181000. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált 7,7-dimetil-5H, 7H-imidazo-[4,5-h]izokinoli-4,6-dionok előállítására
7 181000 8 injekciójával érzéstelenítettüK. A jobb artéria femoralis felől az aorta abdominalis-ba bevezetett, polivinilkloridból készült katéteren át egy Statham-féle (P23 De) nyomásátalakító készülékkel mértük az artériás vérnyomást. A jobb artéria carotis-on át a bal szívkamrába bevezetett katéter jellegű manóméterrel (Millar PC-350 típus) érzékeltük a szívkamranyomást, és a dp/dtmax összehúzódó-képességi paramétert differenciális erősítővel határoztuk meg. Az artériás vérnyomást és a dp/dtmax-ot regisztráló készülékkel folyamatosan feljegyeztük. A vizsgálandó anyagok 2 mg/kg adagját intravénásán injektáltuk. A kapott értékeket a következő táblázat tartalmazza: Vegyület Vérnyomásváltozás mmHg dp/dt növekedés % Hatás időtartama perc A-49/—48 + 83 24 B-52/-80 4- 76 56 C-40/-50 + 87 20 D —67/—63 + 110 57 E —46/—63 + 77 12 F-23/-40 + 86 42 G —40/—30 + 45 9 H —45/—45 + 46 12 I —33/—46 + 32 19 J —47/—58 + 62 29 K-70/-67 + 157 107 L —42/—53 + 90 70 M —41/—49 + 108 55 2. Tengerimalac izolált, elektromosan ingerelt bal szívpitvarának tényleges refrakter periódusára gyakorolt hatás Módszer Mindkét nembeli teigerimalacokat tarkónütéssel elkábítottunk. A mellüreg megnyitása után a szívei, gyorsan eltávolítottuk, 37 °C-os tiróda-oldatba he lyeztük és ebben dolgoztuk fel. Az annulus fibrosus mentén a pitvarokat a kamráktól elválasztottuk és csak a bal pitvart használtuk fel, és Grass-féle (S4G) stimulátor segítségével, 12 volttal, egy ezredmásodperc időtartamig négyszögimpulzussal ingereltük. A pitvarok 37 °C-os, meleg tiróda-oldatban (literenként 136,8 mmól nátriumkloridot, 2,68 mmól káliumkloridot, 0,2625 mmól magnéziumkloridot, 0,417 mmól nátriumdihidrogénfoszfátot, 11,9 mmól nátriumhidrogénkarbonátot, 1,8 mmól kalciumkloridot és 3 g glukózt tartalmazó oldat) voltak és ezen az egész kísérlet alatt 98:2 százalék arányú oxigén •széndioxid gázelegyet buborékoltattunk át. A mechanogram regisztrálása Grass-féle (P5) pulzusíró■készülékkel izometrikus leképzéssel, nyúlásmérőszalagon készült. Az összehúzódásokat megszámláltuk, és az ingerkészüléken megadott frekvenciával hasonlítottuk össze. Először 1 Hz-tól kezdve egészen a „maximális sorozatfrekvenciáig” minden frekvenciát (mindenkor 10 másodperc után 1 Hz-vei növelve) letapogattunk Három előkísérletből a középértéket kiszámítva, állapítottuk meg a „maximális sorozatfrekvencia” kontroli-értéket. Az egyes ingerátvezetések között 5 perces szüneteket iktattunk be, ezek alatt 0,5 Hz-vel ingereltünk. A kontroli-érték meghatározása után a tiróda-oldathoz hozzáadtuk a vizsgálandó anyagot, és 0,5 Hz-el fenntartottuk az ingert. Az első 5 perc alatt megfigyeltük a vizsgálandó anyag izotróp hatását. A vizsgálandó anyag hozzáadása után 5 és 10 perc elteltével egy-egy ingeiátvezetést hajtottunk végre. Az 5, illetve 10 perc után kapott 2 eredmény középértékét az anyag hozzáadása utáni maximális sorozatfrekvenciának neveztük. Előbb mindig a kis adagok hatását mértük, és a maximális sorozatfrekvencia meghatározása után’a következő nagyobb adagra kiegészítve határoztuk meg az ezen adag maximális sorozatfrekvenciáját. Alapelv Az úgynevezett „maximális sorozatfrekvenciát” a szívnek fokozatosan erősödő ingerfrekfenciával való ingerlésével határoztuk meg. Ha a két egymás utáni ingerlés közötti időköz rövidül, akkor meghatározott ingerfrekvenciánál minden második inger az előző szívműködés refrakter periódusába esik, és ezért hatására összehúzódás nem következik be. Ezáltal a „maximális sorozatfrekvencia” a tényleges refrakter periódus mértékeként vehető. Azok az anyagok, amelyek a „maximális sorozatfrekvencia” értékét csökkentik, ezáltal hosszabbítják a refrakter periódust. Grafikusan meghatároztuk azokat a koncentrációkat, amelyek a maximális sorozatfrekvenciát a kontrollérték 50%-ára csökkentik és a következő értékeket találtuk: Vegyület jele ECS0 Mg/ml-ben kifejezve N 1,8 O 5,0 P 6,7 Q 4,8 3. Antiarritmiás hatás kloforommal előidézett kamrafibrilláció ellen egerekben A vizsgálat végrehajtása Ha egy egeret kloroformgőzzel telített üvegedénybe helyezünk, akkor körülbelül 40 másodperc után az egér éfzéstelenné válik, légzése akadozik, és további 20 másodperc után hörgő légzés lép fel. A hörgő légzés megszűnte után az állatot azonnal kivesszük az edényből, szívét gyorsan szabaddá tesszük, és a szívműködést megfigyeljük. Egy percnyi megfigyelési időtartam után csaknem mindegyik állatnál kamrafibrilláció lép fel, illetőleg a szívnek szikével való érintésével előidézhető. Antiarritmiás gyógyszerek előzetes adagolásával a fibrilláció sebessége az adagmennyiségtől függően csökken. Az adag/hatásgörbéből kiszámítottuk az ED50 értékeket és az értékek normál szórásait [Miller, L. C. és Tainter, M. L., Proc. Soc. Exp. Bioi. Med. 57, 261 (1944)]. 5 10 15 20 2‘5 30 35 40 45 50 55 60 65 4
