179148. lajstromszámú szabadalom • Eljárás primicin-bázis, ill ásványi savakkal alkotott sói előállítására
179148 Szerves aminok éa alkoholok biner elegyeként előnyösen n-propilamin vagy, etilén-diamin-metanol, 5-20 %-os térfogataranyu oldószexrendszert alkalmazunk a száraz micélium súlyára vonatkoztatva 1:3-5 g/v arányban. A tisztítást bázis esetében formamid-metanol elegybőlj sók esetén hangyasav-metanol elegyböl való átkristályositással végezzük. Vizsgálataink szerint á'Primicin bázis biológiai hatásossága azonos az ásványi savakkal alkotott sókéval. A Primicin bázis előnyös alapanyagul szolgálhat félszintetikus származékok előállításához. A Primicin bázis és sói Thermopolyspora gombatörzs micélium tömegéből történő kinyerését lehetőve tevő találmány szerinti műveletek adott esetben a fentiektől eltérő sorrendben vagy a feldolgozandó nyerstermék természetétől függően egyes műveleti lépések elhagyásával is alkalmazhatók. A találmány szerinti eljárás előnyei az eddig ismert eljárásokkal szemben a következők: a. szakaszos eljárás esetén a fele mennyiségű oldószerigény b. folyamatos eljárás eseten a magasabb extrakciós hatásfok, egynegyed mennyiséçü oldószerigény, jó reprodukálhatóság, kevesebb kiviteli lépes. A találmány szerinti eljárást az alábbi példákon mutatjuk be. 1. példa 100 g szárított és zsírmentesitett miceliumanyagot /biológiai aktivitása: 7»2 illetve 5 /Ug/ml/ először 600 ml, majd 500 ml n-butanol-metanol-viz 50^20:50 v/v elegyével visszafolyatós hűtő mellett 1-1 órát forralva keverjük, majd lehűtve szűrjük. A micélium maradék: 79 g* A sárgás-vörös kivonatot higitott ammóniumhidroxiddal pH 8,2-re állítva 7,5 ml 15 %-os ólomacetát oldattal /Ph.Hg.V./ derítjük, majd a 60°-ra melegített oldatot 7 6 Cellit-54-5 szűrési segédanyaggal leszivatjuk. A pH 6,0-os oldatot A- n kénsavval pH A,5-re savanyítjuk és a kivált ólomszulfátot 7 S Cellit-aktivszén keverékkel /2:1/ melegen ólommentesre szűrjük. A körülbelül 900 ml oldat azonos térfogatú 5 %-os konyhasóoldattal elegyítve két fázisra különül el. Az alsó fázist 110 ml n-butanollal visszarázva, az összesen 750 ml butanolos fázist vákuumban azeotrop ele^yként 1/4-éré bepároljuk. A kivált Primicin szulfátot szűrjük és kevés acetonnal mossuk. Szárítás után 6,5 g /87 %/* 0,05 /Ug/ml aktivitású terméket kapunk. Op. 175-1-80 °G\JpQ + 15,1 0 Az 1/5 térfogatra sűrített anyalugból 1:1 acetonnal további 1,5 6» 05 /ug/ml aktivitású anyagot izolálhatunk. / 2. példa 150 g zsírtalanított, száraz miceliumot Zl0,8 g/7,2 % Primicin7 visszafolyatós hűtővel ellátott edényben 225 ml 15 %os hangyasav metanollal öntjük le, majd 1 óra múlva 225 ml metanollal az oldószer recirkuláltatása mellett 2 órán keresztül éxtraháljuk. A maradék micélium: 151 g/biológiai aktivitás: 1 % alatt/. A vörösbarna extraktumot légköri nyomáson felére párolva, 11,8 g anyag spontán válik ki /0,75/Ug/ml/. A csapadékot előbb kevés acetonnal, majd 110 ml 5 %wnetanol tartalmú vízzel, majd kevés acetonnal folyamatosan keverve, és szűrve 4
