178461. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-[(benzoli- ureido)-fenilacetamido]-3 metil-3-cefem-4-karbonsavak előállítására
11 178461 12 rofuránnal készített oldatát csepegtetjük, majd 2 órán át 50°-on keverjük. Ezután a keveréket 10° alá hűtjük, kevés metanolt adunk hozzá, és az oldhatatlan anyagot kiszűrjük. A szűrletet szobahőmérsékleten és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk, és a maradékot kovasavgél oszlopon (Wakogel C-200, gyártja Wako Junyaku K. K. Japán) 3-4% metanolt tartalmazó kloroformmal kromatografálva tisztítjuk. 5 g terméket kapunk fehér por alakjában. 3. 2,0 g D(-)-a-[3-(3,4-diacetoxi-benzoil)-3-metil- 1-ureidoj-fenilecetsav 20 ml metanollal készített oldatához 4 ml 29%-os vizes ammóniáddatot adunk, jeges vízben hűtve. Az elegyet 30 percig keverjük, miközben a hőmérsékletét fokozatosan hagyjuk szobahőmérsékletre emelkedni, és ezután szobahőmérsékleten és csökkentett nyomáson betöményítjük. A maradékhoz 100 ml etilacetátot és 70 ml hideg telített vizes nátriumhidrogénkarbonát-ddatot adunk, és a vizes fázis pH-értékét 8,5-re beállítjuk. A vizes fázist elválasztjuk, a pH-értékét hideg 2 n sósavval kb. 2,5-re beállítjuk, és 200 ml etilacetáttal extraháljuk. Az elválasztott szerves fázist hideg telített vizes n átr iumklorid -oldattal mossuk, nátriumszulfáton szárítjuk, s csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. Fehér por alakjában 1,3 g D(— )-a-[3-(3,4-dihidroxi-benzoil-3-metil-ureido]-fenilecetsavat kapunk. 4. Foszforpentoxid felett tökéletesen megszárított 4,0 g D(—)-a-[3-(3,4-dihidroxi- benzoil)-3-metil-1-ureidoj-a-fenilecetsavat 1,57 g 1-hidroxi-benztriazolt tartalmazó 60 ml száraz tetrahidrofuránban feloldunk. Az oldathoz 0°-on jégfürdőben nitrogénatmoszférában 2,87 g N,N’-diciklohexil-karbodiimid 20 ml száraz tetrahidrofuránnal készített oldatát csepegtetjük. Az oldatot keverjük, és az oldat hőmérsékletét 2 óra alatt fokozatosan hagyjuk szobahőmérsékletre emelkedni, majd a kapott csapadékot, az N,N’-diciklohexil-karbamidot kiszűrjük. A D(-)-a-[3,4-dihidroxi-benzoil)- 3-metil-ureido]-fenilecetsav-l-benztriazolil-észterét tartalmazó szűrletet használjuk a következő reakcióhoz. 5. 6,32 g 7-amino-3-acetoximetil-3-cefém-4-karbonsav 100 ml száraz diklórmetánnal készített szuszpenziójához szobahőmérsékleten nitrogénatmoszférában 11,5 ml N.O-bisztrimetilszilil-acetamidot adunk. Az elegyet keverjük, amíg homogén lesz. Ezután az oldathoz csepegtetjük a 4. szerint kapott összes tetrahidrofurános oldatot, miközben a keverék hőmérsékletét 5-10°-on tartjuk, és az elegyet 8 órán át keverjük. Ezután a reakciókeveréket szobahőmérsékleten és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk, a maradékhoz metanolt adunk, és csökkentett nyomáson újra szárazra pároljuk. A maradékhoz 100 ml etilacetátot és 150 ml hideg telített vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldatot adunk, és az elegyet alaposan átkeverjük. Az oldhatatlan anyagot kiszűrjük, a szűrlet pH-értékét hideg 2 n sósavval 1,0-re beállítjuk. A csapadékot kiszűrjük, 100 ml vízzel mossuk, és 70 ml acetonban feloldjuk. Az oldatot aktívszénnel kezeljük, és szobahőmérsékleten és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékhoz 5 ml acetont adunk, és a keveréket 50 ml dietiléterrel kezeljük. Halványsárga amorf szilárd anyag alakjában 3,5 g 7-[D(—)-a-/ 3- (3,4-dihidroxibenzoil)-3-metil-l-ureido /- a-fenil-acetamido]-3-acetoximetil-3-cefém-4-karbonsavat kapunk (A vegyület). Vékonyrétegkromatogram: Rf = 0,45, II kifejlesztőelegyben, IR spektrum (KBr) nmax (cm-1): 3,700-2,300, 1.775, 16,75, 1520, MMR spektrum (DMSO-dó, 60 MHz) 5 (ppm): 2.02 (3H, s), 3,12 (3H, s), 3,47 (2H, brs), 4,7-5,2 (3H, m), 5,5-5,9 (2H, m), 6,8-7,6 (8H, m), UV spektrum: (EtOH) Amax (nm) 265, 290 (váll). Színreakció vas(III>kloriddal: pozitív (sötétzöld). a) A fent leírtak szerint járunk el, azzal az eltéréssel, hogy köztitermékként a D(— )-a-[3-(3,4-diacetoxi-benzoil)- 3-metil-l-ureido]-a-(4-hidroxi-fenil)-ecetsavat állítottuk elő, amelynek fizikai jellemzői a következők: Vékonyrétegkromatogram: Rf = 0,51, I kifejlesztőelegyben, IR spektrum (KBr) i',,,,, (cm-1): 3,700-2,300, 1,770, 1,740, 1700-1680,1510, MMR spektrum (DMSO—d6, 60 MHz) 6 (ppm): 2.2 (6H, s), 3,12 (3H, s), 5,23 (1H, d, J = 7 Hz), 6,6-7,6 (7H, m), 9,50 (1H, d, J = 7 Hz), így kapjuk a 7-[D(-)-0!-/ 3-(3,4-dihidroxi-benzoil)-3- -metill-ureido /- a-(4-hidroxi-fenil)-acetamido]-3-acetoximetil-3-cefém-4-karbonsavat (B vegyület) halványsárga amorf anyag alakjában. Vékonyrétegkromatogram: Rf = 0,42, II kifejlesztőelegyben, IR spektrum (KBr) rmix (cm-1: 3,700—2,300, 1.775, 1675, 1,510, MMR spektrum (DMSO-d6, 60 MHz) S (ppm): 2,01 (3H, s), 3,19 (3H, s), 3,5 (2H, brs), 4,80-5,15 (3H, m), 5,5-6,1 (2H, m), 6,7-7,6 (7H, m), UV spektrum (EtOH) Amax (nm): 267,292 (váll), Színreakció vas(III)-kloriddal: pozitív (sötétzöld). b) A 3. szerint előállított D(—)-a-[3-(3,4-dihidroxi-benzoil)-3-metil-l- ureidoj-fenilecetsavat a fentiek szerint 7-amino-3-(5-metil-l,3,4-tiadiazol-2-iltiometil)-3-cefém-4-karbonsawal reagáltatjuk, így kapjuk a 7-[D(-)-a-/3-(3,4- dihidroxi-benzoil)-3-metil-l-ureido /-a-fenil-acetamido]- 3-(5-metil-l,3,4-tiadiazol-2-il-tiometil)-3-cefém-4-karbonsavat (C vegyület) halványsárga szilárd amorf anyag alakjában. Vékonyrétegkromatogram: Rf = 0,40, II kifejlesztőelegyben, IR spektrum (KBr) rmax (cm-1): 3,700—2,300, 1.775, 1,680, 1,515: MMR spektrum (DMSO-d6, 60 MHz) S (ppm): 2,69 (3H, s), 3,19 (3H, s), 3,68 (2H, brs), 4,4 (2H, br), 5,04 (1H, d, J=5Hz), 5,6-6,1 (2H, m), 6,9^7,7 (8H, m), UV spektrum (EtOH) Amax (nm): 272. Színreakció vas(III)-kloriddal : pozitív (sötétzöld). c) A fenti eljárás szerint D(—)-<*-[3-(3,4-dihidroxi-benzoil-3metil-l -ureido]- a-(4-hidroxi-fenil)-ecetsavat reagáltatunk 7-amino-3-(5-metil-l,3,4-tíadiazol-2- -il- tiometil)-3-cefém-4-karbonsawal, így kapjuk a 7-[D(—)-<*-/ 3-(3,4-dihidroxi- benzoü)-3-metil-l-ureido /-a-(4-hidroxi-fenil)- acetamido ]-3-(5-metil-1,3,4- -tiadiazol-2-iI-tiometil)- 3-cefém-4-karbonsavat (D vegyület) halványsárga amorf szilárd anyag alakjában. Vékonyrétegkromatogram: Rf = 0,39, II kifejlesztőelegyben, IR spektrum (KBr) >'maxi(cm-1). 3,700—2,300, 1.775, 1,680, 1,510, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
