179665. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új ACTH-fragmensek és az azokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
11 179665 12 d) Boc-Met-Lys-(Boc)-His—N2H3: a módszer megfelel a 14. d) pontban közölt módszernek. Rf: Am : iPro : Wa 100 : 40 : 50 arányú elegvében 0,42 szilíciumdioxidon. A következő vegyületeket analóg módon állítjuk elő: 20. Dezamino-IVIet-Ala-Ala—N2H3 Rf: Am : iPro : Wa 10:4:5 arányú elegvében 0,34 szilíciumdioxidon 21. Boc-Leu-Glu(OtBu)-His—N2H3 Rf: Am : iPro : Wa 10:4:5 arányú elegyében 0,31 szilíciumdioxidon 22. Boc-Met-Ser-His—N2H3 Rf: Am : iPro : Wa 10:4:5 arányú elegvében 0,28 szilíciumdioxidon 23. Boc-Ala-Ala—N2H3 Rf: Am : iPro : Wa 10:4:5 arányú elegyében 0,47 szilíciumdioxidon B) H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-Gly—OH és analógjai előállítás;. 101. H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-Gly—OH a) Z-Phe-D-Lys(Boc)-OMe : 29,9 g Z-Phe—OH és 14,8 g HOBt elegyét 200 ml DMF-ben oldjuk. Lehűtjük — 22 cC-ra es a következőket adjuk még hozzá: 1. 32,6 g H-D-Lys(Boc)OMe. HCl 210 ml DMF-fel és 1 mólekvivalens TAA-val képezett elegyét és 2. 22,7 g DCCI 100 ml DMF-fel képezett oldatát. Az egész elegyet mechanikus keverővei keverjük 15 percig —22 cC-on, 2 óráig 0 °C-on és 16 óráig szobahőmérsékleten. Az elegyet lehűtjük —20 °C-ra, majd a keletkezett DCHU-t leszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot etilacetátban oldjuk és vízzel, 5%-os citromsav oldattal és 5%-os nátrium-hidrogénkarbonát oldattal, majd ismét vízzel mossuk. Az oldatot ezt követőleg szárazra pároljuk. A maradékot diizopropii-éter és éter 1 : 5 arányú Hegyéből átkristályosítjuk. Termelés: 51.6 g; olvadáspont: 122—123 °C. Rf: To : EtOH 8 : 2 arányú elegyében 0,60 szilíciumdioxidon. b) Z-Phe-D-Lys(Boc)—OH: 13,7 g a) pont szerint előállított Z-Phe-D-Lys(Boc)-OMe-t 180 ml dioxán és víz 9 : 1 arányú elegyében oldunk és 15 ml 2 n nátrium-hidroxid hozzáadása után a reakcióelegyet 2 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük és a pH-t In sósavval 7-re állítjuk. A reakcióelegy térfogatát 50 ml-re csökkentjük bepárlással (dioxán-mentesre) és 250 ml etilacetátot adunk hozzá. Az elegyet vízzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. A nátrium-szulfátot leszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk, majd a maradékot éter és petroléter 1 : 2 arányú elegyéből kristályosítjuk. Termelés: 11,3 g ; olvadáspont: 72—15 °C. Rf: To : EtOH 8 : 2 arányú elegyében 0,12 szilíciumdioxidon. Rf: Am : Py : Wa 5:3:2 arányú elegyében 0,69 szilíciumdioxidon. c) Boc-Phe-Gly-OBzl: 1 mólekvivalens NEM-et 12.6 g H-Gly-OBzl.HC1 100 ml DMF-fel készített oldatához adjuk, majd 25,5 g Boc-Phe-ONP 100 ml DMF-fel készített oldatát adjuk hozzá. Éjjel szobahőmérsékleten keverjük az elegyet, majd szárazra pároljuk. A maradékot 300 ml etilacetát és víz 5 : 1 arányú elegyében oldjuk és a maradék oldatot vízzel mossuk. Vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk és a szűrlet térfogatát bepárlással 100 ml-re csökkentjük, 50 ml petrolétert és 250 mi száraz étert adunk egymás után hozza. Termelés: 16,7 g; olvadáspont: 126—127 CC. Rf: To : EtOH 8 : 2 arányú elegyében 0,56 szilíciumdioxidon. d) H-Phe-Gly-OBzí. HC1 : 9,25 g Boc-Phe-Gly-OBzl-t 120 ml metilénkloridban oldunk és sósavgázt vezetünk keverés közben az oldatba, miközben 1 óráig jég és víz elegyével hűljük. A sósavgáz bevezetését 1 óra múlva megszüntetjük és a reakcióelegyet szárazra pároljuk. Termelés: 6,98 g habszerű termék. Rf: To : EtOH 8 : 2 arányú elegyében 0,33 szilíciumdioxidon. e) Z-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-Giy-OBzl: a módszer analóg az a 1 pontban leírt eljárással. Felhasznált reagensek: 9,25 g Z-Phe-D-Lys(Boc)—OH [bí pont szerint állítjuk elő], 2,92 g HOBt, 6,98 g H-Phe-Gly-OBzl. HCl és 4,12 g DCCI. Etilacetát és petroléter elegyéből kristályosítjuk. Termelés: 12,0 g; olvadáspont: 157—159 °C. f) H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-Gly—OH: 4,11 g Z-Phe-D-Lys(Boe)-Phe-Gly-OBzl-t 75 ml DMF-ben oldunk. 10%-os palládium-csontszén hozzáadása után azelegybe 3 óráig hidrogéngázt engedünk. A katalizátort hyflo-azbeszt rétegen keresztül leszűrjük és a szürfetet szárazra pároljuk. Termelés: 2,9 g. Rf: Bu : Py : Ac : Wa 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú elegyében 0,46 szilíciumdioxidon. A következő peptideket állítjuk elő az előző 101. példában leírt módon: 102. H-Trp-D-Lys(Boc)-Phe-Giy—OH Rf: Bu : Py : Ac : Wa 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú elegyében 0,52 szilíciumdioxidon 103. H-Leu-D-Lys(Boc)-Phe-Gly—OH Rf: Bu : Py : Ac : Wa 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú elegyében 0,40 szilíciumdioxidon 104. H-Val-D-Lys(Boc)-Phe-Gly—OH Rf: Bu : Py : Ac : Wa 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú elegyében 0,42 szilíciumdioxidon 105. H-AIa-D-Lys(Boc)-Phe-Gly—OH Rf: Bu : Py : Ac : Wa 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú elegyében 0,37 szilíciumdioxidon 106. H-Tyr-D-Lys(Boc)-Phe-Gly—OH Rf: Bu : Py : Ac : Wa 4 : 0,75 : 0,25 : l arányú elegyében 0,48 szilíciumdioxidon CJ H-Lys(Boc)-Pro-Val-Gly-Lys(Boc)-Lys(Boc)—OH és analógjai előállítása 201. H-Lys(Boc)-Pro-Val-Gly-Lys(Boc)-Lys(Boc)-0 Me (11—16 ACTH), 1 512 342 számú francia szabadalmi leírás 202. H-Lys(Boc)-Pro-Val-Gly-Lys(Boc)-Lys(Boc)—NH2 (11—16 ACTH-amid), 1 512 342 számú francia szabadalmi leírás 203. H-Lys(Boc)-Pro-Va1-G1y-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Arg-Arg-Pro—NH2 ( 11—19 ACTH-amid), [a J. A. C. S. 87, 2707 (1965)ben leírt módon] 204. H-Lys(Boc)-Pro-Val-Gly-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Arg-Arg-Pro-Val-Lys(Boc)-Val-Tyr-Pro-OtBu Helv. 44, 1136 (1961) 205. H-D-Lys(Boc)-Pro-Val-Gly-Lys(Boc)-Lys(Boc)—NH2 a) H-Pro-Val-Gly-Lys(Boc)-Lys(Boc)—NH2 : 8,61 g Z-Pro-Val-Gly-Lys(Boc)-Lys(Boc)—NH2-t 110 ml metanolban oldunk. 10%-os palládium-csontszén katalizátort adunk hozzá, majd 3 óráig hidrogéngázt vezetünk 5 10 Ï5 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
