179145. lajstromszámú szabadalom • Eljárás sziszomicin előállítására mikrobiológiai úton, micromonospora danubiensis-szel
179.145 kózt, szacharózt, kukoricái!sztat, szójalisztet, szójaliszthidrolizátumot, kukoricalakvárt, ólesztőkivonatot, stb. Szarvatlan sókónt alkalmazhatunk különféle ammónium, vas, cink, mangán, magnézium, nátrium, kálium, kobalt sókat. A táptalaj pufferkapacitásának növelésére előnyösen kalolumkarbonátot használunk, habzásgátlókónt különféle növényi olajokat /pl. pálmaolaj, napraforgóolaj, szójaolaj/. A különféle táptalajkomponensek felhasználása többféle táptalaj előállítását teszi lehetővé. Az oltóanyag előáll!tásának tápigénye eltér afífennartációétól. Sziszomicin termelésére az egyik legelőnyösebb táptalajnak a szójalisztet, kukorioalekvárt, kukoricalisztet, keményítőt, szaoharózt, kalciumkarbonátot, kobaltkloridot és pálmaolajat tartalmazó táptalaj bizonyult. A fermentáció hőmérséklete 25-37 C° között változhat) legelőnyösebbnek a 28-33 C°-on végzett fermentáció bizonyult. A keverés fordulatszáma a fermentor geometriai alakjának függvényében 100-600 fordulat/pero között változhat. A levegőztetés előnyösen 1 térfogat levegő/ 1 térfogat fermentlé peroenként. A fermentáció során keletkező antibiotikum /sziszomicin és "minor komponensek"/ összes aktivitását Staphylococcus epidermidis teszt-organizmussál állapítjuk meg, agar-diffúziós módszerrel, sziszomicin standard anyagra vonatkoztatva. 96-120 órás fermentációs idő alatt a fermentlé összaktivitása 400-450 E/ml-t ér el /l E = 1 zug sziszomicin bázis aktivitás/. A fezmentiében jelenlévő antibiotikumok aktivitásának mintegy 85 $-át teszi ki a sziszomicin aktivitása. A találmány szerinti eljárással előállított sziszomicin kinyerését ismert módon végezzük el. A kapott sziszomicin bázisból kívánt esetben farmakológiailag elfogadható sókat képezünk. A találmány szerinti eljárás jelentős előnyökkel rendelkezik az eddig ismertetett eljárásokkal szemben. Az eljárás legfőbb előnye, hogy a Micromonospóra danubiens!s által termelt sziszomioin mennyisége többszöröse az eddig ismertetett eljárásokkal előállítható mennyiségnek, és laboratóriumi körülmények között meghaladja a 450 E/ml-t, a kísérleti üzemi fermentorban a 350-400 E/ml-t. Ezen túlmenően az eljárásunkkal kapott fermentlé a sziszomicin mellett mindössze 10-15 /6-nyi kisérő antibiotikumot tartalmaz. A találmány szerinti eljárást az alábbi kiviteli példákkal illusztráljuk, anélkül, hogy a találmányt ezzel korlátoznánk. 1, példa A Mioromonospora danubiensis JMS-3 /MNG 00171/ törzs mélyhütve /-20 C°-on/ tárolt vegetativ mioéliumának 1 ml-ével /élő csiraszám 10 -10/ral/steril körülmények között 500 ml—es Erlenmayer lombikban levő 100 ml steril táptalajt oltunk be, melynek összetétele a következő: keményítő 25,0 g kukoricalekvár 7,0 g ammónium szulfát 3,5 g nátriumklorid 5,0 g kalciumkarbonát 8,0 g csapviz 1000 ml-re. A táptalaj pH-ját a sterilezés előtt 7,5-re állítjuk be, igy sterilezés után 7,0-7,2 lesz a pH. 5
