-hidrokloridot [Rf4) = 0,35] vízmentes éterrel kicsapjuk, szüljük és azonnal oldjuk 20 ml dimetil-formamidban. Az oldat pH-értékét 8-ra állítjuk be és 1,55 g (4 mmól) Boc-Val-Opfp-t adunk hozzá. Az oldat pH-értékének tartása mellett 30 perc múlva az oldószert elpárologtatjuk, a maradékot kloroformban oldjuk és a szokásos módon kirázzuk. Szárítás és bepárlás után a kapott védett hexapeptidet [R[2>=0,35] vízmentes éterrel eldolgozva izoláljuk. Ezután 8 ml 8 n dioxános sósavoldatban oldjuk és 20 perc múlva a szabad hexapeptid-hidrokloridot [Rp'=0,75] vízmentes éterrel kicsapjuk, szűrjük, mossuk és azonnal oldjuk 20 ml dimetil-formamidban. Az oldat pH-értékét 8-ra állítjuk be és 2,64 g (6 mmól) Boc-ArgfNOí )-OPfp-t adunk hozzá. Az oldat pH-értékének tartása mellett egy óra múlva a reakcióelegyet 60 ml kloroformmal hígítjuk, n-sósavoldattal, majd vízzel kirázzuk, szárítjuk és bepároljuk. A kapott védett heptapeptidet 1:3 arányú etanol-éter elegyével eldolgozzuk, szűrjük és mossuk [R^4)=0,85], A terméket 10 ml S n dioxános sósavoldatban oldjuk, majd a szabad heptapeptid-hidrokloridot [R^4'=0,15] vízmentes éter hozzáadásával kicsapjuk, szűrjük, mossuk és azonnal oldjuk 20 ml dimetil-formamidban. Az oldat pH-értékét 8-ra állíljuk be és 1,27 g (3,3 mmól) Z-Sar-OPfp-t adunk hozzá. Az oldat pH-értékének tartása mellett 15 perc múlva 60 ml kloroformmal hígítjuk és a szokásos módon kirázzuk. Szárítás és bepárlás után a kapott védett oktapeptidet 25 ml etanollal eldolgozva szüljük és mossuk. így 1,37 g (Pro-ra számított elméleti hozam 33%-a, ami lépésenként 86%-os termelésnek felel meg) védett oktapeptidésztert kapunk; op.: 192-196 °C; [R^4) = 0,70], 2. lépés A védő csoportok eltávolítása 1,37 g (1 mmól) védett oktapeptid-észtert (7. példa, 1. lépés) 3 ml dimetil-formamidban oldunk, 9 s 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 i
