179332. lajstromszámú szabadalom • Eljárás takarmányfehérje előállítására
9 179332 10 állatok részére legjobban hasznosítható fehérje termelhető. Az eljárás különleges berendezéseket és alapanyagokat nem igényel. A fermentlé készítéséhez közvetlenül folyóvíz, esővíz, termálvíz, szennyvízderítő berendezésekben részlegesen vagy teljesen tisztított víz, adott esetben tengervíz is megfelelő. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módját és részleteit az alábbi példák szemléltetik, annak meghagyásával, hogy a csatolt igénypontok oltalmi körén belül a megoldás kivitele még számos más változatban is megvalósítható. 1. példa 10 literes, keverővei és gázbevezetővel ellátott üvegfermentorba 5 liter fermentlevet öntünk, mely városi szennyvízderítő berendezés iszapjának mesterséges táptalajon, anaerob körülmények között, szeptikus módon fenntartott tenyészete. Ezután 1 liter csapvízhez az alábbi anyagokat tesszük: 50 g ammónium-nitrát (Péti só, kereskedelmi néven forgalmazott műtrágya), 100 g dinátrium-hidrogén-foszfát, 30 g kálium-dihidrogén-foszfát, 5 g kálium-klorid, 20 g karbamid, 25 g kukoricalekvár, 6 g száraz élesztő, melyet vízzel előzőleg felfőzünk. A sók feloldódása után az oldatot a fermentléhez öntjük, gondosan elkeverjük vele, majd 5 g magnézium-szulfát-víz (l/7)-et 20 ml vízben oldva adunk hozzá. Ezt követően 5 ml „A” és 5 ml „B” jelzésű oldatot adagolunk a fermentléhez. Az „A” oldatot a következőképpen készítjük el: 83,5 ml 10%-os vas (Ill)-klorid oldat 0,91 csapvíz 0,33 g kalcium(II)-klorid-víz(l/2) 0,09 g cink(II)-szulfát-víz(l/7) 0,08 g réz(II)-szulfát-víz(l/5) 0,08 g mangán(ll)-szulfát-víz(l/4) 0,05 g ammónium-molibdenát 0,09 g kobalt(II)-klorid-víz(l/6) és a só oldatot csapvízzel egy literre egészítjük ki. Ebből az oldatból 1 ml-t teszünk a kiindulási fermentlé minden Éteréhez, illetve a továbbiakban a tápoldathoz. A „B” oldat összetétele: 2 g 5,6-dimetilbenzimidazol 1 liter metanol Ebből az oldatból szintén 1 ml-t teszünk minden liter fermentléhez, illetve a továbbiakban minden liter tápoldathoz. Ezután meghatározzuk a fermentlé pH értékét, és ha szükséges, 6,5-re állítjuk be 10%-os ammónia, illetve 10%-os sósav oldat segítségével. Végül 120 ml kereskedelmi minőségű metanolt öntünk a fermentorba, majd a berendezést 29 °C-os termosztátba helyezzük. Ezután az elkészített táptalajból 50 ml mintát veszünk a szükséges vizsgálatok elvégzéséhez (vezetőképesség, pH, NH3—N, NHj-N, foszfát-tartalom, biomassza, Gram-festés, kémiai oxigén igény, biológiai oxigén igény, stb.). Állandó keverés (380 ford/perc), levegőbeáramlás (0,7 térf/térf./perc) mellett végezzük a fermentációt. A fermentor egyik csonkjára szilikon olajos habzásgátlót tartalmazó üvegedényt csatlakoztatunk. A fermentorból naponként 50 ml mintát veszünk, eltolódás esetén a fermentáció pH értékét korrigáljuk, a szükséges méréseket és vizsgálatokat elvégezzük, az adatokat regisztráljuk, majd 120 ml metanolt öntünk az elegyhez. A 120 ml metanol hozzáadását minden nap megismételjük. A hatodik napon olyan mennyiségű mintát veszünk ki, hogy a fermentlé térfogata a fermentorban 4,8 liter maradjon. Ezután 1,2 liter csapvízzel készült tápoldatot öntünk az edénybe, melyet a kiindulási teljes térfogathoz felhasznált anyagok részarányos mennyiségéből készítettünk. A 120 ml metanolt továbbra is adagoljuk. A fermentációt a továbbiakban naponkénti 1,2 literes cserével folytatjuk (a fermentlében kialakuló vezetőképességi érték 3600 ^Siemens körül állandósul), és a hatodik naptól kezdve a leengedett fermentléből a képződött fehérjét leválasztjuk, mégpedig úgy, hogy 1 liter fermenlé pH értékét 40%-os nátrium-hidroxid oldattal 10,5-re beállítjuk, majd 1,5 g nátrium-laurilszulfátot 20 ml vízben oldva hozzáöntünk. Félórás keverés után 10%-os sósav oldattal a keverék pH értékét először 3-ra, majd újabb fél órás keverés után 40%-os nátrium-hidroxid oldattal 5-re állítjuk, és a csapadékos oldatot ülepítésre félre tesszük. Az elvált felülúszót eltávolítjuk, és a visszamaradó csapadékot szögcentrifugában tömörítjük. A leválasztott csapadékot 130 °C-on hősterilezzük, majd folyamatosan kb. 70 °C-os légáramban megszárítjuk és finoman elporítjuk. 25,2 g halvány szürkés-barna színű terméket kapunk, melynek N-alapon mért fehéije tartalma 50,5% és grammonként 5±1 mikrogramm B12-vitamin aktivitást tartalmaz mikrobiológiailag értékelve az U.S. Pharmacopoeia XVIII. „Vitamin Bu Activity Assay, page 887” cikkelye szerint. 2. példa 10 literes üvegfermentorba 4,5 liter városi szenny•vízderítő berendezés letisztított, eltávozó vizét öntjük, és az alábbiakat adjuk hozzá. 50 g ammónium4dorid 5 g kálium4dorid 5 g magnézium (Il)-szulfát-víz (1/7) 20 g karbamid (műtrágya minőség) 25 g kukoricalekvár 6 g száraz élesztő, vízzel előzőleg fel főzve 150 g szuperfoszfát (ortofoszfát tartalmú műtrágya) 1 liter vízzel felfőzve, ülepítve, és a csapadékról dekantált oldatot használjuk Ezt követően az 1. példában leírt összetételű 5-5 ml ,A” és „B” oldatot, majd 120 ml metanolt 5 10 IS 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
