177889. lajstromszámú szabadalom • Eljárás B l2 vitamin aktivitású fermentlevek többirányú feldolgozására
9 177889 10 9. példa A 6. példában leírtakkal analóg módon járunk el, azzal a két különbséggel, hogy a metanolos kivonatolás után nátrium-nitrit helyett nátrium-hidrogén-szulfitot adunk az extraktumhoz, továbbá, hogy nátrium-cianid helyett ismételten nátrium-hidrogén-szulfitot adunk a vizes koncentrátumhoz. Kitermelés: 1,284 g kristályos szulfito-kobalamin és 0,120 g kristályos szulfito-faktor III. Melléktermékként 931 g száraz port kapunk, melynek a XIX. amerikai gyógyszerkönyv szerint mért mikrobiológiai aktivitása 103 ;xg/g, összesen pedig 0,096 g. A kiindulási anyagra vonatkoztatott kitermelés 86,1%. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás Bi2-vitamin aktivitású fermentlevek többirányú feldolgozására a mikroorganizmusok háromértékű fémsóval való leválasztása, szárítása és adott esetben extrakciója útján, azzal jellemezve, hogy a steril vagy asteril módon nyert fermentlé B12-vitamin aktivitású mikroorganizmusainak felületi töltését az élő szervezetre ártalmatlan háromértékű fémsóval, előnyösen valamely alumíniumsóval pH 2,5—6,9, előnyösen pH 3,0— 6,0 értékek között közömbösítjük, a levált csapadékot tömörítjük, kívánt esetben a mikrobiális sűrítményhez vízoldékony szilikátsót adunk, a kapott terméket kívánt esetben ismert módon megszárítjuk, a kapott koncentrátumból vagy magából a mikrobiális sűrítményből 5 kívánt esetben a hatóanyagot vízzel, vagy rövid szénláncú alkanolok vagy ketonok vizes oldatával, vagy ezek elegyével kivonatoljuk, az extraktumban levő kobamid koenzimeket kinyerjük vagy nitrito-, szulfito-, vagy tiocianáto-kobalaminná alakított stabilizált formáju- 10 kát, előnyösen a szerves oldószer eltávolítása, továbbá az extrahált vizes oldatból a fehérje- és ballaszt-anyagok só és alifás keton hozzáadásával való eltávolítása után kinyerjük, vagy kívánt esetben ismert módon cianovagy hidroxo-kobalaminná alakítjuk. 15 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a háromértékű fémsót a fermentlé térfogatára számítva 0,004—0,4% fémion, előnyösen 0,03—0,06% fémion mennyiségben alkalmazzuk. 20 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy vízoldékony szilikátsóként kálium- vagy nátrium-szilikátot alkalmazunk. 4. Az 1. vagy 3. igénypontok szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a vízoldékony szili- 25 kátsót a mikrobiális sűrítmény térfogatára számított 0,01—1,0%, előnyösen 0,1—0,3% mennyiségben alkalmazzuk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 83.6812.66-4 Alföldi Nyomda, Debrecen — Felelős vezető: Benkő István igazgató