180218. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás intravénásan beadható gamma-globulin előállítására

180213

szennyeződést tartalmaz, Igen nagy gondot kell arra fordítani, hogy minden lépésben eltávolitsuk valamennyi oldhatatlan anyagot. igy leöntsük az oldhatatlan anyagot, főképpen mielőtt a pH-ertekét az első és valamennyi további lépésben beállítanánk,. A 6 %-os etanolos oldat szürletét - mint az 1. példában - nátriumkloriddal 0,01 mólosra beállítjuk. A további műveleteket a 2. példában leírtak szerint végezzük. A termék tisztasága‘ÿ^gLobulinra legalább 98 %. a feloldáshoz használt, 5-10 mg albumint; tartalmazó oldat hozzáadása előtt, a 2. példa szerinti technikával mérve.

Ha a terméket oldat alakjában akarjuk előállítani és nem liofilizáljuk, akkor az 1. példa szerinti feloldó-oldatot haszonéi juk, de a mannitot elhagyjuk.

4. példa

Placentáris eredetű immunglobulin-G-pasztát vagy II frakciót vagy száritott II frakció-port használhatunk intravénás beadásra alkalmasf nagytisztaságu termék előállítására. Az eljárást a következőképpen végezzük:

1. A pasztát vagy a port vizben szuszpendáljuk, úgy, hogy a koncentrációja 1 % legyen /0,3-5 % tartomány/, és a szuszpenzióhoz l°-on /0-5° tartomány/ 2 % polietilénglikol 4000-et /PEG 2000, 6000, 8000 és 12.000 átlagos molekulasúlyu ugyancsak használható/ és 0,2 % hőkezelt humán-albumint adunk. A tetején lévő oldhatatlan anyagot leöntéssei eltávolítjuk.

2. A pH-értékét ecetsavval, sósavval, citromsavval vagy más savval 5»l-re /4,9-6,0 tartomány/ beállítjuk. A csapadékot 1 óra múlva í°-on szűréssel vagy centrifugálássál eltávolítjuk;

3. A polietilénglikol-4000 koncentrációját ezután 4 %-ra növeljük, a felül lévő anyagot ismét eltávolítjuk, és- később á képződött csapadékot szűréssel vagy centrifugálással ugyancsak eltávolítjuk.

4. Az oldathoz 6 % etanol-koncentrációig /2-12 % tartó**-' mány/ r6°-on /+2 - -15° tartomány/ lassan etanolt adagolunk;

5. A csapadékot és a szuszpenzió felszínén lévő ahyagot eltávolítjuk, mint az előző lépésekben.

6’. Ezután 0,01 n koncentráció eléréséig-/0,0025-0,15 a tartomány/ nátriumkloridot adunk az oldathoz* • -7« A pH értékét 8,0-ra növeljük /7-8 pH-tartomány/.

8*. -6°-on lassan etanolt adunk az oldathoz, amig az etanol-koncéntráció 25 % lesz.

9; A csapadékot centrifugálássál elkülönítjük.

10. A csapadékot a paszta ismert súlyának és a feloldásra szolgáló oldat ismert térfogatának meghatározása alapján 5-6 % végső koncentrációra feloldjuk. A feloldásra^szolgáló oldat összetétele: 6,5 % /0,3-5 % tartomány/ hőkezelt humán albumin, nátriumacetát /0,0125 vagy 0,025 n/, glicin 0,15 n, pH a 5»1 /ecetsavval, beállítva/. A feloldott paszta pH értékét lúggal, például 1 %—os nátrium- vagy káliumhidroxiddal; vagy trisz/ /hidroximetil/-aminometánnal 6,6-ra beállítjuk;

11. Ha az oldatot Hofilizálni kell, akkor 2 % /1-3 % tartomány/ mannitot adunk hozzá.

12. Az igy kapott oldat, illetve a liofilizált por nem tartalmaz ismert szennyezéseket, és a Mayer-féle "Zwei-Einheiten-7