180220. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-alkil-xantin származékok előállítására
180220 Agar 5|0 mg Talkum 5»0 mg. Farmakológia! vizsgálatok Akut toxicitási vizsgálatok egereken A vizsgálatokhoz 20 - 26 g súlya him NMRI egereket használunk, amelyeket előzőleg 6 órán át éheztetünk. A 0,5 n nátrium-hidroxid oldatban és 0,85 %-os nátrium-klorid oldatban /pH 10,6 - 12,1/ oldott vegyületeket a következőképp adjuk be: a/ intravénásán 0,1 ml/10 g adagban 0,3 ml/perc injektálási sebességgel: b/ szájon át 0,1 ml/10 g mennyiségben. Legalább hét dózisszintnél végezzük a vizsgálatokat, ahol a dózisok mértani haladvány szerint 1,2 faktorral növekednek. Mindenegyes dózist 5 állatnak adunk be. Az állatokon a beadást követő 14 nap alatt figyeljük a toxicitás jeleit. A vizsgálatok kiértékelése szempontjából csak azt vesszük figyelembe, hogy az állatok görcsökben multak-e ki vagy nem. Az akut toxicitási vizsgálatokban azt figyeltük meg, hogy számos xantin-vegyület idéz elő‘görcsöket. Ezt ismételten megfigyeltük teofillin esetében is. Semmiféle görcsokozó hatás jeleit /igy elhullott állatok görcsösen kinyújtott hátsólábait/ . nem észleltük viszont olyan állatoknál, amelyeknek a találmány szerinti vegyületeket adtuk be. A görcsöt kiváltó hatást továbbá még úgy is vizsgáltuk, hogy infúzióban lassan beadtuk a vegyületeket albino fehéregerek farokvénájába. Ebben a vizsgálatban meggyőződtünk arról, hogy az 1-helyzetben alkilcsoporttal szubsztituált xantin-származékok /teofillin és koffein/ állandóan előidéznek tónusos görcsöket, és a találmány szerinti vegyületeknél elhullás tónikus görcsök jelei nélkül fordult csak elő. /Lásd a II. táblázatot/. Izolált tengerimalac légcső Mindkét nembeli, 150 és 250 g közötti súlyú tengerimalacokat a fejre mért ütéssel megölünk és kivéreztetünk. A légcsövet kivesszükj és spirálisan felvágjuk egy vagy két preparátumra, A légcso-preparátumokat 37 °C-on tartott Krebs-oldatot tartalmazó szervfürdőbe helyezzük, amelyen karbogént /95% oxigén + 5 % széndioxid/ buborékoItatunk át. Az izometrikus tenziót, amely főként a körkörös légcsőizomban fennálló aktivitásban nyilvánul meg. erő-elmozdulás átalakító segítségével mérjük. A kezdeti tenziót 0,5 g-ra állítottuk be, ami körülbelül a kísérlet alatt tartott alaptenziónak felel meg. A relaxáló hatások kiértékelését akkor végezzük, amikor a preparátumok stabilan összehuzódtak már a fürdőhöz adott 0,1/ug/ml carbacholin hatására* Az EC^q értéket, azaz az 50 % maximális válasz kiváltásához szükséges xantin moláris koncentrációkat a log koncentráció - válasz vonalakból kaptuk, és ezt használtuk a teofillinnek a vizsgált vegyülethez viszonyított hatásának számítására. A vegyületek kimosása után a légcső visszanyeri alaptónusát, és legalább 15 percig hagyjuk stabilizálódni, mielőtt a következő vegyület kiértékelésit végezzük. Két teofillin-kiértékelés között határozzuk meg a vizsgált vegyület hatását, és EC^q értékét a teofillin előzetesen és utana 14
