180866. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tiszta, 3-izomertől mentes 9-(2, 6-dihalogén-benzil)-adeninek előállítására
9 180866 10 ideig, például akár 36 óra hosszat is tovább folytatjuk. Laboratóriumi méretben lefolytatott reakció esetén az optimális reakcióidő gyakorlati szempontból 5 óra körül van; üzemi méretekben 24 órai reakcióidő alkalmazása bizonyult célszerűnek. A reakció befejezése után a vizes réteget elkülönítjük a reakcióelegyböl. Szükséges lehet ekkor a reakcióelegy 50— 100 °C-ra történő felmelegítése, az alkalmazott oldószer mennyiségétől függően, hogy a vizes fázist könnyen elkülöníthessük. A vizes fázist ezután valamely bázis hozzáadása útján meglúgosítjuk. Erre a célra bármely bázis alkalmas, amely vízben oldódó szulfátot képez. Különösen kálium-hidroxid, nátrium-hidroxid, ammónium-hidroxid, nátrium-karbonát vagy kálium-karbonát alkalmazása célszerű; elsősorban a nátrium-hidroxid bizonyult előnyösnek. A vizes fázis erős meglúgosítása után a tiszta termék kicsapódik, szűréssel elkülöníthető; vízzel vagy vizes alkohollal történő mosás után a terméket vákuumban megszárítjuk. A találmány szerinti eljárás további előnye, hogy az értékes adenint visszanyerhetjük az alkalikus szűrletből, semlegesítés és az ennek hatására kivált adenin szűréssel történő elkülönítése útján. Elemzési módszerek I. A 9-izomer, 3-izomer és 7-izomer súly%-ának meghatározása, ha a 3-izomer 1%-nál nagyobb mennyiségben van jelen A 9-izomer, 3-izomer és 7-izomer súly%-ban számított mennyiségét nagynyomású folyadék-kromatográfiás eljárással és ibolyántúli spektrometriával határozhatjuk meg. A 9-izomer és 7-izomer súly%-ban számított mennyiségének nagynyomású folyadék-kromatográfiával történő meghatározásához egy 15 cm méretű, 5 mikron szemcseméretű, teljesen pórusos szilikagéllel (Zorbax—SIL, DuPont-gyártmány) töltött oszlopot alkalmazunk; kloroform és metanol 95 : 5 arányú elegyével eluálunk és az egyes komponensek abszorpcióját 254 nm-nél mérjük, belső standardként 9-benzil-adenint alkalmazva (±0,3% pontossággal). A 3-izomer súly%-ban számított mennyiségét ibolyántúli spektrometriával határozzuk meg. A mintát 0,1 n metanolos bázis-oldatban vizsgáljuk 310 nm-nél; a 3-izomer s-értéke ezen a hullámhosszon 2300, míg a 9-izomer nem abszorbeál (pontosság: ±0,1%). II. A 3-izomer nyomainak meghatározása súly%-ban, a kénsavas kezelés után A 3-izomernek a termékben jelenlevő, súly%-ban számított mennyiségét nagynyomású folyadék-kromatográfiával határozzuk meg, 30 cm méretű, 10 mikronos mikropórusos, oktadecil-szilánnal kötött „Micro Bondapak C—18 No. 27 324” adszorbenssel (Waters’ Associates) töltött oszlopon; mobil fázisként vizes metanolos foszfát-oldatot alkalmazunk, 35 °C hőmérsékleten. A mobil fázisként alkalmazott metanolos vizes foszfát-oldatot 30 rész metanol és 70 rész 0,01 mólos vizes dinátrium-hidrogén-foszfát-oldat felhasználásával készítjük és foszforsavval 7 pH-értékre állítjuk be. Az ibolyántúli vizsgálatot 280 nm-nél végezzük; a kimutatási határérték 100 ppm. C) Alternatív eljárás 9-(2,6-dihalogén-benzil)-adeninek előállítására. A találmány szerinti eljárás egy alternativ változata értelmében a 2-helyzetben helyettesítetlen 9-(2,6-dihalogén-benzil-adenineket oly módon állíthatjuk elő, hogy 7-(N-formil-N -2,6-dihalogén-benzil-amino)[ 1,2,5]tiadiazolo[3,4- djpirimidineket, vagyis a D reakció-vázlatban szereplő (XII) általános képletnek megfelelő szerkezetű vegyületeket Raney-nikkellel kezelünk. Ennek az eljárásnak a teljes reakció-menetét a (D) reakció-vázlat szemlélteti. A (IX) képletű 4,5,6-triamino-pirimidint — amelyet az A. Shrage és munkatársai, J. Org. Chem., 16, 208 (1951) által leírt eljárással állíthatunk elő — tionilkloriddal reagáltatjuk, és így a (X) képletű 7-amino[l,2,5]tiadiazolo[3,4-d]pirimidint kapjuk. Ebből a vegyületből a 7-amino-csoportot az Y. F. Shealy és munkatársai, J. Org. Chem., 27, 2135 (1964) által leírt eljárással, 100 °C hőmérsékleten egy 2,6-dihalogén-benzil-aminnal (XI) 'lukleofil módon eltávolítjuk és így az új (XIII) általános képletű közbenső terméket — ahol X; és X2 halogénatomot képvisel — kapjuk. Ez a (XIII) általános képletű közbenső rermék előállítható (X) képletű vegyületből oly módon is, hogy a vegyületet zárt edényben, 100 °C hőmérsékleten, ammóniával és valamely 2,6-dihalogén-benzil-kloriddal kezeljük. A (XIII) általános képletű vegyületet azután szobahőmérsékleten hangyasavanhidriddel formilezzük és így az ugyancsak új (XII) általános képletű vegyülethez — ahol X! és X2 jelentése a fentivel egyező — jutunk. Ezt a stabil, szilárd (XII) általános képletű vegyületet Raney-nikkellel kezeljük, amikoris az simán deszulfurálódik és így a (III) általános képletű vegyülethez jutunk. A deszulfurálást vizes alkoholban, mint reakcióközegben folytatjuk le; előnyösen !—6 szénatomos alkoholt alkalmazunk erre a célra. A reakciót szobahőmérséklettől körülbelül 125 °C-ig terjedő hőmérsékleten, körülbelül 1 órától 24 óráig terjedő reakcióidővel folytatjuk le. Előnyösen vizes etanolban, szobahőmérsékleten, körülbelül 2 órai reakcióidővel dolgozunk. A találmány szerinti eljárás e változatában közbenső termékként képződő (XII) és (XIII) általános képletű vegyülelek új termékek; ezek a vegyületek a (XV) közös általános képlettel jellemezhetők, amelyben X, és X2 egymástól függetlenül halogénatomot, R"’ pedig hidrogénatomot vagy —CHO csoportot képvisel. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módjait közelebbről az alábbi példák szemléltetik; megjegyzendő azonban, hogy a találmány köre nincsen ezekre a példákra korlátozva. 1. példa Adenin alkilezése a,2-diklór-6-fluor-toluollal, „Aliquat 336” jelenlétében, hexánt és vizet tartalmazó kétfázisú folyékony reakcióelegyben Egy hőmérővel, kondenzátorral, nitrogén-bevezetőcsővel és felül elhelyezett mechanikai keverővei felszerelt egyliteres háromnyakú gömblombikba beadagolunk 40 ml vizet, majd 8,0 g (0,20 mól) nátrium-hidroxidot, majd ennek feloldódása után 27,60 g (0,20 mól) 98%-os tisztaságú adenint. Az adenin feloldódása után 39,95 g (0,20 mól ±2%) 91,5%-os tisztaságú a,2-diklór-6-fluor-toluol és 5,04 g (0,01 mól, 5 mól%) „Aliquat 336” 300 ml hexánnal készített oldatát adjuk hozzá. (A fázis-átvivő katalizátor elhagyása esetén a reakció nem következik be.) Az elegyet 6 óra hosszat forraljuk visszafolyató hűtő alkalmazásával, keverés közben, majd szobahőmérsékletre hűtjük le és a kivált szilárd anyagot 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
