179584. lajstromszámú szabadalom • Eljárás lipogenézist gátló 2,3-dihidro-1,4-benzoxantinek előállítására
7 179584 8 legítjük és ezen a hőmérsékleten 2 óráig melegítjük. Az elegyet leszűrjük és a szűrletet vízzel mossuk, magnézium-szulfát felett szárítjuk, az oldószert lepároljuk és a maradékot 20 ml metilénkloriddal mossuk, majd 30 ml éterrel. Sárga színű szilárd terméket kapunk, melyet etanol és kloroform 40 : 100 térfogatarányú elegyéből átkristályosítunk. A termék op-ja 200- -202 °C. 8. példa 2.3-Dihidro-7-metil-N-(2-propcnil)-l ,4- -bcnzoxatiin-2-karboxamid A cím szerinti vegyületet szilárd formában kapjuk (op.: 50 °C) 2-amino-5-metilfenolból az 1-3. példa szerinti eljárással, a prekúrzort Djerassi és társai fenti módszerével állítottuk elő. 9. példa 2,3-Dihidro-6-metoxi-N-(2-propenil)-1.4--benzo.xatiin-2-karboxamid 4-Metoxi-2-nitrofenolt állítunk elő 2-nitrometoxi-anilin arzéntrioxiddal és nátrium-hidroxiddal vízben történő kezelésével. 4-Metoxi-2-aminofenolt állítunk elő a 4-metoxi-2- nitrofenol és ammónium-hidroxid vizes oldatának nátrium-ditionittal történő kezelésével. A 4-metoxi-2-aminofenolt 4-metoxi-2-merkaptofenollá alakítjuk Djerassi és társai módszere szerint, majd .az 1-3. példa szerint a cím szerinti termékké alakítjuk, amely 73-75 °C-on olvadó szilárd termék. 10., 11. és 12. példa A lipogenézis gátlás kimutatására szolgáló teszt. A találmány szerint előállított vegyületek hatékonyságát úgy vizsgáltuk, hogy radioaktív glükózt és a teszt vegyületet tartalmazó folyadékba mentünk sertészsír szövetet egy bizonyos időtartamig, majd a kezelt szövetből a lipidet izoláljuk és szcintillációs számlálón meghatározzuk a radioaktív szén felvételt. A kísérleteket azért végezzük sertészsír szöveten, mert sertésben az adipóz szöveten megy végbe elsődlegesen a lipogenézis. A következőkben részletesebben leírjuk a kísérlet lefolytatásának körülményeit. 150 mg sertészsír szövet szeleteket 37 °C-on inkubálunk 2 óráig oly módon, hogy 60 mikrontól glükózt, 0,5 mikro-Curie glükóz-U14-C-t, 300 mikroegység inzulint és 5% dimetilszulfoxidot tartalmazó 0,5 N kalcium-ion koncentrációjú, 3 ml Krebs-Ringer hidrogénkarbonát oldatban rázzuk. A teszt vegyületeket oldat vagy szuszpenzió formájában dimetilszulfoxidban adagoljuk és az inkubációs elegyben 100 mikrogramm/ml koncentrációban vannak jelen. Az inkubációt úgy fejezzük be, hogy 0,25 ml 1 N kénsavat adunk hozzá és a kapott elegyet 25 ml kloroform és metanol 2 : 1 arányú elegyével extraháljuk. Az extraktumokat Folch és társai szerint mossuk [J. Biol. Chem. 226. 497-509(1959)], levegőn szárítjuk és 15 ml számláló folyadékot tartalmazó folyadék szcintillációs számlálóval számláljuk (a számláló folyadék 2 rész 0,4 vegyes százalékos New England Nuclear Omnifluort tartalmazó toluolt és 1 rész Triton X—100-at tartalmaz 2 : 1 arányban). A kísérleteket háromszor ismételtük meg és olyan kontroll tesztet is végeztünk, amelyben minden komponens, arány és feltétel azonos volt, kivéve, hogy nem tartalmazott teszt vegyületet. A kapott adatokból minden esetben kiszámítottuk a teszt vegyület által okozott százalékos lipid szintézis gátló hatást. A tesztekben kapott eredményeket az I. táblázat tartalmazza, olyan formában, hogy összehasonlítjuk a teszt vegyületeket tartalmazó elegyek százalékos lipogenézis gátló hatását a teszt vegyületeket nem tartalmazó kontroll elegyekkel elért lipogenézis gátló hatással. 1. táblázat Példa szám Százalékos g (1) 63 (2) 63 (3) 54 (4) 30 (5) 45 (6) 29 (7) 46 (8) 26 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás 1 általános képletű 2,3-dihidro-l,4-benzoxatiinek - ahol n jelentése 0 vagy 1, R a molekula 6-os vagy 7-es helyzetében kapcsolódik a szénatomhoz és jelentése halogénatom, nitro-, metilszulfonamino- vagy trifluormetilcsoport, amino-, alkil- vagy alkoxicsoport, mely két utóbbi csoport 1—4'szénatomot tartalmazhat - előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely II általános képletű 2,3-dihidro-l,4- -benzoxatiin-2-karboxilátot, vagy -kloridot, - ahol R és n jelentése a fenti, és X jelentése 1 -5szénatomos alkoxicsoport vagy klóratom — oldószer jelenlétében allilaminnal reagáltatunk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy valamely (II) általános képletű vegyületet, - ahol X jelentése 1-4 szénatomos alkoxicsoport, R és n jelentése a fenti - allil-aminnal reagáltatunk. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy valamely (II) általános képletű vegyületet — ahol X jelentése metoxi- vagy etoxicsoport, R és n jelentése a fenti — allil-aminnal reagáltatunk. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy valamely II általános képletű vegyületet, — ahol Q jelentése 6-os helyzetben kapcsolódó klór- vagy brómatom és X és n jelentése a fenti — allilaminnal reagáltatunk. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy valamely II általános képletű vegyületet — ahol R jelentése 5 10 15 70 2’5 30 35 40 45 50 55 60 .65 4
