179396. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-oxo-L-gulonsav előállítására
MAGYAR NÉPKÖZT ARS AS AG SZABADALMI LEÍRÁS 179396 Bejelentés napja: 1981. I. 07. (28/81) Amerikai Egyesült Államok-beli elsőbbsége: 1980. I. 21. (113,945 sz.) Nemzetközi osztályozás: NSZO3 •' C 12 P 19/02 ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1982. I. 28. Megjelent: 1984. I. 31. ( Szabadalmi Tár. ' . I Feltalálók: Szabadalmas: Kita Donald Albeit vegyész, Essex, Connecticut, Hall Karlene Elisabeth vegyész, PFIZER INC., New York, Brooklyn, N. Y., Amerikai Egyesült Államok Amerikai Egyesült Államok Eljárás 2-oxo-L-gulonsav előállítására 1 2 A találmány tárgya új eljárás 2-oxo-L-gulonsav mikrobiológiai úton történő előállítására. A 2-oxo-L-gulonsav értékes közti termék az aszkorbinsav (C vitamin), az emberi táplálkozás szempontjából lényeges vitamin előállítására. A 2-oxo-L-gulonsav aszkorbinsawá való átalakítására irányuló eljárások (például a lúg jelenlétében végzett hevítés) a szakember számára jól ismertek. A szakember számára azonban csak korlátozott számú olyan mikroorganizmus ismeretes, amely a 2,5-dioxo-D-glükonsavat hatékonyan képes 2-oxo-L-gulonsav képződése közben redukálni, ilyeneket ismertet például a 3 963 574, 3 922 194 és 3 959 076 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás. Ezek a mikroorganizmusok nem mindig biztosíthatók és viszonylag nehezen hozzáférhetők. A találmány célkitűzése olyan új eljárás kidolgozása, amely további lehetőséget nyújt 2-oxo-L-gulonsav előállítására, mégpedig könnyebben biztosítható mikroorganizmusok segítségével. A Citrobacter genushoz tartozó mikroorganizmusokról korábban nem írták le, hogy hatékonyak lennének ebben a reakcióban. A találmány értelmében azt találtuk, hogy egy, a 2-oxo-L-gulonsav vagy sói jó kitermeléssel való előállítását lehetővé tevő eljáráshoz jutunk, ha valamely, a Citrobacter genushoz tartozó, 2-oxo-L-gulonsavat termelő mikroorganizmust vagy ennek mutánsait vizes táptalajban tenyésztjük, 2,5-dioxo-D-glükonsav vagy sója jelenlétében. A fermentációt előnyösen 25-35 °C között, különösen 25—30 °C között és 5,5-7,5 pH-tartományban végezzük. Előnyösen alkalmazható- 2,5-dioxo-D-glükonsav-só, a nátrium-2,5-dioxo-D-glükonát és a kalcium-2,5-dioxo-D-glü- 5 konít. A találmány szerinti eljárásban használható mikroorganizmusok tehát a Citrobacter genus 2-oxo-L•gulonsavat termelő törzsei. Számos Citrobacter species ismét, Citrobacter törzsek a köz számára 10 törzsgyűjteményekből, például az ATCC-től hozzáférhetők. Az ATCC-nél például a következő letétbehelyezett törzsek találhatók, amelyek a találmány szerinti eljáráshoz alkalmasak: Citrobacter freundn ATCC 8090, 6750, 8454, 10787, 11102, 11606, 15 11811 és 14135, továbbá Citrobacter diversus ATCC 27026 , 27027, 27028 és 27156. Mint az ATCC Katalógus 13. kiadásából kitűnik, több letétbehelyezett Citrobacter freundii és Citrobacter diversus törzset korábban más genushoz vagy specieshez tar- 20 tozóként osztályoztak. így például a Citrobacter freundü ATCC 6750-t Citrobacter intermedium-ként és Escherichia intermedia ATCC 21073 néven is leírták. A jelen leírásban eltekintünk ezektől a korábbi osztályozásoktól és a mikroorganizmusokat 25 Citrobacter freundii és Citrobacter diversus törzsekként azonosítjuk. A találmány szerinti eljárás a fenti mikroorganizmusok mutánsaival - amelyeket ezekből a mikroorganizmusokból különböző módon, például röntgen-sugárral vagy UV-fénnyel végzett be- 3o sugárzással, nitrogénmustárral végzett kezeléssel és 179396
