179657. lajstromszámú szabadalom • Eljárás eszterasztin és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
9. példa A 8. példában kapott nyers eszterasztin port a következő módon tisztítjuk. 128,2 g nyers port 500 ml kloroformban oldottunk és a kapott oldatot 1,5 kg szilikagélt (Wako-gel C—100) tartalmazó oszlopon engedtük keresztül az eszterasztin adszorpciója céljából. A szilikagél oszlopot 10 liter kloroformmal, majd 10 liter 100: 1 térfogatarányú kloroform-metanol elegyével mostuk, majd kloroform és metanol 80: 1 térfogatarányú elegyével eluáltuk. 2500 ml aktív frakciókat összeöntöttük és csökkentett nyomáson szárazra pároltuk és ily módon 4,83 g barna színű nyers port kaptunk, amelynek az ID50 értéke 0,002 mcg/ml. A nyers port 200 ml metanolban vettük fel és a kapott oldatot 2 liter metanollal duzzasztott oszlopon engedtük keresztül. Az oszlopot 4 liter metanollal eluáltuk. Az eluátum hatásos frakcióit összeöntöttük és csökkentett nyomáson szárazra pároltuk és így 656 mg világos sárga színű port kaptunk (ID50= =0,0004 mcg/ml). A port 5 ml etilacetáttal vettük fel és a kapott oldatot 250 g szilikagél oszlopon engedtük keresztül (Wako-gel C—300) az eszterasztin adszorpciója céljából. A szilikagél oszlopot etilacetáttal hívtuk elő és az eluátum aktív frakcióit (1000 ml) összeöntöttük és csökkentett nyomáson szárazra pároltuk. Ily módon 351 mg színtelen eszterasztin port kaptunk, amelynek ID50 értéke 0,0002 mcg/ml (észteráz). 17 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az (I) képletű eszterasztin előállítására, azzal jellemezve, hogy a Streptomyces genus eszter-5 asztin termelő törzsét, előnyösen Streptomyces MD4— Cl-t, (FERM—P 3723, ATCC 31 336) aerob körülmények között alkalmas asszimilálható szén- és nitrogénforrást tartalmazó táptalajban tenyésztjük, majd a táptalajban felhalmozódott eszterasztint a tenyészet-10 bői izoláljuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítást módja, azzal jellemezve, hogy a Streptomyces MD4—Cl törzset 27 °C—37 °C-on, előnyösen 25—35 °C-on, aerob körülmények között tenyésztjük. 15 3. A 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a Streptomyces MD4—Cl törzset 25—35 °C-on 2—4 napig tenyésztjük aerob körülmények között. 4. Eljárás élő állatok és emberek immunválaszainak 20 csökkentésére szolgáló immúnszupresszív gyógyszer előállítására, azzal jellemezve, hogy eszterasztin hatásos mennyiségét gyógyászatiig elfogadható hordozóval összekeverjük, és gyógyszerré készítjük ki. 25 5. A 4. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az eszterasztint 1: 1— 1: 100 súlyarányban keverjük össze a gyógyászatiig elfogadható hordozóval. 18 179657 4 db ábra A kiadásért felel : a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 83.580,66-4 Alföldi Nyomda, Debrecen — Felelős vezető: Benkő István igazgató
