179344. lajstromszámú szabadalom • Eljárás androsztán-17-on-származékok előállítására
s 179344 6 szénatomot tartalmazó telített vagy telítetlen szénhidrogéncsoport és Me egy alkálifématom vagy magnéziumhalogenidcsoport, alkilezzük. Az így előálM tott III általános képletű vegyületek, ahol-----, Rj és R2 a fentiekben megadott és R^ jelentése megegyezik Rs fenti jelentésével, vagy hidrogénatom, H+-ionok vagy Lewis-savak jelenlétében a megfelelő 30-hidroxi-vegyületekké hidrolizálhatók. Ezek továbbalakítása gyógyászati hatású vegyületekké jól ismert. így például az előállított 3ß-hidroxi-5-androsztén-17-on-származékokat Oppenauer-reakcióval, például a hidrolízistermék benzol-aceton elegyben aluminium-izopropiláttal történő melegítésével a megfelelő 17|3-hidroxi-3-keto-A4-szteroidokká alakíthatjuk át, így például tesztoszteronná, 17a-metil-tesztoszteronná, 17a-etil-tesztoszteronná vagy 17a-etinil-tesztoszteronná, melyek hormonaktivitása jól ismert. Ezenkívül a 17a-etinil-17/3-hidroxi-4-androsztén-3-on és a 17(3-hi droxi-17a-vinil-4-androsztén-3-on ismert és értékes közbenső termék a gyógyászatiig hatékony 17a-hidroxi-progeszteron és észterei előállítása során, lásd Helv. Chim. Acta 24, 1941, 945, valamint a 2 140 291 számú Német Szövetségi Köztársaság-beli nyilvánosságrahozatali iratot. Az I általános képletű 5-androsztén-17-on-származékok 17-oxocsoportjának redukcióját szakember számára jól ismert módszerekkel végezzük, lásd például John Fried: Organic Reacitons in Steroid Chemistry, van Nostrand Reinhold Comp. New York etc. 1972, I. kötet 61 ff oldal. így ezeket a vegyületeket például nátriumbórhidriddel vagy lítiumalumíniumhidriddel reagáltatva a megfelelő 17/3-hidroxi-5-androsztén-származék keletkezik. Ugyancsak ismeretesek módszerek a 17-oxocsoport alkilezésére, lásd például John Fried: Organic Reactions in Steroid Chemistry van Nostrand Reinhold Comp., New York etc. 1972, II. kötet, 53. oldal. így az I általános képletű 5-androsztén-17-on-származékokat például alkilmagnéziumhalogenidekkel vagy alkálifémacetilidekkel reagáltatva a megfelelő 17/3-hidroxi-17a-alkil- (vagy etinil)-5-androsztén-származékok keletkeznek. Az I általános képletű 5a-androsztán-17-on-származékok például a 17-oxocsoport 17ß-hidroxilcsoporttá történő redukálása, ennek észterezése, az acetálkötés felhasítása és a 3-hidroxilcsoport oxidálása után a megfelelő 17/J-aciloxi-5a-androsztán-3-onszármazékokká alakíthatók át, melyek ismert anabolikus hatású anyagok. (Endocrinologie 66, 1960, 13.) A találmány szerinti eljárás során alkalmazott kiindulási anyagok ismertek, vagy önmagukban ismert módszerekkel állíthatók elő, lásd J. Pharm. Soc. 54, (1965), Cn. J. Chem. 49, 2418 (1971), Synthesis 1975, 276 és 1976, 244, Tetrahedron Letters 1976, 809, Cn. J. Chem. 50, 2788 (1972) és Bull. Soc. Chim. France 1960, 297. A következő példákban a találmány szerinti eljárást részletesebben ismertetjük. A) Példák a mikrobiológiai oldallánclebontás szemléltetésére 1. példa a) 750 ml-es Erlenmeyer-lombikba 200 ml steril táptalajt mérünk, mely 1% élesztőextraktumot, 0,45% dinátiiumhidrogénfoszfátot, 0,34% káliumhidrogénfoszfátot és 0,2% Tagat-02-t tartalmaz, és pH-ja 6,7, majd Mycobacterium spec. NRRL-B-3805 törzs ferde tenyészetéről lemosott sejtszuszpenzióval oltjuk be, és 3 napon át 190/perc frekvenciával 30 °C hőmérsékleten rázatjuk. b) 40 liter, 1,23% 65%-os élesztőextraktumot, 0,68% káliumdihidrogénfoszfátot és 0,2% Tagat 02-t tartalmazó pH 6,0 mértékű táptalajjal töltött 50 literes fermentort a fenti Mycobacterium tenyészet 200ml-ével oltjuk, és 30 °C hőmérsékleten 2 m3/óra levegőztetés mellett 48 órán át inkubáljuk. c) 400 g koleszterint 6 liter formai dehid-dimetilacetálban oldunk, szobahőmérsékleten történő keverés közben 400 ml szilikagélt és részletekben 200 g foszforpentoxidot adunk hozzá, és 2 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. Az oldhatatlan részeket kiszűrjük, formaldehid-dimetilacetállal mossuk és az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. Nátriumhidrogérikarbonát-oldat hozzáadása után a szilárd nyersterméket leszűrjük, vízzel mossuk, és szárítás után 440 g 3j3-metoximetoxi-5- kolesztént kapunk. Az acetonból átkristályosított termék 79-80 °C-on olvad. 400 g így előállított 3/3-metoximetoxi-5-kolesztént 120 g Teginnel, 10 liter desztillált vízzel és 40 ml 1 n nátríumhidroxid-oldattal 95 °C hőmérsékleten DR-3-6-6 típusú Dispax-reaktorban (Jahnke und Kunkel, NSZK) 30 percen át emulgeálunk. Az emulziót ezután 20 percen át 120 °C hőmérsékleten ster il e tzük. d) 50 literes fermentorba 40 liter sterilezett, 2,0% kukoricalekvárt, 0,3% diammóniumhidrogénfoszfátot és 0,25% Tagat 02-t tartalmazó, 6,5 pH-értékű táptalajt mérünk, két liter fenti Mycobacterium inokulummal beoltjuk és 0,5 m3/óra levegőztetés és 250/perc fordulatszámú keverés mellett 24 órán át 30 °C hőmérsékleten inkubáljuk. Ezután a tenyészetet hozzáadjuk a c) pontban előállított 3(3-metoximetoxi-5-kolesztén-emulziót és a fermentációt további 120 órán át folytatjuk. A fermentáció befejeztével a tenyészetet háromszor 5-5 liter etilénkloriddal extraháljuk, az etilénkloridos fázist szűrjük és vákuumban bepároljuk. A kapott 156 g maradékot szilikagél oszlopon kromatografáljuk, majd etilacetátból átkristályosítjuk, és így 86 g 30-metoxímetoxi-5-androsztén-17- -ont kapunk. Op.: 129/131-132 °C. 2. példa a) 2 literes Erlenmeyer-lombikban 500 ml, az la példában megadott steril táptalajon és ugyanolyan körülmények között Mycobacterium spec. NRRL— -B-3805 törzset tenyésztünk. b) 10 g szitoszterint az le példában megadottak szerint reagáltatunk, és így 11 g 24-etil-3ß-metoxi-metoxi-5-kolesztént kapunk. Az acetonból átkristályosított termék 70—71 °C-on olvad. S 10 13 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
