179055. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás ajmalicin és savaddíciós sói kinyerésére
179055 4 kivonatot bepárolták és a maradékot először vizes borkősavval, majd kloroformmal extrahálták. Az utóbbi extraktum bepárlásával 0,025% ajmalicint nyertek ki. Az etiléndikloridos extraktumtól elválasztott savas vizes kivonatból többlépéses tisztítás után szerpentint nyertek ki, melyet redukálva további ajmalicint kaptak. Az eljárás hasonlóan Kohlmünzer módszerhez, nem alkalmas az ajmalicin és tetrahidroalsztonin elválasztására, minthogy azok mind savas vízben, mind klórozott szénhidrogénekben azonosan oldódnak. Azt találtuk, hogy ha az alkoholos, majd savas vizes kivonatolás után kapott extraktumot szénhidrogénnel extraháljuk, akkor az extrakció szelektív. Azt találtuk, ugyanis, hogy az ajmalicin nem, a többi gyengén bázisos alkaloid — közöttük a tetra: hidro-alsztonin ,— viszont kitűnően oldódik szénhidrogénekben pl. petroléterben, benzinben, benzolban, illetve benzolhomológokban, valamint hexánban, heptánban, és ha a savas vizes oldatot először ilyen oldószerrel rázzuk ki, az utóbbi alkaloidok mennek csak át a szerves fázisba és ilyen módon egyszerűen elválaszthatók az ajmalicintől. Ezt követően a gyengén savas vizes oldatból az ajmalicin megfelelő szerves oldószerekkel, mint pl. klórozott szénhidrogénekkel, vagy észterekkel szelektíven kivonható és a kivonatban levő esetleges egyéb kísérőanyagok fáziscserés és/vagy adszorpciós módszerrel (például derítéssel) egyszerűen eltávolíthatók az ajmalicin mellől. Ily módon tehát 0,2% tiszta ajmalicint nyerhetünk mely a korábbi eljárásoknál egy nagyságrenddel jobb kitermelés, és anélkül nyerjük, hogy kromatográfiás műveletet kellene alkalmazni. A találmány tárgya tehát eljárás ajmalicin és savaddíciós sói előállítására Catharanthus roseus növény gyökerének 1 -5 szénatomos alkanollal történő kivonatolása, a kivonat besűrítése, a sűrítmény gyenge sav vizes oldatával való extrahálása, majd az extraktum tisztítása, és a termék kinyerése, kívánt esetben savaddíciós sóvá alakítása útján oly módon, hogy a savas-vizes extraktumot először valamely szénhidrogénnel, majd valamely klórozott szénhidrogénnel vagy észterrel kivonatoljuk, kívánt esetben a szénhidrogénes oldatból a kísérő tetrahidro-alsztonint önmagában ismert módon kinyerjük, a klórozott szénhidrogénes vagy észteres extraktumot pedig kívánt esetben fáziscserés és/vagy kromatográfiástól eltérő adszorpciós módszerekkel tisztítjuk, majd az oldatból az ajmalicint önmagában ismert módon kinyerjük és kívánt esetben savaddíciós sóvá alakítjuk. A találmány értelmében az ajmalicint a következőképpen állítjuk elő: Catharanthus roseus növény aprított gyökerét 1 -5 szénatomos alkanollal, célszerűen metanollal vagy etanollal kivonatoljuk. Az alkanolos kivonatot részlegesen bepároljuk, majd az ajmahcinnel vízben jól oldódó sókat képző — gyenge savat adunk hozzá. Ilyen savként elsősorban citromsav, borkősav, ecetsav vagy foszforsav jöhet számításba. A savat célszerűen híg vizes oldat formájában, előnyösen néhány tized %-os - néhány %-os vizes oldatban alkalmazzuk. A savas-vizes-alkanolos extraktumot valamely szénhidrogén-oldószerrel, mint pl. petroléterrel, benzrnnel, hexánnal, heptánnal, benzollal vagy valamely benzolhomológgal extraháljuk. A tetrahidro-alsztonin valamint — az ajmalicint kivéve - a többi gyengén bázisos alkaloid, továbbá a vízben rosszul oldódó nem bázisos kísérőanyagok a benzolos fázisba átoldódnak, s kívánt esetben azokat önmagában ismert módszerekkel kinyerhetjük. A savas-vizes-alkanolos fázist ezután az ajmalicint jól oldó szerves oldószerrel, célszerűen valamely klórozott szénhidrogénnel vagy észterrel extraháljuk. Klórozott szénhidrogénként metilénkloridot, kloroformot, széntetrakloridot, diklóretánt, stb. észterként pl. etilacetátot vagy butilacetátot alkalmazhatunk. A klórozott szénhidrogénes vagy észteres oldatot kívánt esetben fáziscserés és/vagy adszorpciós módszerekkel tisztíthatjuk. így az ajmalicin esetleges nem bázisos kísérőanyagainak eltávolítása céljából a klórozott szénhidrogénes oldatot az ajmalicinnel vízben jól oldódó sókat képző erős savval extraháljuk. Erős savként például kénsavat salétromsavat vagy sósavat alkalmazhatunk. A savat előnyösen híg vizes oldatban, célszerűen néhány tized %-os — néhány %-os vizes oldatban alkalmazzuk. Ezután a savas-vizes fázist lúgosítjuk, célszerűen a pH értékét 7-9-re állítjuk be, majd a közel semleges pH-jú oldatot klórozott szénhidrogénnel vagy észterrel visszarázzuk. Az egyesített szerves fázist adott esetben valamely adszorpicós módszerrel tisztítjuk. Adszorpciós módszer alatt mindig kromatográfiástól eltérő adszorpciós műveletet, célszerűen derítést értünk. Derítő adszorbensként aktívszenet, vagy előnyösen alumíniumoxidot alkalmazunk. A szennyezők adszorbeálódásának mértékét például vékonyrétegkromatográfiás módszerrel ellenőrizhetjük. A tisztított oldatból ezután bepárlással nyeljük ki az ajmalicint, melyet kívánt esetben savaddíciós sóvá alakíthatunk. Az ajmalicin esetleges további tisztítása átkristályosítással és/vagy a savaddíciós sóból felszabadítással történhet. A találmány szerinti eljárást közelebbről az alábbi példákkal szemléltetjük, anélkül, hogy igényünket a példákra korlátoznánk. 1. példa 4,5 kg légszáraz, aprított Catharanthus roseus gyökeret háromszor 1,5 kg-os adagokban 8-8 órán át 20-20 liter metanollal Soxleth rendszerű extraktorban kivonatolunk. A metanolos kivonatot 40-50 °C-os vízfürdőn csökkentett nyomáson 500—600 ml térfogatra sűrítjük be. A sűrítményhez 2,4 liter 1%-os vizes citromsav-oldatot adunk, majd a maradék metanolt is ledesztilláljuk. A desztillációs maradékot szűrjük, és a szűrt citromsavas oldatot hatszor 300 ml benzollal kivonatoljuk, a fázisokat elválasztjuk. Az egyesített benzolos extraktumot 100 ml 1%-os vizes citromsavoldattal visszarázzuk. A benzolos oldat szárazanyagtartalma 3,7 g, melyből önmagában ismert módon 600 mg nyers tetrahidroalsztonint nyerhetünk ki. Az egyesített citromsavas oldatokat ötször 300 ml kloroformmal kivonatoljuk. Az egyesített kloroformos fázisokat 300 ml térfogatra besűrítjük és a sűrítményt először 150 ml, majd négyszer 70 ml normál vizes kénsav-oldattal extraháljuk. A fáziso-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
