179353. lajstromszámú szabadalom • Eljárás akuleacin-AÓ-Aš, -DÓ és-Dš antibiotikum előállítására
7 179353 8 11. Infravörös abszorpciós színkép (KBr tabletta) Akuleacin (ábra) Abszorpciós sávok (cm-1) Aa (2.) 3350, 2910, 2840, 1620, 1510, 1435 Ay (5.) 3350, 2910, 2840, 1620, 1510, 1435 Da (8.) 3350, 2910, 2840, 1620, 1510, 1435 Dy (11.) 3350, 2910, 2840, 1620, 1510, 1435 12. Rf-értékek: 15. Aminosav-összetétel: Hordozó: kovasavgél lemez (Eastman Kodak Co., Eastman Chromagram sheet No. 6060). Oldószer: A kloroform-metanol (10:3); B etilacetát-metanol-víz (20 : 4 :1), C etilacetát-n-butanol (3 :1) vízzel telítve, 15 20 Kifejlesztőszer: jód. Biológiai vizsgálat Candida albicanssal. Oldószer A B C Akuleacin-Aa 0,47 0,28 0,37 Akuleacin-Ay 0,47 0,28 0,37 Akuleacin-Da 0,67 0,35 0,42 Akuleadn-Dy 0,67 0,35 0,42 13. Retenciós idő folyadékkromatografálással: 35 Retendós idő/perc Akuleacin-Aa 7,9 40 Akuleacin-Ay 12,3 Akuleadn-Da 9,2 Akuleacin-Dy 14,1 5 mg/ml akuleacin-oldatot 8 iá metanolban 45 15 x500mm-es oszlopra viszünk, a hordozó polisztirén műgyanta, a kifejlesztőszer 0,01% trietilamint tartalmazó 85%-os vizes metanol, az oszlop hőmérséklete 55 °C, a berendezés típusa: Hitachi 634 (Hitachi Corp., Japán). 50 14. Hidrolízis: Hidrolizátum 55 Akuleadn-Aa Akuleadn-A7 Akuleadn-Da Akuleadn-Dy mirisztinsav palmitinsav mirisztinsav palmitinsav 60 Az akuleacinokat 6 n sósavval 110°C-on hidrolizáltuk és éténél extraháltuk. Az éteres réteget gázkromatografálással analizáltuk és a szabad zsírsavat minőségileg határoztuk meg. 65 Az akuleacinokat 6 n sósavval 110°C-on 20 óra hosszat hidrolizáltuk, majd a ninhidrin-pozitív komponenseket automatikus aminosav-analizátorral (Japán Electron Optical Corp., típus: JLC-5AH analizátor) határoztuk meg. Az eredményeket a 3. ábra (akuleacin-Aa), a 6. ábra (akuleacin-Ay), a 9. ábra (akuleacin-Da) és a 12. ábra akuleadn-Dy) szemlélteti, és treonint és néhány ismeretlen ninhidrin-pozitív komponenst találtunk. Az akuleacinok peptidszerű antibiotikumok, gyakorlatilag vízben oldhatatlanok és fizikai-kémiai tulajdonságaik a fent megadottak. Az eddig ismert olyan antibiotikumok, amelyeknek ultraibolya abszorpdós maximumuk metanolban 278 nm-nél van, és az akuleadn-Aa-hoz, -Ay-hoz, -Da-hoz, illetve -Dy-hoz hasonlítanak, a miroridin (45—12276 számú nyilvánosságra hozott japán szabadalmi bejelentés), az atlesztatin (41—12668) számú nyilvánosságra hozott japán szabadalmi bejelentés), a monilin [Takeda Institute Annual Report, 14, 8-10 (1955)], az orizamidn (38-2800 számú nyilvánosságra hozott japán szabadalmi bejelentés), a szaramicetin (Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1961, 436-666), az unamicin [J. Antibiotics, Ser. A. 13, 114-120 (I960)], a vengjdd (764 198 számú nagy-britanniai szabadalmi leírás), az akuleadn-A és akuleacin-D (3 978 210 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) és az Echinocandin B (A32204 antibiotikum, 568 386 számú svájd szabadalmi leírás). Az akuleadnok ezektől az antibiotikumoktól a következő tények alapján különböznek. A miroridin bázisos, vízben oldódó antibiotikum és az akuleacin ok tói eltérő. Az atlesztatin fizikai-kémiai sajátosságai és biológiai tulajdonságai hasonlók az akuleacinokhoz, de az atlesztatin fajlagos forgatóképessége [a]j,° = —64 0 (c = 0,5, metanolban) és ultraibolya abszorpdós maximuma 278 és 225 nm-nél van és elemi összetétele: C 55,25%, H 7,50% és N 9,41%, tehát az akuleacinoktól eltérő. A monilin bázisos nukleozid, és nitrogéntartalma az elemi összetétel alapján nagyobb, mint az akuleadnoknak. Az orizamidn savas, olajos anyag. A szaramicetin hidrolízis terméke aszparaginsav, cisztin, glidn és treonin, és az unamicin savas polién. A vengidd hasonlóan a monilinhez egy nukleozid. Az akuleadn-A, akuleadn-D és Echinocandin B fizikai-kémiai és biológiai tulajdonságai hasonlóak az akuleacin-Aa és -Ay, az akuleadn-Da és -Dy, tulajdonságaihoz, de 4
