179744. lajstromszámú szabadalom • Eljárás félszintetikus 4"-amino-oleandomicin-származékok előállítására
9 179744 10 In vivo aktivitásuk sokkal korlátozottabb a fogékony organizmusok tekintetében. Ezt az aktivitást a szokásos módon határozzuk meg, azaz oly módon, hogy körülbelül azonos súlyú egereket a vizsgálandó organizmussal inokulálunk, majd orálisan vagy szubkután a vizsgálandó vegyülettel kezeljük őket. A gyakorlatban például úgy járunk el, hogy 10—10 egeret az LD100-érték körülbelül 1—10-szeresét tartalmazó, megfelelően hígított kultúrákkal inokulálunk intraperitoneálisan (az LD100- érték az a legalacsonyabb mikroorganizmuskoncentráció, amely a 100%-os pusztítás eléréséhez szükséges). Egyidejűleg kontroll vizsgálatokat is végzünk, amelyekben az egerek ellenőrzésképpen alacsonyabb hígítású inokulumokat kapnak, hogy ellenőrizzük a vizsgálandó organizmus virulenciájának lehetséges változását. A vizsgálandó vegyületet 0,5 órával az inokuláció után adjuk be, és 4, 24 és 48 óra múlva megismételjük az adagolást. 4 nappal az utolsó kezelés után megvizsgáljuk a túlélő egereket, és feljegyezzük a túlélők számát. Ha a találmány szerinti eljárással előállítható új vegyületeket tartalmazó készítményeket in vivo alkalmazzuk, az adagolás orális vagy parenterális lehet, például szubkután vagy intramuszkuláris injektálás, a hatóanyag napi mennyisége körülbelül 1 — körülbelül 200 mg/testsúlykilogramm. Az előnyös napi adag körülbelül 5 — körülbelül 100 mg/testsúlykilogramm, különösen körülbelül 5 — körülbelül 50 mg/testsúlykilogramm. A parenterális injektálás céljára alkalmas hordozóanyagok lehetnek vizes hordozóanyagok, így víz, izotóniás nátriumklorid-oldat, izotóniás dextróz-oldat, Ringer-féle oldat, vagy pedig nemvizes hordozóanyagok, így növényi eredetű olajok (gyapotmagolaj, földimogyoróolaj, szezámolaj), dimetilszulfoxid vagy egyéb olyan nemvizes hordozóanyag, amely nem befolyásolja a készítmény terápiás hatékonyságát és az alkalmazott térfogatban vagy arányban nem toxikus (glicerin, propilénglikol, szorbit). Ezen túlmenően előnyösen állíthatók elő olyan készítmények is, amelyek közvetlenül az adagolást megelőzően oldhatók fel. Az ilyen készítmények magukban foglalhatnak folyékony hordozóanyagokat, például propilénglikolt, dietiikarbonátot, glicerint, szorbitot stb., puffereket, helyi érzéstelenítőket és kívánt farmakológiái tulajdonságokat nyújtó szervetlen sókat. A találmány szerinti eljárással előállítható vegyületeket számos gyógyászatilag elfogadható közömbös hordozóanyaggal is kombinálhatjuk, így szilárd hígítószerekkel, vizes hordozóanyagokkal, nem mérgező szerves oldószerekkel, és kapszulákat, tablettákat, bemetszett tablettákat, száraz keverékeket, szuszpenziókat, oldatokat, elixíreket vagy parenterális oldatokat vagy szuszpenziókat készíthetünk belőlük. A találmány szerinti eljárással előállítható vegyületeket különböző adagolási egységek alakjában alkalmazhatjuk, ahol a hatóanyag koncentrációja a készítmény összsúlyára vonatkoztatva körülbelül 0,5% és körülbelül 90% közötti. A találmány szerinti eljárás foganatosítására az oltalmi kör korlátozása nélkül az alábbi kiviteli példákat adjuk meg. 1. példa 4"-Dezoxi-4"-oxo-oleandomicin 1,0 g 2'-acetil-4"-dezoxi-4"-oxo-oleandomicin 20 ml metanollal készített oldatát éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután az oldatot vákuumban betöményítjük, így a kívánt terméket fehér színű, habszerü anyag alakjában kapjuk (937 mg). MMR-spektrum (8, CDCI3): 5,60 (1H) m, 3,50 (3H) s, 2,85 (2H) m és 2,26 (6H) s. 2. példa 11,2'-Diacetil-4"-dezoxi-4"-oxo-oleandomicin 4,0 ml, jégfürdőben 0 °C-ra hűtött ecetsavanhidridhez nitrogén atmoszférában 727 mg 2'-acetil-4"-dezoxi-4"-oxo-oleandomicint adunk. 5 perc múlva 158 ml piridint adunk az elegyhez, és az opálos szuszpenziót éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a keletkező oldatot etilacetáttal rétegezett vízbe öntjük, és pH-ját szilárd nátriumhidrogénkarbonát beadagolásával 7,2-re, majd n nátriumhidroxid-oldattal 9,5-re állítjuk. A szerves fázist elválasztjuk, egymást követően vízzel és telített vizes nátriumklorid-oldattal mossuk, majd nátriumszulfát felett szárítjuk. Az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítva 588 mg kívánt terméket kapunk. MMR-spektrum (8, CDC13): 3,48 (3H) s, 2,63 (2H) m, 2,26 (6H) s és 2,06 (6H) s. 3. példa 1 l-Acetil-4"-dezoxi-4"-oxo-oleandomicin 4,0 g ll,2'-diacetil-4"-dezoxi-4"-oxo-oleandomicin 75 ml metanollal készített oldatát éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a reakcióelegyet csökkentett nyomáson betöményítjük, így habszerű terméket kapunk. A maradék dietiléteres oldatát hexánnal kezeljük, így 2,6 g terméket kapunk fehér színű szilárd anyag alakjában, amelynek olvadáspontja 112—117 3C. MMR-spektrum (8, CDC1,): 3,43 (3H) s, 2,60 (2H) m, 2,23 (6H) s és 2,01 (3H) s. 4. példa 8,8a-Dezoxi-8,8a-dihidro-4"-dezoxi-4''-oxo-oleandomicin 2,0 g 2'-acetil-8,8a-dezoxi-8,8a-dehidro-4"-dezoxi-4"-oxo-oleandomicin 100 ml metanollal készített szuszpenzióját 20 órán át keverjük szobahőmérsékleten. Ezután a reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, így 1,8 g kívánt terméket kapunk fehér színű habszerű anyag alakjában. MMR-spektrum (8, CDC13): 5,30 (1H), 3,51 (3H) s és 2,26 (6H) s. 5. példa ll-Acetil-8,8a-dezoxi-8,8a-dihidro-4"-dezoxi-4"-oxo-oleandomicin 11,5 g ll,2'-diacetil-8,8a-dezoxi-8,8a-dihidro-4"-dezoxi-4'-oxo-oleandomicin 100 ml metanollal készített oldatát éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 50 55 5
