179549. lajstromszámú szabadalom • Eljárás urokináz termelésére
5 179549 6 1. táblázat Urokináz-titerek összes DNSX Aminosav 1. nap 2. nap 3. nap 4. nap Mg Fenil-alanin 37,85 46,8 33,55 37,2 80,95 Metionin 15,3 7,2 7,6 10,4 79,0 Hisztidin 11,9 12,6 13,5 8,2 71,5 Glicin 10,7 11,4 16,4 33,3 67,8 x Az edényekben levő sejtek végső DNS-koncentrációja a fenntartó tápfolyadékban való 4 napos tenyésztés végén. 2. táblázat Adalékok Urokináz-titerek 3. nap 6. nap 9. nap összes DNSX Úg semmi 6,1 3,6 3,1 285,8 0,1% HSA 13,5 7,4 4,8 298,5 0,1% HSA + 0,3% Gly 22,4 11,9 11,7 308,3 0,1% HSA + 0,5% Gly 26,3 24,8 17,0 264,0 0,1%HSA* 0,3% Phe 22,2 25,6 16,4 223,8 0,1%HSA* 0,5%Phe 61,2 35,6 36,3 126,0 0,3% Gly 13,1 14,0 7,4 287,0 0,5% Gly 27,2 10,5 9,0 296,3 0,3% Phe 24,4 16,1 10,1 205,5 0,5% Phe 46,7 27,3 19,9 118,8 x Az edényekben levő sejtek végső DNS-tartalma Gly = glicin Phe = fenil-alanin a fenntartó tápfolyadékban való 9 napos tenyésztés után Szabadalmi igénypontok: A fenti példákból látható, hogy ha a fenntartó tápfolyadékban megnövelt mennyiségű fenil-alanint alkalmazunk, akkor a vese-sejttenyészetből kinyert 40 urokináz mennyisége lényegesen nagyobb, mint más aminosavak, például glicin, metionin és hisztidin alkalmazása esetén. Ez a fokozott uroldnáz-termelődés annak ellenére következik be, hogy a sejtszám (a DNS-tartalom alapján) az idő függvényében csökken. 45 E leírás elolvasása után a szakember számos más példát is nyilvánvalónak találhat a találmány szellemétől és hatókörétől való eltérés nélkül. Szándékunknak megfelelően az igénypontok hatályába minden ilyen 50 további példa is beletartozik. 1. Eljárás urokináz termelésére élő vesesejtek vizes tápfolyadékban való tenyésztése útján, azzal jellemezve, hogy az urokináz-termelés fokozása céljából 0,3-0,7 súlyszázalék mennyiségű fenil-alanint adunk a tápfolyadékhoz. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a fenil-alanint 0,5 súlyszázalék mennyiségben alkalmazzuk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy normális primer emberi embrió-vesesejteket tenyésztünk. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy laktalbumin-hidrolizátumot, emberi szérum-albumint, glükózt és NaHC03- -ot tartalmazó tápfolyadékot használunk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 83.4149 - Zrínyi Nyomda, Budapest 3