179732. lajstromszámú szabadalom • L-lizint termelő törzsek tenyésztésére szolgáló táplalaj
179732 ' i :- 3 2,0—18,0 súly% szén-forrás, 0,5—12,0 súly% szapropél-hidroüzátum, 0,5—4,0 súly% nitrogén-forrás, 0,5—5,0 súly/o kréta, 0,1—0,4 súly% foszfor-sók és a 100 súly/o-hoz szükséges mennyiségű víz. A találmányunk szerinti táptalajt az alábbiak szerint állítjuk elő: Először a szapropél-hidroüzátumot készítjük el, mely aminosavakat, vitaminokat, mikroelemeket és más 10 biológiailag hatásos anyagokat tartalmaz. A szapropélt, mely a víztartályokban iszaplerakódást okoz, 4 n kénsavval vagy sósavval 3 órán át 130—132C°-on kezeljük, majd a reagálatlan savat ammóniával semlegesítjük és a kapott szapropél-hidroüzátumot felhasználjuk a táp- 15 talaj előállítására. A táptalaj előállítására szolgáló tartályba betöltjük a szükséges vízmennyiség felét, majd keverés közben 2— 18 súly% szén-forrást adunk hozzá. Ha szén-forrásként szacharózt vagy melaszt (szacharózra vonatkoztatva) 20 használunk, előnyösen 8—18 súty%-ot adunk a tartályba. Ha szén-forrásként ecetsavból és ammónium-acetátból vagy etilalkoholból álló elegyet használunk, előnyösen 2,0—3,5 súly%-ot teszünk a tartályba. Ezután 0,5 -12,0 súly% szapropél-hidrolizátumot, 0,5—4,0 súly% nitrogén-forrást, például ammónium-szulfátot, ammónium-kloridot, karbamidot, 0,1—0,4 súly% foszfor-sót adunk hozzá és összekeverjük. Hozzáadjuk a maradék vizet és az elegyet mechanikusan újra megkeverjük. Az L-lizin fermentációs folyamatának stabili- 30 zálására a fent ismertetett eljárással elkészített táptalajhoz krétát adunk. Ebben az esetben a táptalaj összetétele súly%-ban az alábbi : szén-forrás 2,0—18,0 szapropél-hidrolizátum 0,5—12,0 nitrogén-forrás 0,5—4,0 kréta 0,5—5,0 foszfor-sók 0,1—0,4 víz maradék A táptalaj valamennyi összetevőjének összekeverése után a táptalajt ismert eljárással sterilizáljuk. Az L-lizint termelő törzs tenyésztésére szolgáló, találmányunk szerinti eljárással készült táptalaj növekedést serkentő anyagként szapropél-hidrolizátumot tartalmaz, mely 45 könnyen hozzáférhető, meglehetősen értéktelen, természetes eredetű nyersanyagból, a szapropélből állítható elő (iszap-lerakódás a víztartályokban) technológiailag egyszerű eljárással. A szapropél-hidrolizátum ezenkívül jelentős, mennyiségű nitrogén-sókat is tartalmaz, melyek 50 a táptalaj nitrogén-forrásául szolgálnak. Eljárásunkat példákkal illusztráljuk anélkül azonban, hogy találmányunkat e példákra korlátoznánk. 1. példa Először a szapropél-hidrolizátumot készítjük el. Mechanikus keverővei ellátott, saválló tartályba 4 m3 4 n kénsavat öntünk, 80 C'-ra melegítjük és állandó keverés 60 mellett 11 szapropélt (szárazanyag-tartalmára vonatkoztatva) adunk hozzá. Ezután az elegyet 130—132 C°-ra melegítjük és 3 órán át ezen a hőmérsékleten állni hagyjuk. A kapott szapropél-hidrolizátumot lehűtjük és ammóniával semlegesítjük. 4 A táptalaj előállítására szolgáló tartályba betöltjük a szükséges vízmennyiség felét, majd keverés közben hozzáadunk 12 súlyzó szacharózt, 12 sú!y% szapropél-hidroüzátumot, 2 súly% ammónium-kloridot, 0,4 súly% 5 kálium-hidrogén-foszfátot. Összekeverés után hozzátöltjük a maradék mennyiségű vizet. Az így kapott táptalajon tenyésztjük azT-lízínt termelő Brevibaktérium sp. 22 X törzsét, mely homoszerint nem termel (deponálási szám 192, Lett Szovjet Szocialista Köztársaság, Tudományos Akadémia „August Kirchenstein” Mikrobiológiai Intézetéhez tartozó Mikroorganizmuskultúrák Múzeuma). 30 + 1 C°-on, 72 órán át tartó fermentáció után a fermentlé L-üzin-koncentrációja 40,0 g/1. 2. példa A táptalajt az 1. példában leírtak szerint készítjük el, azzal a különbséggel, hogy szacharóz helyett 3 súly% melaszt (szacharózra vonatkoztatva) használunk. A kapott táptalajon L-lizint termelő Brevibaktérium sp. 22 X törzset tenyésztünk, mely homoszerint nem termel. 30 + 1 C°-on, 24 órán át tartó fermentáció után a 25 fermentlé L-lizin-koncentrációja 9,0 g/1. 3. példa A szapropél-hidrolizátumot az 1. példában leírtak szerint készítjük el. A táptalaj előállítására szolgáló tartályba beöntjük a Szükséges vízmennyiség felét. A tartályba keverés közben 14 sú!y% melaszt (szacharózra vonatkoztatva), 3 sú!y% szapropél-hidrolizátumot, 1,5 súly% ammó- 35 nium-szulfátot, 0,1 súly% ammónium-hidrogén-foszfátot és 1 súly% krétát adunk. Ezek összekeverése után hozzáadjuk a maradék vízmennyiséget. Az így kapott táptalajon L-lizint termelő Micrococcus glutamicus T—3 törzset tenyésztünk, mely homoszerint, izo-leucint 40 és valint nem termel (deponálási szám B—39, Szovjet Genetikai Kutató Intézet Központi Ipari Múzeuma). 30+1 C°-on 72 óráig tartó fermentáció után a fermentlé L-lizin koncentrációja 42,0 g/1. 4. példa A szapropél-hidrolizátumot az 1. példában leírtak alapján készítjük el. A táptalaj előállítására szolgáló tartályba beöntjük a szükséges vízmennyiség felét, majd 3,5 súly% 1—4 mólarányú ecetsavból és ammónium-acetátból álló elegyet, 8 súly% szapropél-hidrolizátumot, 0,5 súiy% ammónium-kloridot, 0,2 súly% kálium-hidrogén-foszfátot adunk hozzá. Összekeverés után hozzáadjuk a maradék 55 vízmennyiséget. Az így kapott táptalajon L-lizint termelő Micrococcus glutamicus 95 törzset tenyésztünk, mely homoszerint nem termel. (Deponálási száma B— 38, Szovjet Genetikai Kutató Intézet Központi Ipari Múzeuma.) 30 ± 1 C'-on, 24 óráig tartó fermentáció után a fermentlé L-lizin-koncentrációja 7 g/1. 5. példa A szapropél-hidrolizátumot az 1. példában leírtak 65 szerint készítjük el. 2
