179549. lajstromszámú szabadalom • Eljárás urokináz termelésére

MAGYAR népköztArs asAg SZABADALMI LEÍRÁS 179549 Bejelentés napja: 1979. V. 23. (MO-1050) Amerikai Egyesült Államok-beli elsőbbsége : 1978. V. 24.(909,137) ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI Közzététel napja: 1982. III. 29. HIVATAL Megjelent: 1984. VI. 30. Nemzetközi osztályozás: NSZOa : C 12 N 9/72 ^aiálmányiSJ^ Szabadalmi Tár Tula Feltalálók: Szabadalmas: Kuo Mau-Jung mikrobiológus, St. Louis, Reents Margaret Jean vegyész, Chester- Monsanto Company, St. Louis, field, Feder Joseph (NMN), biokémikus, St. Louis, Missouri, AmeriVai Egyesült Amerikai Egyesült Államok Államok Eljárás urokináz termelésére 1 2 A találmány tárgya eljárás urokináz előállítására. Az urokináz-enzim hatására a plazminogén plaz­­minná alakul át. (A plazmin aktív proteáz, amely a fibrint oldható peptidekre hasítja.) így az urokináz mint aktivátor elősegíti a vérrögök (a vérpályában ke­letkező fibrinalvadék) feloldódását. Urokináz kis mennyiségben előfordul az emberi vizeletben, de a számítások szerint az enzim klinikai dózisának előállításához legalább 1500 liter vizelet szükséges. Újabban különböző állati vesesejtek, például egér­vese, újszülött hörcsög-vese (BHK = baby hamster kid­ney) és emberi embrió-vese (HEK = human embryonic kidney) sejtek tenyészetéből nyertek urokinázt. Ki­mutatták, hogy a szövettenyészetben növekedett HEK-sejtekből izolált urokináz azonos a vizeletből származó urokinázzal (Barlow és Lazer, Thromb. Rés. 1/3,201-207(1972)]. Ezideig különböző módszereket ajánlottak az uro­kináz-termelés szövettenyésztő eljárásokkal való meg­javítására: A 3 904 480 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás eljárásában különböző mitózisgátló anyagokat adnak a sejttenyésztő folya­dékhoz a plazminogén aktivátor (urokináz) termelésé­nek fokozása céljából. A probléma egy másik megkö­zelítésénél a vese-sejttenyészetre fibrint rétegeznek az urokináz-képződés fokozása céljából [Bemik és Kwaan, J. Láb. Clin. Med. 70, 650 (1967), J. Clin. Invest. 48, 1740 (1969), J. Clin, Invest. 52, 823 (1973)]. Egyéb anyagok meghatározott mennyiségé­nek hozzáadását is javasolták az urokináz-termelé elősegítése céljából, így pronáz (3 930 944 számi Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás) és glicin (3 930 945 számú Amerikai Egyesült Államok- 5 beli szabadalmi leírás) hozzáadását. Az urokináz-termelés megjavításának egy másik módszere szerint kiválasztják az enzimet termelő sejteket és eltávolítják az enzimet nem terme­lőket (Barlow és munkatársai, production of Plas- 10 minogen Activator by Tissue Culture Techniques”. Proteases and Biological Control”, Cold Spring Har­bor Conference on Cell Proliferation, 2. kötet, 1975, Cold. Spring Harbor Lab., kiadó Reich, Rifkin és Shaw, 325—331 oldal). Az utóbbi közleményben azt 15 is leírják, hogy külön hozzáadott aminosavak, mint aszparaginsav és glutaminsav nen növelik a plazmino­gén aktivátor termelődését, de plazminogén és más proteázok viszont növelik. A 3 930 940 számú Ame­rika Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás szerint 20 az aminosavak - glicin kivételével — hatástalanok, vagy néha ellentétesen befolyásolják az urokináz-ter­­melődést. A találmány szerint váratlanul azt találtuk, hogy ha a vesesejt-tenyészet tápfolyadékához meghatáro- 25 zott mennyiségű aromás aminosavat, mint fenil-ala­­nint adunk, az urokináz termelődése olyan mértékben fokozható, amely lényegesen meghaladja az ekviva­lens mennyiségű glicinnel elérhető mennyiséget. Ez a felfedezés annál is inkább meglepő, mert bizonyos 30 más aminosavak, mint aszparaginsav, glutaminsav, me-Ï79549

Next

/
Thumbnails
Contents