181008. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-helyzetben szarkozil-csoportott és 8 helyzetben alfa -hidroxi karbonsavat tartalmazó antagonista hatású angiotenzin-II analógok előállítására
9 181008 10 oktapeptidet metanol-éteres átcsapással tisztítjuk. Termelés 1,14 g (89%); Rj4) = 0,60. A terméket 40 ml 5:1:2 arányú metanol-ecetsav-víz elegyben oldjuk, 0,6 g 10%-os csontszenes palládiumot adunk hozzá és erőteljes keverés közben 20 órán át hidrogéngázt buborékoltatunk át az oldaton. Ezután a katalizátort kiszűrjük, a fenti oldószereleggyel mossuk és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot vízmentes etanollal eldörzsöljük és leszűrjük. így 0,7 g hozammal (84%) kapjuk a (Sár1 ,Lacs>Ang-II terméket. 4. lépés A nyers peptid tisztítása az általános részben megadott módon történik. r£6) = 0,17; R^7) = 0,40; R^8'i = 0,21. Aminosav-analízis: Pro 1,0 (1); Val 1,0 (1); Ile 1,03 (1); Tyr 0,85 (1); His 0,85 (1); Arg 0. 96.1); Sár 1,0(1). 2. példa (Szarkozin1, L-tejsav-etilészter8)-Angiotenzin-II előállítása 1. lépés Boc-Pro-Lac-OEt előállítása 4,3 g (20 mmól) Boc-Pro-OH 20 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatához 0°C-on 10 perc alatt hozzáadunk 4,8 g (30 mmól) karbonil-diimidazolt. Ezután ezen a hőmérsékleten 2,1 g (20 mmól) tejsav-etilészter hűtött tetrahidrofurános oldatát csepegtetjük az oldathoz. A reakcióelegyet további 30 percig 0°C-on, majd 2 óra hosszat 20 °C-on keverjük és éjszakán át hűtőszekrényben állni hagyjuk. Másnap a tetrahidrofuránt ledesztilláljuk, a maradékot 40 ml etilacetátban oldjuk és 15 ml n-sósawal, kétszer, majd vízzel azután 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal kétszer, végül ismét vízzel kirázzuk. Szárítás után az oldószert ledesztilláljuk és a maradék olajat exszikkátorban súlyállandóságig szárítjuk. Termelés 2,22 g (36%); [R|3) = = 0,77; R^ = 0,36. 2. lépés Z-Sar-Arg(N02)~Val-Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-Lac-OEt előállítása 1,8 g (6 mmól) Boc-Pro-Lac-OEt 8 ml 7,5 n sósavas dioxánnal készített oldatát 15 percig állni hagyjuk, azután 30 ml étert adunk hozzá, majd szárazra pároljuk. A szabad peptolid-hidrokloridot [r£4) = 0,31] 15 ml dimetil-formamidban oldjuk, az oldat pH-ját trietil-aminnal 8-ra állítjuk és 2,9 g (5 mmól) Boc-His—(Dnp)—OPfp-t adunk hozzá. Egy óra múlva az oldószert etil-acetátra cseréljük és kirázzuk 10%-os citromsav oldattal, n-sósawal, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, végül vízzel. A szárítás és bepárlás után kapott védett tripeptidet [RP) = 0j69] azonnal oldjuk 20 ml 7,5 n sósavas dioxánban. Húsz perc múlva vízmentes éter hozzáadásával leválasztjuk a szabad tripeptid-hidrokloridot [R^4) = 0,19], majd 15 ml dimetil-formamidban oldjuk, az oldat pH-értékét trietil-aminnal 8-ra állítjuk és 3,0 g (7,5 mmól) BOc-Ile-OPfp-t adunk hozzá. A pH-érték tartása mellett 30 percig állni hagyjuk az oldatot, majd az oldószert elpárologtatjuk, a maradékot etil-acetátban oldjuk és a már ismertetett módon kirázzuk. Szárítás és bepárlás után a maradékot éter és n-hexán 2 :8 arányú elegyével eldörzsöljük és leszűrjük. Az így kapott védett tetrapeptidet [R^3) = 0,36] 10 ml 8 n sósavas dioxánban oldjuk és 15 perc múlva vízmentes éter hozzáadásával leválasztjuk a szabad tetrapeptid-hidrokloridot [Rp^ = 0,27]. Ezt nyomban feloldjuk 20 ml dimetil-formamidban, az oldat pH-ját 8-ra állítjuk, és 3,24 g (6 mmól) Boc-Tyr(Bzl)-OPfpt- adunk hozzá. A pH-érték tartása mellett 30 percig állni hagyjuk az oldatot, majd az oldószert elpárologtatjuk a maradékot etil-acetátban oldjuk. * 'Az oldathoz 0,22 ml N,N-dimetilamino-etilamint adunk. Tíz perc múlva az oldatot a szokásos módon kirázzuk, majd szárítjuk és bepároljuk. A maradékot n-hexánnal eldörzsöljük és leszűrjük. Az így kapott védett pentapeptidet [R^2) = 0,64] 10 ml 8 n sósavas dioxánban oldjuk, majd 15 perc múlva vízmentes éter hozzáadásával leválasztjuk a szabad pentapeptid-hidrokloridot [R^4) =0,33], A terméket 15 ml dimetil-formamidban oldjuk, az oldat pH-értékét trietil-aminnal 8-ra állítjuk és 2,1 g (5,5 mmól) Boc—Val—OPfp-t adunk hozzá. A pH tartása mellett az oldatot 30 percig állni hagyjuk, majd bepároljuk, a maradékot etil-acetátban oldjuk és az oldatot a szokásos módon kirázzuk. Szárítás és bepárlás után a maradékot n-hexánnal eldörzsöljük és leszűrjük. Az így kapott védett hexapeptidet [R}2) = 0,76] azonnal oldjuk 10 ml 8 n sósavas dioxánban 15 perc elteltével a terméket vízmentes éterrel leválasztjuk. A kapott szabad hexapeptid-hidrokloridot [r£4) = 0,34] újra oldjuk 20 ml dimetil-formamidban, az oldat pH-értékét 8-ra állítjuk, majd 3,96 g (6 mmól) Boc-Arg(N02)-OPfp-t adunk hozzá. Az oldatot a pH-érték tartása mellett 1 óra hosszat állni hagyjuk, majd 60 ml kloroformmal hígítjuk, a szokásos módon kirázzuk, szárítjuk és bepároljuk. A maradékot vízmentes etanollal eldörzsöljük és leszűrjük. A kapott védett heptapeptidet [r£3) = 0,78] 10 ml 8n sósavas dioxánban oldjuk és 15 perc múlva a terméket vízmentes éter hozzáadásával leválasztjuk. Az így kapott szabad heptapeptid-hidrokloridot [r[4) = 0,56] azonnal oldjuk 20 ml dimetilformamidban, az oldat pH-ját 8-ra állítjuk és 2,12 g (5,5 mmól) Z-Sar-OPfp-t adunk hozzá. A pH fenti értéken való tartása mellett 30 perc múlva az oldatot 60 ml kloroformmal hígítjuk és a szokásos módon kirázzuk. Szárítás és bepárlás után a maradékot etanollal megszilárdítjuk és etanolból átkristályosítjuk. 1,21 g védett oktapeptidet kapunk (His-re számított hozam 17,5%, ami lépésenként 75%-os termelésnek felel meg). Op.: 208-212 °C; R^3> = 0,5. 3. lépés A védőcsoportok eltávolítása 1,21 g (0,88 mmól) Z-Sar-Arg(N02 )-Val—Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-Lac-Oet 5 ml di-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
