178359. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a C-15003 jelű antibiotikum előállítására
19 178359 20 keverés után 20 000 súlyrész Hyflo-supercel-t (Johnes és Manville, USA). Az elegyet tovább keverjük és nyomószűrön szűrjük. A kapott szűrlet 1 700 000 térfogatrésznyi mennyiségéhez 500 000 térfogatrész vizet adunk és egy Podbielniakban (Podbielniak Inc.) az elegyet 1 000 000 térfogatrész etilacetáttal extraháljuk. Az etilacetátos réteget vízzel mossuk, vízmentes nátriumszulfát hozzáadásával szárítjuk és csökkentett nyomáson koncentráljuk. A koncentrátumhoz petrolétert adunk és a kapott precipitátumot szűréssel kinyerjük, majd szárítjuk. A fenti eljárással 68 súlyrész I általános képletű nyers terméket kapunk. Ezután a 3., 4. és 5. példákban leírt módon a nyersterméket tisztítjuk. 9,5 súlyrészC—15 003 P—3, 0,300 súlyrész C—15 003 P—3' és 2,5 súlyrész C—15 003 P—4 antibiotikumot kapunk. 1. Referencia példa 1 térfogatrész tetrahidrofuránban feloldunk 0,015 súlyrész C—15 003 antibiotikum kristályt, amelyet az 5. példa szerint állítottunk elő, majd az oldatot lehűtjük — 5 °C-ra és 0,012 súlyrész lítium-alumínium-hidridet adunk hozzá. Az elegyet 2 órán át állni hagyjuk. 0,5 térfogatrész 1%-os vizes kénsav-oldat hozzáadása után a reakcióelegyet 2 térfogatrész etilacetáttal extraháljuk. Az etilacetátos réteget vízzel mossuk, vízmentes nátriumszulfát hozzáadásával szárítjuk és csökkentett nyomáson koncentráljuk. Szilikagéilel végzett preparatív vékonyrétegkromatografáiást végzünk a koncentrátumon és az Rf 0,25—0,3-nak megfelelő zónát összegyűjtjük és kis mennyiségű vizet tartalmazó etilacetáttal extraháljuk. Az extraktumot vízzel mossuk, vízmentes nátriumszulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson koncentráljuk, amikor kristályok kiválását tapasztaljuk. A kristályokat szűréssel elkülönítjük és szárítjuk. A fenti eljárással 0,010 súlyrész C—15 003 P—0-t kapunk, melynek olvadáspontja- 174 °C. Analíziseredmények a C2gH37ClN2Os összegképlet alap- 5 ján: Számított: C=59,52%; H=6,60%; N=4,96%- Cl= = 6,37%; Talált: C=59,65%; H=6,58%; N=5,02%- Cl= =6,51%. 10 IR-psektrum: 1715, 1580 (cm-1) Ultraibolya spektrum: 232 (32 750), 244 (sh, 30 850) 252 (31 650), 281 (5750), 288 (5700) Tulajdonságai alapján a termék a maytanzinollal azonos. 15 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az I általános képletű, C—15 003 jelű antibiotikum előállítására, ahol a képletben 20 /CHj R jelentése egy —CO—CH^ —CO—CH2— \ch3, —CH2—CHj /CHj 25 vagy —CO—CH2—CHf' csoport, \CHj azzal jellemezve, hogy egy, a Nocardia genus-hoz tartozó, a C—15 003 antibiotikum termelésére alkalmas mikroorganizmust egy asszimilálható szénforrásokat 30 és emészthető nitrogénforrásokat tartalmazó táptalajban tenyésztünk mindaddig, míg az antibiotikum jelentős mennyisége halmozódik fel, majd a C—15 003 antibiotikumot elkülönítjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási 35 módja, azzal jellemezve, hogy mikroorganizmusként az ATCC 31 281 számon letétbe helyezett Nocardia C—15 003 mikroorganizmust használjuk. 1 db ábra A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 83.48.66-4 Alföldi Nyomda» Debrecen — Felelős vezető: Benkő István igazgató
