177878. lajstromszámú szabadalom • Eljárás albumin kinyerésére vérplazmából
MAGYAR SZABADALMI 177878 NÉPKÖZTÁRSASÁG LEÍRÁS SZOLGALATI TALALMANY lö l Bejelentés napja: 1978. XI. 21. (OA—612) Nemzetközi osztályozás : ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1981. VI. 27. Megjelent: 1983. X. 31. C 07 G 7/00 Feltalálók: Dr. Haskó Ferenc vegyész, Dr. Novák Ernő orvos, Budapest Szabadalmas: Országos Haematológiai és Vértranszfúziós Intézet, Budapest Eljárás albumin kinyerésére vérplazmából 1 2 A találmány tárgya eljárás nagy tisztaságú albumin kinyerésére vés plazmából polietilénglikolos frakcionálás és hőkezelés útján. . Ismeretes, hogy a transzfúziós technikában nagy mennyiségben alkalmazzák az albumint és általában a vérplazma izolált fehérjekomponenseit a teljes vér helyett. A komponensek alkalmazása gyógyászatilag előnyös és gazdaságos. Statisztikai adatok szerint (svájci vöröskereszt, skót és francia vérellátó) az 1 millió lakosra jutó albumin szükséglet évente 200 kg, és ez az érték a jövőben tovább fog emelkedni. Ezért régóta törekednek olyan egyszerű és gazdaságos eljárás kidolgozására, amely lehetővé teszi nagy mennyiségű tiszta albumin kinyerését vérplazmából. Nagy tisztaságú albumin előállítására legelterjedtebb a Cohn-féle hideg alkoholos módszer [E. J. Cohn et ah, J. Amer. Chem. Soc. 68, 459 (1946)]. Az eljárás szerint az alkohol koncentrációjánál, a pH-értékének és az ionerősségnek a változtatásával választják el egymástól a vérplazma fehérje-frakcióit. Az eljárás hátránya, hogy a magas alkohol-koncentráció miatt nagy a fehérjék denaturálódásának veszélye. Ezt úgy védik ki, hogy erőteljes hűtéssel (— 5 és —15 °C közötti hőmérsékleten) dolgoznak, ami viszont nagyon megnehezíti az eljárás technikai kivitelezését. A vérplazma fehérjék frakcionálására, így az albumin elkülönítésére alkalmasak a polihidroxi-vegyületek is, így például- a metilcellulóz, dextrán és polietilénglifcol |A. Poison, C« Ruiz Bravo, Vox Sang. Basel, 23, 107 (1972)]. Legelterjedtebben a polietilénglikolt alkalmazzák (T. C. Laurent, Biochem. J. 89, 249 (1963) ; A. Poison és munkatársai, B.B.A. 82, 463 (1964) ]. Polietilénglikol jelenlétében nem denaturálód- 5 nak a fehérjék, ezért a frakcionálás szobahőmérsékleten végezhető. A módszer hátránya viszont, hogy nem lehet teljesen tiszta frakciókat nyerni, így az albuminfrakció is további tisztításra' szorul. Schneider és munkatársai 90/o etilalkohol és 0.05M nátriumkaprilát 10 jelenlétében 68 °C-on végzett hősokkolással állítottak elő tiszta albumint [W. Schneider et al., Vox Sang. 31, 141 (1976)]. Az alkalmazott körülmények között az albumin kivételével valamennyi fehérje kicsapódik, és így az oldatban tiszta albumin marad. A módszer 15 hátránya, hogy az egyéb fehérjék nehezen szűrhető formában csapódnak ki, nagyrészt denaturálódnak, és az adott körülmények között az albumin is könnyen denaturálódik. Összefoglalva tehát az eddig ismert és alkalmazott 20 eljárások hátránya egyrészt az, hogy kellő tisztaságú albumin csak soklépcsős frakcionálással, tehát 4—5, vagy esetleg hatszori lecsapással állítható elő, másrészt az, hogy az alkohol erős denaturáló hatását még az albumin viszonylag nagy ellenállóképessége, valamint 25 az adagolt kaprilát vagy más anyag védőhatása sem tudja ellensúlyozni. Mimiez az eljárás alacsony kitermelését és jelentős album in veszteséget eredményez. A találmány célja az ismert módszerek hátrányainak kiküszöbölésével olyan eljárás kidolgozása vérplaz- 30 mából albumin elkülönítésére, amely technikailag 177878
