180746. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-21978 jelű antibiotikum előállítására
3 180746 4 seosporus NRRL 11379 mikroorganizmus vagy ennek egy A—21978-at termelő mutánsának süllyesztett, levegőztetett fermentációs körülmények közötti tenyésztésével. A találmány tárgya továbbá eljárás az A—21978 antibiotikum-keverék és keverék-komponenseinek, a C0, C,, C2, C3, C4 és C5 előállítására. A találmány értelmében az A—21978 antibiotikumkeverék előállítására a Streptomyces roseoporus NRRL 11379 törzset vagy ennek egy A—21978 antibiotikumot termelő mutánsát felhasználható szénforrást, nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmazó táptalajon süllyesztett és levegőztetett fermentációs körülmények között addig tenyésztjük, míg jelentős mennyiségű antibiotikum keletkezik. Amikor jelentős mennyiségű antibiotikum keletkezett, az A—21978 keveréket oly módon különítjük el, hogy szűrjük a fermentlevet, a szűrlet pH-ját 3-ra csökkentjük, megvárjuk, míg a keverék kicsapódik, amit azután szűréssel elkülönítünk. Az elkülönített keveréket adott esetben extrakcióval tovább tisztítjuk. Az A—21978C keverék és ennek egyes komponenseinek izolálására kromatográfiás elkülönítést használunk. A találmány szerinti eljárással előállított A—21978 antibiotikumok gátolják a betegséget okozó mikroorganizmusok növekedését, különösen a Gram-pozitív baktériumokét. Az A—21978C antibiotikumok nátrium-sójának KBr tablettában vizsgált infravörös abszorpciós spektrumát a mellékelt ábrákon adjuk meg a következők szerint: 1. ábra: A—21978C keverék. 2. ábra: A—21978C C( komponens. 3. ábra: A—21978C C2 komponens. 4. ábra: A—21978C C3 komponens. 5. ábra: A—21978C C0 komponens. 6. ábra: A—21978C C4 komponens. 7. ábra: A—21978C C5 komponens. A találmány szerinti A—2I978C komponensek szorosan rokon pepiid antibiotikumok. Nem kevesebb mint hat antibiotikum komponenst kaptunk a fermentléből keverékként, és ez A—21978C keverék. Az alábbiakban megadjuk a C0, C,, C2, C3, C4 és C5 komponensek egymástól való elkülönítését. Az A—21978C komponensek egymással szorosan rokon savas, ciklusos polipeptid típusú antibiotikumok, amelyek a terminális aminocsoporton egy zsírsav acilcsoportját hordozzák. Hidrolízist követően mindegyik komponens a következő aminosavakra esik szét: Aminosav Mólok száma Aszparaginsav* ** 4 Glicin 2 Alanin 1 Szerin 1 Treonin 1 Triptofán 1 Ornitin 1 Kinurenin I 3-metil-gIutaminsav* * 1 * Egyike aszparagin lehet. ** 3-metil-glutaminból keletkezhet. Az A—21978C komponensek mindegyike zsírsavat tartalmaz. Az 1. táblázatban összefoglaljuk a zsírsavak szénatom-tartalmát és ahol ismert, megadjuk magát a zsírsavat, amely az egyes A—21978C komponensekben van jelen. 1. táblázat Zsírsav A—21978C komponens Szénatomszám Meghatározás c, íi 8-metil-dekánsav C2 1.2 10-metil-undekánsav C3 13 10-metil-dodekánsav C0 10 — C4 12 — C5 13 — Az Edman-degradáció során kapott eredmények azt jelzik, hogy az N-terminális aminosav triptofán és a következő szomszédos aminosav aszparaginsav. Gázkromatográfiás tömegspektrum mérések szerint az A—21978C C2 komponens az alábbiakban megadott két szerkezet közül az egyiknek megfelelő szerkezetű (az Asx aszparaginsavat vagy aszparagint, a MeGlx 3-metil-glutaminsavat vagy 3-metil-glutamint jelent): O 1. CnH23C-N-H-Trp-Asx-Thr-Gly-Orn-Asx-Ala-Asx-Gly-Ser-MeGlx-Kyn. O 2. C,,H23C-C-N-H-Trp-Asx-Thr-Gly-Orn-Asx-Ala-Asx-Asx-Gly-Ser-MeGlx-Kyn. Az A—21978C C2 komponens karboxi-peptidáz Y enzimmel végzett hidrolízise szerint a kinurenin a C-terminális aminosav és a C-terminális karboxilcsoport észterezheti a treonin csoport hidroxilcsoportját. Az előző vizsgálatok szerint az A—21978C antibiolikumok lehetséges szerkezete az I képleten megadott, ahol 3MG L-threo-3-glutaminsav és az R különleges zsírsav, amely az egyes komponenseknél a következő: A—21978C komponens R c, 8-metil-dekanoilcsoport C2 10-metil-undekanoilcsoport C3 10-metil-dodekanoilcsoport C0 C l0-alkanoilcsoport* C4 C12-alkanoilcsoport* C5 C ! 3-alkanoilcsoport * * Nincs meghatározva. Az A—21978C keverék és egyes komponensei nátrium-sóként vízben, savas és alkalikus oldatokban oldhatók, kivéve akkor, ha a pH 3,5-nél kisebb. Oldódnak rövidszénláncú alkoholokban, például metanolban, etanolban, propanolban vagy butanolban, továbbá dimetil-formamidban, dimetil-szulfoxidban, dioxánban és tetrahidrofuránban. Gyengén oldódnak vagy oldhatatlanok acetonban, kloroformban, dietil-éterben, benzol-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
