177561. lajstromszámú szabadalom • Eljárás poliamidhoz kötött, biológiailag aktív protein előállítására
9 177561 10 a) 5 mg/ml koncentrációjú, 0,1 mólos, 7,8 pH-jù foszfátpufferral készült glukózoxidáz-oldatot töltünk belé, b) 372 mg glukózoxidáz 4,5 ml 0,1 mólos, 7,8 pH-jú oldatához 6,5 mg, 0,5 ml dioxánban oldott etilénglikol-bisz-propionsav-bisz-hidroxiszukcinimidésztert adunk hozzá, majd éjszakán át 4 Cc-on állni hagyjuk. Ezután a térhálósított glukózoxidázt Sephadex G 200R (térhálósított dextrán) kolonnán kromatográfáljuk, és a térhálós részt (kizárási térfogat kb. 90%) 0,1 mólos, 7,8 pH-jú foszfátpufferban a fenti csőben töltünk. Az a) esetben az aktivitás 4 U/m, a b) esetben 9 U/m. 14. példa 10 g 0,100—0,125 mm átmérőjű nylon-6 szemcsét 100 ml 40%-os hangyasavban szuszpendálunk, és 2,25 g trioxánt (0,075 mól formaldehid-egységet) és 9,4 g (0,1 mól) fenolt adunk hozzá. 3 órán át 50 C' -on tartjuk, majd leszűrjük, metanollal, ezt követően pedig vízmentes éterrel lemossuk. A szemcséket 250 ml olyan toluolban szuszpendáljuk, amelyben előzőleg 10 ml hexametiléndiizocianátot oldottunk, 2 óra múlva leszívatjuk, vízmentes éterrel mossuk, és azonnal 15 mg/ml koncentrációjú, 0,1 mólos, 7,0 pH-jú foszfátpufferral készült glukózoxidázt adunk hozzá. Éjszakán át állni hagyjuk, majd mossuk. Az ezután mért aktivitás 11,2 U/g. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás proteinnek poliamidon vagy ismert szilárd hordozóra felvitt poliamidon történő rögzítésére, azzal jellemezve, hogy a poliamidot, valamely poliamid-oldószer jelenlétében, ekvimoláris mennyiségű formaldehiddel és egy aromás aminnal, triazinnal, karbamiddal, fenollal vagy zselatinnal 0 és 100 Cc közötti hőmérsékleten reagáltatunk olyan poliamid-származék képzése közben, amely a láncban —CO—N— I 5 CH2 I R2 általános képletű lánctagokat tartalmaz, amelyben R2 jelentése aromás aminból, triazinból, karbamidból, fenolból vagy zselatinból származó csoport, 10 ezt a poliamid-származékot egy ismert bi- vagy polifunkciós kapcsoló reagenssel vagy szervetlen nitrittel reagáltatjuk, majd önmagában ismert módon diazotáljuk és ezután vizes oldatban biológiailag aktív proteinnel vagy protein-szubsztrátummal érintkeztetjük, utóbbi megkötődése 15 mellett. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a formaldehiddel történő reakciót legalább 50%-os hangyasavban vagy ecetsavban mint poliamid oldószerben hajtjuk végre. 20 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a poliamidot formatest alakjában alkalmazzuk és csak felületét kezeljük oldószerrel. 4. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a poliamidot oldata alakjá-25 ban reagáltatjuk, és a poliamid-származékot azután szilárd hordozóanyag felületére csapjuk le. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy kapcsoló reagensként glutárdialdehidet, dihidroxiszukcinimidésztert, diacetált, bisz-maleini-30 midet, bifunkcionális iminoésztert, diepoxidot, dikarbonsavkloridot, diizocianátot vagy diizotiocianátot — mely vegyületek 2—12 szénatomosak — alkalmazunk. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy kapcsolóreagensként akrilamid/me-35 takrilamid-ból és akrilsavszukcinimidészter/metakrilsavszukcinimidészter-ből álló kopolimert alkalmazunk. A kâdâbèrt fekí : a Közgazdasági és jogi Könyvkiadó igvzpitéje 82.6683.60-42 A&Hdi Nyocad*» Debrecen — Fddös -vesÉSÖ: fitafekö Istvia Ípgpit6 5
