180925. lajstromszámú szabadalom • Eljárás központi idegrendszerre ható TRH-analóg tripeptid-amidok előállítására
27 180 925 28 kristályosítva 1,78 g (78%) BOC-HPro-NH2-ot kapunk, olvadáspont: 138—140 °C, R* = 0,43, [«] jLj = —24,85° (c = 1, ecetsavban). Elemzési eredmények a C11H20O3N2 összegképlet (molekulasúly: 228,29) alapján: számított: C 57,87%, H 8,83%, N 12,27%; talált: C 57,60%, H 8,89%, N 12,11%. 2. lépés L-Homoprolin-amid-hidroklorid 1,6 g (7 mmól) BOC-HPro-NHb-ot melegen feloldunk 10 ml etilacetátban. Az oldatot szobahőmérsékletre hűtjük, és 10 ml 6 n sósavas etilacetátot öntünk hozzá. A reakcióelegyet 1 óra hosszat állni hagyjuk, majd éterrel hígítva a 15 csapadékot eldörzsöljük és kiszűrjük. Így 1,05 g (91%) H-HPro-NH2 • HCl-ot kapunk, olvadáspont: 178—180 °C, Rf = 0,32, [a]o = +26,2° (c = 1, metanolban). 20 3. lépés Benziloxikarbonil-L-glutaminil-L-hisztidil-L-homoprolin-amid 5,39 g (12,5 mmól) Z-Gln-His-NjH.i-t szuszpendálunk 100 ml DMFA-ban és a szúszpenzióhoz 25 4,6 ml (37,5 mmól) 8,1 n sósavas dioxánt öntünk. A kapott oldatot —20 °C-ra hűtjük, és —15 °C-on 1,63 ml (13,7 mmól) terc-butil-nitritet csepegtetünk hozzá, keverés közben. Ezután a reakcióelegyet 20 percig —10 °C-on kevertet- 30 jük, majd 3,5 ml (25 mmól) trietilamint adunk hozzá. Eközben 2,07 g (12,5 mmól) H-HPro-NH2-HCl-ot feloldunk 10 ml DMFA-ban, és az oldathoz 1,75 ml (12,5 mmól) trietilamint adunk. A csapadék kiszűrése után kapott oldatot a fen- 35 ti azid-oldathoz csepegtetjük, —10 °C-on, végül még 1,75 ml (12,5 mmól) trietil-amint adunk hozzá. Ezután a reakcióelegyet még 1 óra hoszszat keverjük. —10 °C-on, majd éjszaka 2 °C-on állni hagyjuk. Másnap a csapadékot kiszűrjük, 40 a szűrletet vákuumban bepároljuk, és az amorf maradékot etilacetáttal eldörzsöljük. A nyers terméket szilikagél-oszlopra visszük, és a 2. oldószereleggyel eluáljuk. A tiszta terméket tartalmazó frakciókat bepároljuk, a bepárlási ma- 45 radékot éterrel eldörzsöljük. így 2,35 g (36%) Z-Gln-His-HPro-NH2-ot kapunk, R* = 0,30. 4. lépés L-Piroglutamil-L-hisztidil-L-homoprolin-amid 50 2,1 g (4 mmól) Z-Gln-His-HPro-NHj-ot feloldunk 40 ml ecetsavban, és az oldaton, 0,4 g 10%-os csontszenes palládium-katalizátor hozzáadásával, 1 órán keresztül hidrogéngázt buborékoltatunk át. A katalizátor kiszűrése után a szűrletet 60—70 °C-ra melegítjük, 30 percig 5 ezen a hőmérsékleten tartjuk, majd vákuumban bepároljuk. Az így nyert nyers terméket a 16. példa 5. lépésében ismertetett módon ioncseréljük és tisztítjuk. így 618 mg (56%) Glp-His-HPro-NH2-ot kapunk, Rf = 0,08, [«] ^ = 10 24,0° (c = 1, metanolban), aminosav-analízis : Glu: 0,97 (1,0); His 1,00 (1,0); HPro: 0,91 (1,0). SZABADALMI IGÉNYPONT Eljárás a központi idegrendszerre ható új (I) általános képletű, TRH-analóg tripeptid-amidok Glp-X-Y-NH-A (I) — e képletben X L-valil-, L-prolil-, D-leucil-, L-izoleucil-, L-treonil-, L-(terc-butil)-szeril-, L-norvalil-, L-norleucil-, L-2-amino-butanoil-, L-ciklohexil-alanil- vagy L-2-amino-dekanoil-csoportot, Y L-prolil-csoportot és A hiäi ogénatomot, vagy X L-leucil-csoportot, Y L-propil-csoportot és A etil-, n-decil- vagy 2-(dimetil-amino)-etil-csoportot, vagy pedig X L-hisztidil-csoportot, Y L-homoprolil- vagy D-pipekolil-csoportot és A hidrogénatomot képvisel — előállítására, azzal jellemezve, hogy a) valamely Y-NH-A általános képletű aminosav-amidot — ahol Y és A jelentése a fentivel egyező — a szokásos peptidkémiai módszerekkel a kívánt (I) általános képletű termék X csoportjának megfelelő, adott esetben az aminocsoporton védett aminosavval, majd az így kapott dipeptid-amidot adott esetben védett piroglutaminnal kondenzáljuk, vagy b) valamely Y-NH-A általános képletű aminosav-amidot egy Glp-X-OH vagy az aminocsoporton védett GIn-X-OH dipeptiddel — ahol X a fenti jelentésű — vagy azok azidjával kondenzálunk, a kapott termék védőcsoportját eltávolítjuk és Gln-X-OH dipeptid alkalmazása esetén a kapott Gln-X-Y-NHi-A általános képletű tripeptid Gin-csoportját ecetsavval történő melegítés útján Glp-csoporttá alakítjuk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója Zalai Nyomda B4 614
