180664. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a spektinomicin új analógjainak előállítására
15 180664 16 4. referenciapélda N,N'-bisz-(Benziloxi-karbonil)-3'-0-aeetiI-4'-(R)-acetoxi-6'-acetoxi-3'-(S)-dihidrospektinomicin előállítása (I reakció vázlat) Az 1. referenciapéldában ismertetett módon előállított ß-oximbol 0,77 g (1 millimól) 8 ml acetonitrillel készült oldatához 2 ml (36 millimól) acetaldehidet és 0,8 ml (0,8 millimól) 1,0 n sósavoldatot adunk, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 1 napon át keverjük és ezután 0,26 g (3 millimól) nátrium-hidrogén-karbonátot adagolunk hozzá. A reakcióelegyet ezt követően még további 15 percen át keverjük, majd szűrjük és a szűrőlepényt kis mennyiségű aeetonitrillel mossuk. A szűrletet ezután vákuumban szárazra pároljuk. A nyers terméket ezután nagynyomású folyadékkromatografálást alkalmazva kromatográfiás tisztításnak vetjük alá, „Merck size B" jelzésű előretöltött oszlopot, illetve eluálószerként kloroform és metanol 99: 1 arányú elegyét használva. Összesen 300 5—10 ml-es frakciót szedünk, és az egyes frakciókat vékonyrétegkromatográfiásan, futtatószerként kloroform és metanol 95 : 5 arányú elegyét használva elemezzük. A csak egyetlen foltot adó frakciók közül a harmadik csoportot (a 160— 300. frakciót) összeöntjük, majd vákuumban szárazra pároljuk, 0,2 g (26%) mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapva. CMR (D6-aceton): 8 170,8,170,1,171,3 (3- CH3CO), 157,8, 157,0 (OCON), 138,3 (fenilcsoporí 1-helyzetű szénatomja), 129,2, 128,4, 128,3 (fenilcsoporí 2—6- helyzetű szénatomjai), 95,8, 92,7, 76,0, 75,1, 72,6, 68,6, 66,5, 65,3, 63,4, 60,9, 57,5 (C—O és C—N), 67,3 (fenil-CH20), 31,8 (2—CH3N) és 20,7 (3—CH3CO). Tömegspektrum a tetra-TMS-származékra: 976 m/e. Nagy feloldóképességű tömegspektrum a C45H6gO|6Si3 képlet alapján : számított: 976,38 765; talált: 976,38 784. 4a referenciapélda (I reakcióvázlat) 7,0 g (9,03 millimól) 5-0-(3',4',6'-tri-0-acetil-2'-dezoxi-2'-oxiimino-a-L-glükopiranoziI)-N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-aktinamin (3) 70 ml acetonitrillel készült oldata, 14,2 ml acetaldehid és 17,0 ml 1 n sósavoldat alkotta oldatot szobahőmérsékleten 5 órán át keverünk, majd 60 g vízmentes nátrium-szulfátot adunk hozzá és a keverést 10 percen át folytatjuk. A kivált szilárd anyagot kiszűrjük, majd acetonitrillel mossuk. A szűrletet bepároljuk, majd a kapott maradékot kloroform és etil-acetát 1: 1 arányú elegyéből 15 ml-rel felvesszük és az így kapott oldatot 150 g szilikagélen kromatografáljuk, az eluálást ugyanezzel az oldószerelegygyel végezve. Az eluátumot vékonyrétegkromatográfiásan, futtatószerként 5% metanolt tartalmazó kloroformot használva értékeljük és a tiszta terméket tartalmazó frakciókat összeöntjük, majd bepároljuk, 5,96 g (87%) mennyiségben a (4) hemiketál-triacetátot kapva. Fajlagos forgatóképesség (a)57= —52° (0,7%, kloroform). PMR (CDC13): 8 2,06 (9H, s), 2,88 (3H, s), 3,08 (3H, s), 4,90 (s), 5,13 (4H, s) és 7,38 (10, s). CMR (D6-aceton): 8 170,1, 169,4, 137,5, 137,4,128,6, 8 127,9, 99,2, 94,0, 82,2, 73,9, 70,6, 68,4, 68,0, 66,8, 65,6, 62,3,60,4, 57,3, 30,0 és 20,0 ppm. Tömegspektrum a tri-TMS-származékra [m/e]: 976 (M+), 961 (M+—15), 917, 841,705 és 552. 5. referenciapélda N,N'-bisz-(Benziloxi-karbonil)-5'-demetil-3'-ö-ace-til-4'-(R)-acstoxi-3'-(R)-dihidro-spektinomicin előállítása (K reakcióvázlat) 30 ml metil-nitrilben feloldunk 2,32 g (3,3 millimól), a 2. referenciapéldában ismertetett módon előállítható 5-0-(3',4'-di-0-acetil-2'-dezoxi-2'-oxiimino-D-arabinopiranozil)-N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-aktinamint, majd az így kapott oldathoz 5,0 ml (89,4 millimól) acetaldehidet és 2,5 ml (2,5 millimól) 1 n sósavoldatot adunk. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 3,75 órán át keverjük, majd nátrium-szulfátot adunk hozzá és a keverést 15 percen át folytatjuk. A reakcióelegyet ezután szűrjük, majd a szűrletet vákuumban bepároljuk, 2,6 g mennyiségben fehér csapadékot kapva. Az utóbbit 200 g szilikagélen metanol és kloroform elegyével kromatografálva 1,45 g (2,11 millimól, 64%) mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk 135,0—142,9 °C olvadáspontú fehér csapadékként. IR-spektrum (CHC13): 3450, 3050, 1748, 1684, 1881, 1447, 1362. 1333, 1238, 1160, 1050, 1020 és 680 cm-1. PMR (CDC13): 8 7,4 (s, 10, aromás), 3,4—5,4 (m), 3,05 (s, 6, NCH3), 2,10 (s, 3, COCH3) és 1,95 (s, 3, COCH3). CMR (D6-aceton): 8 170,2,169,8, 157,5, 156,9, 138,0, 129,1, 128,3, 94,6, 91,5, 74,7, 72,4, 67,3, 67,0, 66,3, 65,5, 61,2,57,5,31,6 és 20,6. Tömegspektrum a tri-TMS-származékra: 904 (M+). 6. referenciapélda N,N-bisz-(Benziloxi-karbonil)-4',6'-dihidroxi-3'-(S)-dihidrospektrinomicin előállítása (M reakcióvázlat) A 4. referenciapéldában ismertetett módon előállítható vegyületből 166 mg-ot feloldunk 5 ml metanolos sósavoldatban. (Ezt úgy készítjük, hogy 15,0 ml vízmentes metanolhoz 0,52 ml acetil-kloridot adunk.) A kapott oldatot közel 22 órán át állni hagyjuk, majd az oldószert lehajtjuk, a maradékot kloroformmal hígítjuk és egy csepp trimetil-amint adunk hozzá. Az így kapott oldatot végül bepároljuk, 119 mg mennyiségben üveges csapadékként a cím szerinti vegyületet kapva. CMR (D6-aceton): 8 31,8, 57,5, 60,6, 62,4, 65,2, 66,4, 67,3, 68,9, 74,3, 74,9, 77,6, 78,3, 93,1, 96,1, 128,4,129,2, 138,2 és 157,1 (acetilcsoportra utaló jelek nem észlelhetők). 7. referenciapélda N,N'-bisz-(Benziloxi-karbonil)-5'-demetil-4'-(R)-hidroxi-3 '-(R)-spektinomicin előállítása (N reakcióvázlat) Az 5. referenciapéldában ismertetett módon előállítható diacetátból 2,0 g-ot (2,9 millimól) feloldunk 50 ml 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
