177716. lajstromszámú szabadalom • Eljárás spirohidantoin származékok előállítására
17 177716 18 Gátlási % Vegyület io-4m io-5m 10-6 Mi io-7m XXII. példa terméke 59 95 91 84 XXIII. példa terméke 85 90 78 81 XXIV. példa terméke 73 81 77 64 XXV. példa terméke 72 49 5 0 XXVI. példa terméke 87 85 52 6 XXVII. példa terméke 87 80 64 16 XXVIII. példa terméke 85 74 74 28 XXIX. példa terméke 94 69 31 2 XXX. példa terméke 81 64 22 4 XXXI. példa terméke 71 84 54 17 XXXIV. példa Az I—V., VII—IX., XI—XVI., XVIII—XXIV., XXVI. és XXVII—XXX. példák spirohidantoin-vegyületeit abból a szempontból vizsgáljuk a 3,821,383 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás módszerével, hogy milyen mértékben képesek meggátolni streptozotocinnal kezelt(azaz cukorbeteg) patkányok ülőidegében a szorbitfelhalmozódást. E vizsgálat során az ülőidegben való szorbitfelhalmozódást a diabetes indukálása után 27 óra múlva mérjük. A vizsgált vegyületeket orálisan, a megadott dózisszinteken alkalmazzuk a streptozotocin-kezelést követő 4, 8 és 24 óra múlva. A kapott eredményeket a gátlás %-ában adjuk meg, a kezeletlen kontroll állatokkal való összehasonlítás alapján (a kezeletlen állatok szorbitszintje a 27 órás vizsgálati periódus alatt 50—100 millimól/gramm szövet értékről 400 millimól/gramm szövet értékig emelkedik). Gátlási % Vegyület 0,75 1,5 2,5 5,0 10 mg/kg I. példa terméke 29 _ 52 67 II. példa terméke — — — 6 54 III. példa terméke — — — 45 — IV. példa terméke — — — 33 49 V. példa terméke — — — 9 — VII. példa terméke — — — 39 65 VIII. példa terméke — — — 26 — IX. példa terméke — — 58 — — XI. példa terméke •— — — 59 — XII. példa terméke 13 45 74 — — XIII. példa terméke — 5 — — — XIV. példa terméke — 26 — — — XV. példa terméke — — — 25 44 XVI. példa terméke — — — — 3 XVIII. példa terméke — — — — 15 XIX. példa terméke — — 34 58 77 XX. példa terméke — — 24 — — XXI. példa terméke 45 72 — — — XXII. példa terméke — 64 — — — XXIII. példa terméke 82 — — — — XXIV. példa terméke 64 84 — — — XXVI. példa terméke — 30 — ' — — XXVII. példa terméke — 35 — — — XXVIII. példa terméke — — 47 68 — XXIX. példa terméke 28 — 12 — — XXX. példa terméke — — — 5 — 6-Fluor-spiro[kromán-4,4'-imidazolidin]-2',5'-diont (a XXI. példa terméke) abból a szempontból vizsgálunk, hogy milyen mértékben képes visszafordítani streptozotocinnal 2 héttel korábban indukált (azaz idült) diabetes esetében a patkányok már meglevő magas szorbitszintjét. A vizsgált vegyületet 7 napon át orálisan adjuk be az állatoknak. Vizsgálataink során a szorbit-meghatározást mind az ülőidegben, mind a szemlencsében elvégezzük. A streptozotocint előzőleg intravénásán, 65 mg/kg menynyiségben adjuk be az állatoknak, majd 2 hétig kezeletlenül hagyjuk őket. E periódus végén egy 8 patkányból álló „kontroll” csoportot (I. kontroll csoport) megölünk és belőlük elvégezzük a szorbit-alapszint meghatározását. A fennmaradó 7—7 állatból álló két csoportot vagy 6-fluor-spiro[kromán-4,4'-imidazolidin]-2',5'-dion 2,5 mg/kg dózisával, vagy tiszta vízzel kezeljük naponta kétszer (II. kontroll csoport). 7 nap múlva a patkányokat megöljük (az utolsó dózis után 3 óra múlva) és azt találjuk, hogy míg a kontroll csoportban (II. kontroll csoport) az ülőideg szorbitszintje kis mértékben az alapszint-értékek fölé emelkedik, a szemlencse esetében pedig az alapszint értékén marad, addig a vizsgált vegyülettel kezelt csoportnál a szorbitszint lényegesen lecsökkent mind az ülőidegben (68%), mind a szemlencsében (71%). XXXV. példa XXXVI. példa 6-Fluor-spiro[kromán-4,4'-imidazolidin]-2',5'-diont abból a szempontból vizsgálunk, hogy milyen mértékben képes meggátolni a galaktit-képződést heveny galaktozémiás (magas vérgalaktóz-szintű) patkányoknál. A vizsgált vegyületet 7 napon át az állatok táplálékával elkeverve adagoljuk. A vizsgálatot úgy hajtjuk végre, hogy egészséges hím patkányokat először két, 6—6 állatból álló csoportra osztunk, majd 30% galaktózt és a vizsgálandó vegyület két különböző dózisát tartalmazó diétán tartunk. Az állatok egyik csoportja 10 mg/kg, és a másik 20 mg/kg 6-fluor-spiro[kromán-4,4'-imidazolidin]-2',5'-diont kap. Egy 9 állatból álló kontroli-csoportot csak 30% galaktózt tartalmazó eledellel táplálunk. A 7 napos időszak végén a szemlencséket eltávolítjuk galaktóz-meghatározás céljából. Azt találtuk, hogy míg a kontroll állatok esetében a poliolszint a kezdeti alacsony koncentrációról 3 mikromól/gramm fölé emelkedik, addig a vizsgálandó vegyülettel kezelt állatoknál a galaktit-koncentráció igen kifejezett gátlása következik be (20 mg/kg dózisszintnél 72%-os és 10 mg/kg dózisszintnél 40%-os gátlás). XXXVII. példa Meghatározzuk 6-fluor-spiro[kromán-4,4'-imidazolidin]-2',5'-dion galaktozémiás (magas vér-galaktózszinttel rendelkező) patkányok hályogképződésére kifejtett hatását olyan módon, hogy a patkányokat 30% galaktózt és a vizsgálandó vegyületet tartalmazó, illetve az utóbbit nem tartalmazó diétán tartjuk 29 napon át és szemüket e periódus alatt mintegy heti két alkalommal rutinszerűen megvizsgáljuk. A kísérleti állatok a vizsgálandó vegyületet a táplálékukhoz hozzákeverve kapják oly módon, hogy a hatóanyagkoncentráció körülbelül 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
