179146. lajstromszámú szabadalom • Eljárás sziszomicin előállítására mikrobiológiai úton, micromonospóra rosea törzs fermentációjával
179.146 jának oltásához. A termelő fermentáció táptalajának összetétele a következő: szójaliszt **o g pepton lo g burgonyakeményit ő lo g dextrin 25 8 glükóz 5 8 kalo iumkarbonát k g ma r ,é z ium szül fát 2 g vasszulfát /FeSoi*. 7H20/ 0,2 g kobaltnitrát 0,8 mg pálmaolaj 2,0 g csapviz 1000,0 ml-re A táptalaj pH-ját sterilezés előtt 8,0-ra állítjuk be. A sterilezést keverés közben 121 C^-on, 1,3-1,4 atmoszféra nyomáson végezzük 1 órán keresztül. A tenyésztést savállóaoél fér mentorban végezzük. A keverés fordulatszáma ^00/perc, a levegőztetés 1 térfogat levegő/ 1 térfogat fermentlé percenként. Habzásgátlóként pálmaolajat használunk. Az antibiotikum termelés a fermentáció 35-^0. órájában indul meg, s a maximális értéket a 110-120. órában éri el. A fermentáció befejezésének időpontját Klebsiella pneumouiaeval végzett gyors turbidimetriás értékméréssel határozzuk meg /F. Kavanagh; Dilution Methods of Antibiotic Assay, Analytical Mic robiology, Acad. Press, New York 125-l^o oldal/1963//. A fermentáció befejezésekor a fermentlé összes antibiotikum tartalma sziszomicin standardra vonatkoztatva 650 E/ml / 1E megfelel 1 ug sziszomicin bázis standard hatékonyságának Stephylooooous epidermidis tesztorganizmussal, agardiffúziós módszerrel meghatározva /J.S.Simpson: Analytical Microbiology. Acad. Press. New. York 87-124. oldal/1963//. 2, példa A Micromonospóra rosea Sl/109 törzs /MNG 00182/ raélyhütve /-20 C°-on/ tárolt vegetativ micéliumának 1 ml-ével éiőosiraszám 10®- lO'/ml/ steril körülmények között 3000 ml-es Erlenmeyer-lombikban levő 800 ml steril táptalajt oltunk be, melynek összetétele a következő: Tripton /Oxoid/ 5 g szójaliszt lo g oldható keményítő glükóz kalolumkarbonát osapviz 2o g 1 8 2 g 1000 ml-re. Az elegy pH-ját a sterilezés előtt 7,0-ra állítjuk be. A tenyészetet sikrázógépen /2Ó0 fordulat/perc, 10 om kitérés/ 28 C°-on 3 napig inkubáljuk. Az igy kapott tenyészettel steril körülmények között 100 liter steril táptalajt oltunk be, melynek összetétele a következő: szójaliszt lo 8 szaoharóz lo 8 burgonyakemény i t ő lo 6 kalo iumkarboná t k 8 pálmaolaj 2 8 osapviz 1000 ml 6
