178756. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tiolvédőcsoportok eltávolítására aminosavakból és peptidekből
7 178756 8 talált: C =55,11%, H =6,60%, N = 9,48%, S =6,55%, PMB I Z_Gly-Cys-Gly-OMe-t a fentihez hasonlóan állítunk elő. Olvadáspont: 90—95 °C N d7 = -23,1° (c = 0,55, dimetil-formamid). Elemi analízis C24H2902N3S képlet alapján: számított: C = 57,20%, H = 5,80%, N = 8,34%, S = 6,37%, talált: C =57,60%, H=5,8l%, N = 8,23%, S = 6,36%. 1. példa Védőcsoport eltávolítása S-védett ciszteinből 1. S-védett ciszteint (1 millimól) feloldunk 10 ml trifluor-ecetsavban, majd hozzáadunk 0,2 ml anizolt. Az elegyet lehűtjük 0 °C-ra és 319 mg (1 millimól) Hg(CH3 COO)í-ot adunk hozzá. Az elegyet 0 °C-on 15 percig keverjük. A trifuor-ecetsavat csökkentett nyomáson 5 perc alatt lepároljuk és a maradékhoz 40 ml vizet adunk. Az elegyet egyszer éterrel mossuk. 30 percig H2 S-gázt vezetünk be az oldatba és a képződött HgS-ot leszűrjük, majd a szűrletet bepároljuk. A maradékot kevés vízben oldjuk, majd a vizet lepároljuk a savfelesleg eltávolítása céljából. Ezt az eljárást háromszor megismételjük és a végső maradékot aminosav-analizátor segítségével elemezzük. Az eredmények a következő táblázatban láthatók. Az S-benzilcsoport igen stabil a fenti körülmények között. \ S-védett \ aminosav PMB 1 tBu 1 Adm 1 Oldó- \ szer \ 1 H-Cys-OH H-Cys-OH H-Cys-OH 80% hangyasav 85,0% 86,0% 80,0% 80% ecetsav 73,0% 48,0% 15 2 3- S -védett ciszteint (1 millimól) 20 ml 80%-os ecetsavban oldunk, hozzáadunk 0,2 ml anizolt, majd 512 mg 1,2 millimól/Hg(CF3COO)2-t. Az elegyet szobahőmérsékleten 1 óráig keverjük. A reakcióelegyet azután az 1. pontban leírtak 2o szerint kezeljük és elemezzük. Az eredményeket a következő táblázat mutatja: PMB tBu 25 1 1 S-védett aminosav H—Cys—OH H-Cys-OH Cisztein visszanyerése (%) 30 94,0 92,0 Ha Hg(CF3COO)2 helyett Hg/CCl3COO)2-olda- PMB 35 tot használunk, a H—Cys—OH-ból a cisztein kinyerése 96%. S-védett tBu Adm amino1 1 sav H—Cys—OH H-Cys-OH Cisztein viszszanyerése (%) 99,8 102,0 40 PMB I H—Cys—OH 45 100,8 50 A védőcsoportok eltávolítása nem következik be, ha Hg(CH3COO)2 helyett Ag-, Cu-, Zn-, Nivagy Pb-acetátot használunk. 55 2. S-védett ciszteint (1 millimól) feloldunk 10 ml 80%-os hangyasavban vagy 80%-os ecetsavban, majd hozzáadunk 0,2 ml anizolt. Az elegyhez szobahőmérsékleten 319 mg (1 millimól) 60 Hg(CH3COO)2-ot adunk és 1 óráig keverjük. A reakcióelegyet azután a fenti 1. pont szerint kezeljük és elemezzük. Az eredmények a következő táblázatban láthatók: 2. példa Z—Gly—Cys—Gly—OMe előállítása PMB I 1. Z—Gly—Cys-Gly- OMe-ből. 45 ml .hideg trifluor-ecetsavban feloldunk 3,02 g PMB Z—Gly—Cys—Gly—OMe-t, majd hozzáadunk 1,5 ml anizolt. 0 °C-on 1,91 g Hg(CH3 COO)j-ot adunk az elegyhez és 15 percig keverjük. A trifluor-ecetsavat csökkentett nyomáson ledesztilláljuk és a maradékhoz étert adunk. A képződött csapadékot szűréssel összegyűjtjük. Kitermelés: 4,1 g Elemi analízis a Cj8H20O8N3SF3Hg képlet alapján: számított: C =31,06%, H = 2,90%, N = 6,04%, S =4,61%, Hg= 28,82%, F = 8,19%, talált: C = 31,02%, H = 2,87%, N = 6,18%, S =4,60%, Hg= 28,68%, F =8,18%. 4
