180541. lajstromszámú szabadalom • Javított eljárás L-triptofán elválasztására vizes oldatokból
9 180541 10 talmazó kolonnára vezetjük és 0,2 1/h áramlási sebességgel alulról felfelé áramoltatjuk. A szorpció befejezése után a kolonnán át 0,5 liter 75 °C-os vizet vezetünk át azonos sebességgel. A vizes mosás után az L-triptofánt 1,7% ammóniát tartalmazó 50%-os vizes etanol-oldattal 63 °C-on eluáljuk a kolonnáról. Az első 70 ml eluátumot (L-triptofán-tartalma 0,2 g/1) a következő ciklusban visszavezetjük az anioncserélő gyantához. A következő, 90 ml-es második frakcióhoz (L-triptofán-tartalma : 80,5 g/1) 55 ml jégecetet adunk, majd 5 °C-ra lehűtjük. A kapott kristályokat az 1. példában megadott módon kezeljük. 6,50 g kromatográfiailag egységes 99%-os tisztaságú kristályos L-triptofánt kapunk, ami 51,2%-os hozamnak felel meg. Az L-triptofánt 5,1 g/1 koncentrációban tartalmazó 78 ml anyalúgot és a mosófolyadékot az alkohol ledesztillálása után visszavezetjük az anioncserélő gyantát tartalmazó kolonnára. Az eluátum harmadik, 315 ml-es frakcióját (L-triptofán-tartalma: 6,5 g/1) 30 ml térfogatra bepároljuk. A maradékot hűtjük, majd a kivált kristályokat etanollal mossuk és szárítjuk. 1,98 g 96% -os tisztaságú kristályos L-triptofánt kapunk, ami 67,2%-os hozamnak felel meg. A 96% -os tisztaságú L-triptofánt átkristályosítjuk. 2,25 g terméket 25 ml 50%-os etanolban feloldunk, a forró oldatot szűrjük és a szűrletet lehűtjük. A kivált terméket szűrjük, etanollal mossuk ée szárítjuk. 1,56 g kromatográfiailag egységes 99%-os tisztaságú kristályos L-triptofánt kapunk. Az átkristályosítási lépés hozama 72%. 5. példa A 3. példában megadott összetételű tenyészléből indulunk ki, amelynek L-triptofán-tartalma 7,3 g/1. Egy liter tenyészlét 180 ml Amberlit IR— 45 jelű polimerizált, gyengén bázikus anioncserélő gyantával töltött kolonnára vezetünk. A kolonnát 350 ml desztillát vízzel öblítjük, utána az L-triptofánt 4,0 liter vízzel eluáljuk. Mindkét művelet esetén a folyadékot alulról felfelé ára-A. kiadásért fölei: a Közgazdi S3. 32 212 Petőfi Nyomda,, Kecskemét moltatjuk óránként 1 v/v térfogatsebességgel. Az eluátumot 45 ml KU—2—8 jelű szulfokationcserélő gyantával töltött kolonnába vezetjük alulról felfelé. Fentről lefelé áramoltatjuk a fenti 5 térfogatsebességgel és 70 °C-on az eluáló folyadékot, amely 1,7% ammóniát tartalmazó 50%* os vizes etanol. Az eluátumot frakciókban fogjuk fel. Az első frakció 50 ml térfogatú, L-triptofán- 10 koncentrációja 0,55 g/1. Ezt a frakciót visszavezetjük az anioncserélő kolonnába. A második 50 ml-es frakcióban az L-triptofán kristályosodása megindult. A szuszpenzióhoz 1,2 ml ecetsavat adunk, és az 5,9 pH-jú elegyet 0 °C-ra lehűtjük. 15 A kivált kristályokat szűrjük, 10 ml etanollal mossuk, majd 50 °C~on szárítjuk. 3,8 g L-triptofánt kapunk, amelynek tisztasága 100%. Az ammonias eluátum harmadik frakcióját (100 ml) a második frakció anyalúgjával egyesítjük és 18 20 ml térfogatra bepároljuk. A kivált kristályokat etanollal mossuk, majd szárítjuk. 0,9 g 92%-os L-triptofánt kapunk, így az összhozam 100%-os anyagra átszámítva 4,63 g (63,5%). 25 Szabadalmi igénypont Eljárás L-triptofán elválasztására fermentlevekből vagy egyéb vizes oldatokból ioncserélő 30 gyantával végzett adszorbeáltatás, ezt követő deszorbeáltatás és a termék kristályosítása útján, azzal jellemezve, hogy az elválasztást két lépésben végezzük, és az első lépésben az L-triptofánt poliaromás mátrixú, gyengén bázi- 35 kus anioncserélőn adszorbeáltatjuk, majd vízzel vagy legfeljebb 0,5 n koncentrációjú vizes ásványi savval eluáljuk és a második lépésben az eluátumból az L-triptofánt erősen savas, H-formájú szulfokationcserélőn adszorbeáltatjuk, majd 40 30—50° I) etanolt tartalmazó vizes-alkoholos ammóniumhidroxid-oldattal 40—70 °C-on eluáljuk, az eluátum ammónia-tartalmát vizes savval, előnyösen ecetsavval semlegesítjük és a terméket kristályosítjuk. ;ági és Jogi Könyvkiadó igazgatója — Felelős vezető: Ablaka István igazgató 5
