179936. lajstromszámú szabadalom • Leukociták testfolyadékokban való kimutatására szolgáló diagnosztikai eszköz és eljárás ehhez megfelelő kromogének előállítására
11 179936 12 savanhidridet és a keletkezett ecetsavat vákuumban eldesztilláljuk, a desztillációs maradékhoz 50 ml metanolt adunk, és szárazra pároljuk. A maradékot 15 ml toluolból átkristályosítjuk, így 2,0 g (67%) tiazol-2-azo-4'-(l'-acetoxi-naftalin)-t kapunk világosbarna kristályos anyagként, amelynek olvadáspontja 137 °C. A megfelelően szubsztituált azoszínezékeket ecetsavanhidriddel reagáltatva hasonló módon nyerjük a következő vegyületeket. 6.1. Tiazol-2-azo-2'-(l '-acetoxi-4'-metoxi-benzol). Narancssárga, kristályos anyag. Olvadáspont: 111—113 °C. 6.2. Tiazol-2-azo-l '-(2',4'-diacetoxi-benzol). Okkerszínű kristályok. Olvadáspont: 101 CC. 6.3. Tiazol-2-azo-l '-(2'-acetoxi-naftalin). Sötétszínű, amorf por. Vékonyrétegkromatográfiás adatok: réteg: Fertigplatte Kieselgel, futtatószer: n-butanol : ecetsav : víz=2 : 1: 1, detektálás: ultraibolya fény, saját szín, Rf-érték: 0,50. 6.4. TiazoI-2-azo-2'-(l '-acetoxi-naftalin). Barna, kristályos anyag. Olvadáspont: 122 °C. 6.5. Piridin-2-azo-l '-(2'-acetoxi-naftalin). Sötétszínű, amorf por. Vékonyrétegkromatográfiás adatok: réteg: Fertigplatte Kieselgel, futtatószer: n-butanol : ecetsav : víz=2 : 1: 1, detektálás: ultraibolya fény, saját szín. Rf-érték: 0,72. 6.6. 4-Nitro-benzol-azo-4'-(l '-acetoxi-naftalin). Barnás kristályos anyag. Olvadáspont: 160—162 °C. 6.7. 2,4-Dinitro-benzol-azo-4'-(l '-acetoxi-benzol). Vörösesbarna kristályos anyag. Olvadáspont : 132 °C. 6.8. 2,4-Dinitro-benzol-azo-4'-(l-acetoxi-naftalin). Okkerszínű kristályos anyag. Olvadáspont: 173 °C. 6.9. 2-Metoxi-4-nitro-benzol-azo-4'-(l '-acetoxi-benzol). Narancssárga színű kristályos anyag. Olvadáspont : 135 °C. 6.10. 2-Metoxi-4-nitro-benzol-azo-4'-(l'-acetoxi-naftalin). Narancssárga színű kristályos anyag. Olvadáspont : 174—178 °C. 7. példa Piridin-2-azo-l'-(2'-benzoiloxi-naftalin). 2,50 g (0,01 mól) l-(2'-piridilazo)-2-naftolt feloldunk 50 ml vízmentes piridinben, 5,5 ml (0,05 mól) benzoil-kloriddal elegyítjük, és 1 órán át kevertetjük 70 °C-on nedvesség kizárása mellett. Utána lehűtjük szobahőmérsékletre, hozzáadunk 3 ml metanolt, és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 100 ml metanolból átkristályosítjuk. így 2,54 g (72%) piridin-2-azo-l'-(2'-benzoiloxi-naftalin)-t kapunk vörös kristályos anyagként, amelynek olvadáspontja 153 °C. Hasonló módon keletkezik 2,4-dinitro-benzol-azo-2'-[1 '-hidroxi-3',6'-di(nátrium-szulfonáto)-naftalin] és benzoil-klorid reagáltatásával : 7.1. 2,4-Dinitro-benzol-azo-2'-[l '-benzoiloxi-3',6'-di-(nátrium-szulfonáto)-nafta!in]. Világosbarna kristályok; olvadáspont >250 °C. Vékonyrétegkromatográfiás adatok: réteg: Fertigplatte Kieselgel, futtatószer : izopropanol : butil-acetát : víz= =5:3:2, detektálás: ultraibolya fény, saját szín, Rf-érték: 0,43. 8. példa Tiazol-2-azo-l'-{2'-[N-(benziloxi-karbonil)-L-aIaniloxij-naftalin}. 1. oldat : A savklorid egylépéses módszer szerinti előállítása céljából 6,70 g (0,03 mól) N-(benziloxi-karbonil)-L-alanint feloldunk 50 ml vízmentes dimetil-formamidban, és lehűtjük —30 °C-ra. Utána keverés és hűtés közben hozzápipettázunk 2,4 ml (0,033 mól) tionil-kloridot, és a reakcióelegyet nedvesség kizárása mellett hűtőfürdőben —30 °C-on hagyjuk állni. 2. oldat : 3,83 g (0,015 mól) l-(2'-tiazolilazo)-2-naftolt feloldunk 75 ml vízmentes dimetil-formamidban, és —30C- ° ra hűtjük. Reakció: A 2. oldatot az 1. oldathoz öntjük, hozzáadunk sósavmegkötőként 4,8 ml (0,034 mól) trietil-amint, és hűtés nélkül 6 órát kevertetjük, miközben a hőmérsékletet 1,5 óra alatt hagyjuk 20 °C-ra emelkedni. Utána a reakcióelegyet ismét — 30 °C-ra hűtjük, és ugyanilyen menynyiségű frissen készített savklorid-oldatot (1. oldat), valamint 4,8 ml trietil-amint adunk hozzá. A hőmérsékletet 1,5 óra alatt hagyjuk ismét 20 °C-ra emelkedni, és utána a reakcióelegyet 18 órán át szobahőmérsékleten reagáltatjuk. A reakciót célszerűen kromatográfiásan követjük, és a szükséges, fölös mennyiségű savklorid és trietil-amin hozzáadását ennek megfelelően végezzük. Feldolgozás : A reakcióelegyet vákuumban szárazra pároljuk (legfeljebb 50 °C fürdőhőmérsékleten). A maradékot 100 ml etil-acetáttal oldjuk, és egymásután kétszer 30 ml 1 n citromsavoldattal, 20 ml vízzel, 50 ml 5—10%-os nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és kétszer 25 ml vízzel mossuk. Az etil-acetátos fázist nátrium-szulfáton való szárítás után vákuumban bepároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagélen toluol : dioxán (9: 1) eleggyel eluálva. Az oldószerelegy vákuumban történt eldesztillálása és a maradék etil-acetáttal végzett eldörzsölése után 4,9 g (70,5%) tiazol-2- -azo-1 '-{2'-[N-(benziloxi-karbonil)-L-alaniloxi]-naftalint} kapunk sárga, kristályos anyagként, amelynek olvadáspontja 162 °C. Hasonló módon kapjuk a megfelelően szubsztituált azoszínezékekből és N-védett aminosavakból, illetve peptidekből a következő vegyületeket. 8.1. Tiazol-2-azo-2 '-{1 '-[N-(benziloxi-karbonil)-L-aIaniloxi]-4 '-metoxi-benzol}. Narancssárga kristályok, olvadáspont 148—150 °C. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
