180783. lajstromszámú szabadalom • Eljárás timozinÓ1(inex lent) és/Asn2(index fölt)/-analógjai előállítására
15 180783 16-Asp(OBzl)-Ala-Ala-OH-t kapunk; op.: 167—170C°, [a]l25= - 18,91° (c = 1, DMSO). 0,825 g (1,41 mmól) H3C-CO-Ser(Bzl)-Asp(OBzl)-Ala-Ala-OH 4 ml dimetilformamiddal készített oldatát jégfürdőn 0 C°-ra hűtjük. Az oldathoz 54,3 mg (1,69 mmól) hidrazint, majd 0,475 g (3,10 mmól) HOBT ■ H20-t és 0,32 g (1,55 mmól) DCC-t adunk, az elegy pH-ját NMM-mel 7,5- re állítjuk, és a reakcióelegyet 2 órán át 0C°-on, végül 17 órán át 25 C°-on keverjük. Ezalatt a reakcióelegy begélesedik. A gélszerű elegyet metanollal hígítjuk, a kivált szilárd anyagot vákuumszűrőn kiszűrjük, metanollal, éterrel és petroléterrel alaposan mossuk, és a kapott, 229—232 C°-on olvadó terméket dimetilformamidból metanollal kicsapjuk. 0,51 g (61,0%) H3C-CO-Ser(Bzl)-Asp(OBzl)-Ala-AIa-HNNH2-t kapunk; op.: 230-232 C°, [a]“= - 17,94° (c= 1, DMSO). c) 39,4 g (166 mmól) H-Glu(OBzl)-OH, 65,0 g (166 mmól) Boc-Ser(Bzl)-OSu, 900 ml dimetilformamid és 2,3 ml (165 mmól) Et3N elegyét éjszakán át keverjük. Az enyhén lúgos kémhatás biztosítására az elegyhez ezalatt szükség esetén kevés Et3N-t adunk. A kapott átlátszó oldatot szárazra pároljuk, és az olajos maradékot 1,5 liter etilacetát és 2 liter 5%-os vizes ecetsav-oldat között megoszlatjuk. A szerves fázist vízzel kétszer mossuk, nátriumszulfát fölött szárítjuk, és bepároljuk. A kapott 90,0 g átlátszó, olajos maradékot 3 liter éterben felvesszük, és az oldathoz 25 ml ciklohexilamint adunk. A kivált szilárd anyagot metanolból és éterből átkristályosítjuk. 76,2 g (74,8%) Boc-Ser(Bzl)-Glu(OBzl)-OH ■ CHA-t kapunk; op.: 154—156,5 C°, [a]p = +6,32° (c= 1, metanol). 1,5 liter víz és 1,5 liter etilacetát keverékében 76,2 g (124 mmól) Boc-Ser(Bzl)-Glu(OBzl)-OH ■ CHA-t szuszpendálunk, és a szuszpenzióhoz pH~ 2,5 érték eléréséig 10%-os vizes kénsavoldatot adunk. Ekkor a szilárd anyag feloldódik. A szabad dipeptid-karbonsavat tartalmazó szerves fázist elválasztjuk, vízzel kétszer mossuk, szárítjuk, és szárazra pároljuk. A 68,5 g súlyú átlátszó, olajos maradékot 45 percig 3 liter frissen készített 4,1 n tetrahidrofurános sósavoldattal kezeljük, majd az elegyet olajos maradékká bepároljuk. A maradékról kétszer tetrahidrofuránt párolunk le. Az így kapott HC1 • H-Ser(Bzl)-Glu(OBzl)-OH-t 500 ml dimetilformamidban oldjuk, az oldatot 0 C°-ra hűtjük, és 48,66 g ( 124 mmól) Boc-Ser(Bzl)-OSu-t és közvetlenül ezután 27 ml Et3N-t adunk hozzá. Az elegyet éjszakán át 25 C°-on keverjük, ezalatt az enyhén lúgos kémhatás biztosítására az elegyhez időről időre Et3N-t adunk. A kivált kevés oldhatatlan anyagot kiszűrjük, és a szürletet bepároljuk. Az olajos maradékot etilacetátban felvesszük, az oldatot 5%-os vizes ecetsav-oldattal és vízzel mossuk, nátriumszulfát fölött szárítjuk, és szárazra pároljuk. A terméket etilacetát és petroléter elegyéből kristályosítjuk. 71,8 g (83,7%) Boc-Ser(Bzl)-Ser(Bzl)-Glu(OBzl)-OH-t kapunk; op.: 112—113 C°, [a]^= + 17,91° (c = 1, THF). 71,6 g (104 mmól) Boc-Ser(Bzl)-Ser(Bzl)-Glu(OBzl)-OH-t 45 percig 2,7 liter frissen készített 3,9 n tetrahidrofurános sósavoldattal kezelünk. Az elegyet szárazra pároljuk, és a maradékról két ízben tetrahidrofuránt párolunk le. A kapott 59,3 g szilárd maradékot (op.: 161—165 C°) elkülönítjük, éterrel mossuk, majd 500 ml dimetilformamidot, 38,2 g (94 mmól) Boc-Thr(Bzl)-OSu-t és 25 mi Et3N-t adunk hozzá, és az elegyet 1 órán át 0 C°-on, végül 15 órán át 25 C°-on keverjük. Ezalatt az enyhén lúgos kémhatás biztosítására az elegyhez több részletben összesen 14,5 ml Et3N-t adunk. A kivált kevés oldhatatlan anyagot kiszűrjük, és a szűrletet bepároljuk. Az olajos maradékot 1,5 liter etilacetátban oldjuk, az oldatot 5%-os vizes ecetsav-oldattal és vízzel kétszer mossuk, nátriumszulfát fölött szárítjuk, és bepároljuk. A kapott szilárd anyagot etilacetátból és petroléterből átkristályosítjuk. 64,8 g (78,1%) Boc-Thr(Bzl)-Ser(Bzl)-Ser(Bzl)-Glu(OBzl)-OH-t kapunk; op.: 115—118 C, [a]2o5= + 11,64° (c— 1, DMSO). 54,5 g (67,1 mmól) Boc-Thr(Bzl)-Ser(Bzl)-Ser(Bzl)-Glu(OBzl)-OH-t 1,5 liter 4,1 n tetrahidrofurános sósavoldattal kezelünk, és az elegyet a szokásos módon feldolgozzuk. Fehér, porszerű anyagként 46,3 g (56,6 mmól) HC1 • H-Thr(Bzl)-Ser(Bzl)-Ser(Bzl)-Glu(OBzl)-OH-t kapunk. Ehhez a termékhez 500 ml dimetilformamidot, 23,7 g (56 mmól) Boc-Asp(OBz!)-OSu-t és 16 ml Et3N-t adunk, és 2 órán át 0C°-on keverjük. Ezután az elegyet 15 órán át 25 C°-on keverjük, és ezalatt összesen 7,4 ml Et3N-t adunk hozzá. Az elegyet a szokásos módon feldolgozzuk, és a terméket diklórmetánból és petroléterből átkristályosítjuk. 50,35 g (82,7%) Boc-Asp(OBzl)-Thr(Bzl)-Ser(Bzl)-Ser(Bzl)-Glu(OBzl)-OH-t kapunk; op.: 111—113 C°, [a]£= +7,21° (c=l, DMSO). 50.0 g (46 mmól) Boc-Asp(OBzl)-Thr(Bzl)-Ser(Bzl)-Ser(Bzl)-Glu(OBzl)-OH védőcsoportjait 4,15 n tetrahidrofurános sósavoldattal végzett kezeléssel lehasítjuk, és a reakcióelegyet a szokásos módon feldolgozzuk. A kapott 45,4 g fehér, szilárd anyagot 1,5 liter tetrahidrofuránban oldjuk, az oldathoz 7 liter étert adunk, és az elegyet éjszakán át 0 C°-on tartjuk. Fehér, porszerű, szilárd anyagként 44,0 g HCl • H-Asp-(OBzl)-Thr(Bzl)-Ser(Bzl)-Ser(Bzl)-GIu(OBzl)-OH-t kapunk; op.: 179—184 C°. 43,7 g (42,7 mmól) így kapott terméket 500 ml dimetilformamidban oldunk, az oldatot 0 C°-ra hűtjük, és 15,4 g (49 mmól) Boc-Val-OSu-t és 10 ml Et3N-t adunk hozzá. Az elegyet 15 órán át keverjük, ezalatt az enyhén lúgos kémhatás biztosítására az elegyhez több részletben összesen 7,9 ml Et3N-t adunk. Az oldhatatlan anyagot kiszűrjük, és a szűrletet szárazra pároljuk. A kapott olajos maradékot diklórmetánban oldjuk, az oldatot 5%-os vizes ecetsav-oldattal és vízzel mossuk, nátriumszulfát fölött szárítjuk, és 0,5 liter végtérfogatra bepároljuk. A koncentrátumhoz petrolétert adunk, és az elegyet éjszakán át állni hagyjuk^A kivált kristályos terméket tetrahidrofuránból és izopropanolból átkristályosítjuk. 26,3 g (51,4%) Boc-Val-Asp(OBzl)-Thr(Bzl)-Ser(Bzl)-Ser(Bzl)-Glu(OBzl)-OH-t kapunk; op.: 174—177 C°, [a]2D5= +0,84° (c= 1, THF). 13.0 g (10,94 mmól) Boc-Val-Asp(OBzl)-Thr(Bzl)-Ser(Bzl)-Ser(Bzl)-Glu(OBzl)-OH 50 ml dimetilformamiddal készített, 0 C°-os oldatához 0,421 g (13,14 mmól) hidrazint, 3,688 g (24,1 mmól) HOBT-t és 2,48 g (12,04 mmól) DCC-t adunk. A reakcióelegy pH-ját NMM-al 7,5-re állítjuk, és az elegyet 18 órán át keverjük. Az oldhatatlan melléktermékeket kiszűrjük, és a szürletet szárazra pároljuk. A maradékot vizes kezeléssel megszilárdítjuk, és a kapott anyagot dimetilformamidból és izopropanolból kristályosítjuk. 8,7 g (66,4%) Boc-Val-Asp(OBzl)-Thr(Bzl)-Ser(Bzl)-Ser(Bzl)-Glu(OBzl)-HNNH2-t kapunk; op.: 215—218 C°, [a]-u5 = +7,62° (c = 1, DMSO). d) 14,0 g (24,5 mmól) Boc-Thr(Bzl)-Lys(Z)-OH-t 30 percig 500 ml 4,0 n tetrahidrofurános sósavoldattal kezelünk. Az elegyet szárazra pároljuk, és a maradékról két ízben friss 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
